L-Leucine-d10 (L-leucine d10)

别名: L-亮氨酸 -D10;L-亮氨酸 -D10氘代内标;L-亮氨酸-C-D10; L-亮氨酸-d10
目录号: V70234 纯度: ≥98%
L-亮氨酸-d10 是 L-亮氨酸的氘标记形式。
L-Leucine-d10 (L-leucine d10) CAS号: 106972-44-5
产品类别: Endogenous Metabolite
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
Other Sizes

Other Forms of L-Leucine-d10 (L-leucine d10):

  • L-亮氨酸
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产品描述
L-亮氨酸-d10是L-亮氨酸的氘标记形式。L-亮氨酸是一种必需的支链氨基酸(BCAA),能够激活mTOR信号通路。
L-亮氨酸-d10 是一种合成的、稳定同位素标记的 L-亮氨酸类似物,是必需支链氨基酸 L-亮氨酸的类似物。在该化合物中,十个氢原子 (¹H) 被氘原子 (2H) 取代。这种氘标记使其质量相对于天然化合物发生了显著变化 (+10 Da),因此 L-亮氨酸-d10 是利用气相色谱-质谱联用 (GC-MS) 或液相色谱-质谱联用 (LC-MS) 精确定量 L-亮氨酸的理想内标。
生物活性&实验参考方法
靶点
Not applicable. L-Leucine-d10 is not used to measure pharmacological activity. It is employed as an internal standard and stable isotope tracer. Its purpose is to facilitate precise quantification of unlabeled L-Leucine in biological samples using mass spectrometry. The pharmacological profile is identical to that of unlabeled L-Leucine.
体外研究 (In Vitro)
药物化合物中通常包含碳、氢和其他元素的稳定重同位素,主要用作药物研发过程中的定量示踪剂。由于氘代可能影响药物的药代动力学和代谢特性,因此值得关注[1]。
不适用。L-亮氨酸-d10 本身并不用于测定生物活性,它是一种分析标准品。然而,其母体化合物 L-亮氨酸是一种必需氨基酸,能够提高基础代谢率,并且是 mTORC1 信号通路的强效激活剂。标记形式的 L-亮氨酸-d10 可用作示踪剂,用于研究亮氨酸自身的代谢。
体内研究 (In Vivo)
不适用。L-亮氨酸-d10 是一种分析标准品,不用于体内活性测定。但是,它可以作为代谢示踪剂用于研究蛋白质合成和氨基酸代谢。为此,需给予示踪剂剂量(例如 10-20 mg/kg),并通过质谱法追踪其掺入蛋白质或转化为代谢物的情况。
酶活实验
L-亮氨酸-d10 用作 L-亮氨酸定量分析的内标。配制 L-亮氨酸-d10 储备液,溶剂为 0.1 M HCl 或甲醇。蛋白质沉淀时,取 100 uL 生物样品(血浆、尿液)与 300 uL 冰冷的含固定浓度 L-亮氨酸-d10(例如 50 ng/mL)的乙腈混合。涡旋振荡并离心后,将上清液转移至自动进样器样品瓶中,采用 LC-MS/MS 的 MRM 模式进行分析。质谱跃迁为:L-亮氨酸 (m/z 132 → 86) 和 L-亮氨酸-d10 (m/z 142 → 96)。利用 L-亮氨酸与 L-亮氨酸-d10 的峰面积比值,根据校准曲线计算浓度。 10 Da 的质量偏移确保不会与天然分析物发生串扰。
细胞实验
为了进行细胞代谢通量分析,将细胞(例如原代肝细胞或神经元细胞)在含有L-亮氨酸-d10(0.1-1 mM)的培养基中培养0.5-24小时。标记的亮氨酸通过氨基酸转运蛋白被细胞吸收,并可掺入细胞蛋白中。标记结束后,收集细胞并裂解。采用BCA法测定蛋白质浓度,并在6 M HCl中水解蛋白质。水解产物经衍生化处理(例如,使用MTBSTFA进行GC-MS分析,或使用丹酰氯进行LC-MS分析)以提高挥发性。通过GC-MS或LC-MS测定氘标记掺入氨基酸池和蛋白质组分的量。这些数据可用于计算蛋白质的合成和降解速率。
动物实验
L-亮氨酸-d10 用于代谢示踪研究。动物(例如,雄性 Sprague-Dawley 大鼠,200-250 g)禁食过夜后,通过静脉或口服途径给予示踪剂量的 L-亮氨酸-d10(例如,20 mg/kg)。在预定时间点(例如,给药后 0、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12 和 24 小时)采集血样。分离血浆,并用含有 L-亮氨酸-13C6,15N 作为二级内标的乙腈沉淀蛋白质。采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 分析上清液。可以追踪标记亮氨酸的清除率及其向代谢物(例如,α-酮异己酸)的转化。这些数据可用于通过动力学建模计算全身蛋白质周转率。
药代性质 (ADME/PK)
L-亮氨酸-d10(分子量 141.23)是一种高同位素纯度(98 原子% D)的稳定同位素标记化合物。其理化性质与天然 L-亮氨酸完全相同,因此在生物系统中表现出相同的特性。它易溶于水且性质稳定。本品仅供用作内标,不可用于人体。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
L-亮氨酸-d10 是一种无毒的稳定同位素标记化合物。在用作内标的浓度(ng/mL 级别)下,它不构成毒理学风险。未标记的母体化合物 L-亮氨酸是一种必需氨基酸,在营养摄入水平下可安全食用。标记的类似物在示踪剂量下未发现急性或慢性毒性。
参考文献

[1]. Impact of Deuterium Substitution on the Pharmacokinetics of Pharmaceuticals. Ann Pharmacother. 2019;53(2):211-216.

[2]. Stimulation of mTORC1 with L-leucine rescues defects associated with Roberts syndrome. PLoS Genet. 2013;9(10):e1003857.

[3]. Synergistic effects of leucine and resveratrol on insulin sensitivity and fat metabolism in adipocytes and mice. Nutr Metab (Lond). 2012 Aug 22;9(1):77.

[4]. L-leucine alters pancreatic β-cell differentiation and function via the mTor signaling pathway. Diabetes. 2012 Feb;61(2):409-17.

其他信息
氘代L-亮氨酸是一种氘代化合物。
L-亮氨酸-d10 可用作 GC 或 LC-MS 法定量 L-亮氨酸的内标。它是一种高纯度、高同位素富集的化合物,适用于氨基酸代谢和蛋白质周转研究等应用。CAS:106972-44-5。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C6H3D10NO2
分子量
141.23
精确质量
141.157
CAS号
106972-44-5
相关CAS号
L-Leucine;61-90-5
PubChem CID
16213587
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.0±0.1 g/cm3
沸点
225.8±23.0 °C at 760 mmHg
熔点
>300 ℃(lit.)
闪点
90.3±22.6 °C
蒸汽压
0.0±0.9 mmHg at 25°C
折射率
1.463
LogP
0.73
tPSA
63.32
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
3
重原子数目
9
分子复杂度/Complexity
101
定义原子立体中心数目
1
SMILES
[2H][C@@](C(=O)O)(C([2H])([2H])C([2H])(C([2H])([2H])[2H])C([2H])([2H])[2H])N
InChi Key
ROHFNLRQFUQHCH-ZWFPVXGPSA-N
InChi Code
InChI=1S/C6H13NO2/c1-4(2)3-5(7)6(8)9/h4-5H,3,7H2,1-2H3,(H,8,9)/t5-/m0/s1/i1D3,2D3,3D2,4D,5D
化学名
(2S)-2-amino-2,3,3,4,5,5,5-heptadeuterio-4-(trideuteriomethyl)pentanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮和光照。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 7.0806 mL 35.4032 mL 70.8065 mL
5 mM 1.4161 mL 7.0806 mL 14.1613 mL
10 mM 0.7081 mL 3.5403 mL 7.0806 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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