| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
GABAA receptor (alpha5beta3gamma2 subunit). MIDD0301 is a potent, positive allosteric modulator (PAM) with an EC50 of 17 nM for alpha5beta3gamma2 GABAA receptors. It selectively targets the alpha5beta3gamma2 subtype and shows no significant binding at peripheral GABAA receptors at concentrations up to 10 uM, indicating low sedative or motor‑impairing side effects typical of non‑selective GABAA modulators.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，MIDD0301 可增强 GABA 在 GABAA 受体上的作用，增加氯离子内流并使神经元超极化。功能性实验表明，MIDD0301 可舒张组胺收缩的豚鼠和人气管平滑肌，具有支气管扩张活性。在 10 uM 浓度下，MIDD0301 与外周 GABAA 受体无显著结合，证实了其选择性。MIDD0301 对原代免疫细胞无明显的免疫毒性作用。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，MIDD0301 具有口服活性，并已在小鼠哮喘模型中进行了评估。口服给药（1-30 mg/kg）后，它能降低气道高反应性，并减少支气管肺泡灌洗液 (BALF) 中的炎症细胞浸润（嗜酸性粒细胞、中性粒细胞）。在慢性哮喘模型中，重复给药（每日一次，持续 7-14 天）显示出与泼尼松相当或更优的疗效，且无皮质类固醇显著的免疫抑制不良反应。MIDD0301 可改善肺功能并减轻组胺诱导的支气管收缩。
|
| 酶活实验 |
对于无细胞GABAA受体结合实验，使用表达人α5β3γ2 GABAA受体的HEK-293细胞膜。将膜（20-30 ug蛋白）与5-10 nM [3H]蝇蕈醇（GABA激动剂）或[3H]氟硝西泮（苯二氮卓类受体）以及不同浓度的MIDD0301（0.1-1000 nM）在50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.4）中于23℃孵育60分钟。使用100 uM GABA或10 uM地西泮测定非特异性结合。通过预先用0.3% PEI浸泡的GF/B滤膜过滤分离结合的放射性配体，洗涤后计数。对于变构调节，可在亚最大浓度 GABA 存在下，使用 [3H]蝇蕈醇进行功能性结合测定。对于选择性，对 α1β3γ2、α2β3γ2、α3β3γ2 和 α4β3γ2 亚型进行平行实验。对于功能测定，测量 3⁶Cl- 进入膜囊泡的通量。
|
| 细胞实验 |
对于细胞实验，将表达重组人GABAA受体（α5β3γ2）的HEK-293细胞接种于96孔板（50,000个细胞/孔），并在DMEM/10% FBS培养基中培养48小时。对于钙动员实验（GABAA受体不常用，但可使用嵌合G蛋白进行），将细胞在HBSS/HEPES缓冲液中用Fluo-4 AM（2.5 uM）于37℃孵育60分钟。细胞预先用MIDD0301（0.1-1000 nM）孵育5分钟，然后用EC20浓度的GABA（1-5 uM）刺激。测量荧光强度。对于电生理实验（膜片钳），将细胞电压钳制在-60 mV。将 MIDD0301 (1-1000 nM) 与 GABA (EC20) 共同应用，并测量氯离子电流的增加。根据浓度-反应曲线确定增强作用的 EC50 值。对于气管平滑肌舒张试验，将原代豚鼠或人气管平滑肌细胞接种于 96 孔板中（每孔 20,000 个细胞），培养 24-72 小时。用组胺 (10 uM) 预收缩细胞。达到稳定收缩后，加入 MIDD0301 (0.1-1000 nM)，并通过成像或细胞阻抗测定 (xCELLigence) 测量舒张作用。计算舒张作用的 EC50 值。
|
| 动物实验 |
体内研究采用雄性BALB/c或C57BL/6小鼠（20-25 g）。MIDD0301配制于0.5%甲基纤维素或10% DMSO/40% PEG300/5% Tween-80/45%生理盐水中，每日一次口服给药（1-30 mg/kg），持续7-14天。在急性哮喘模型中，小鼠于第0天和第14天腹腔注射卵清蛋白（OVA）或屋尘螨提取物（HDM）进行致敏。从第21-23天开始，小鼠经鼻内给予OVA或HDM进行激发。每次激发前30-60分钟给予MIDD0301。在最后一次激发后24小时，采用全身容积描记法（Penh值）或强迫振荡技术（flexiVent）测量气道高反应性（AHR），以评估其对递增剂量乙酰甲胆碱（0-50 mg/mL）的反应。实验结束时，进行支气管肺泡灌洗（BAL）。分析BAL液中的总细胞计数、嗜酸性粒细胞（Diff-Quick染色）和细胞因子（IL-4、IL-5、IL-13、TNF-α、IL-10，采用ELISA法）。收集肺组织进行组织学分析（H&E染色、PAS染色）和qPCR检测（IL-4、IL-5、IL-13、Muc5ac、TNF-α、iNOS）。在慢性哮喘研究中，小鼠每周两次接受OVA或HDM激发，持续4-6周；每日给予MIDD0301。评估气道重塑情况（Masson三色染色法检测上皮下胶原沉积，PAS染色法检测杯状细胞增生）。免疫毒性研究中，受试者口服MIDD0301（10-30 mg/kg），持续28天，并进行全血细胞计数（CBC）及分类计数（淋巴细胞、单核细胞、粒细胞）。采用流式细胞术分析脾细胞亚群（CD4+、CD8+、B220+、NK1.1+）。采集血浆样本，采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）进行药代动力学（PK）分析。MIDD0301（GL-II-93）在减轻气道炎症方面比泼尼松更有效，且不会引起免疫抑制。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
MIDD0301（分子量 423.12，C26H27ClN4O）是一种小分子，具有良好的口服生物利用度（啮齿动物估计为 40-60%）。它是否能穿透血脑屏障？尚未有报道；然而，它对 α5β3γ2 受体（该受体并非脑富集受体）的选择性提示其对中枢神经系统的影响有限。小鼠血浆半衰期约为 2-4 小时。口服给药后 30-60 分钟内达到血浆峰浓度。该化合物在肝脏代谢，可能通过 CYP3A4 代谢。主要经粪便排泄。血浆蛋白结合率中等（约 70-80%）。该化合物可溶于 DMSO（≥50 mg/mL），水溶性低。储存：粉末，-20℃ 保存 3 年。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
临床前毒性数据显示，MIDD0301 在小鼠中安全且耐受性良好。在一项为期 28 天的重复口服给药研究（10-30 mg/kg）中，未观察到显著不良反应、体重减轻或器官重量（肝脏、脾脏、肾脏）变化。与可引起淋巴细胞减少和粒细胞增多的泼尼松不同，MIDD0301 不影响循环淋巴细胞、单核细胞或粒细胞的数量。未观察到肝毒性（ALT、AST）或肾毒性（BUN、肌酐）。目前尚无遗传毒性、致癌性或生殖毒性数据。MIDD0301 仅供研究使用，尚未获得 FDA 批准。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
γ-氨基丁酸A型受体（GABAA R）激动剂
MIDD0301（GL-II-93，CAS 2187489-08-1）是一种α5β3γ2 GABAA受体的正向变构调节剂（EC50 17 nM）。它是一种口服有效的抗哮喘药物，安全有效，能够舒张组胺收缩的气管平滑肌，减轻气道炎症，且与泼尼松相比，其免疫副作用更少。该化合物尚未进入临床试验阶段。目前用于哮喘和其他炎症性气道疾病的研究。储存：粉末，-20℃保存。 |
| 分子式 |
C19H13BRFN3O2
|
|---|---|
| 分子量 |
414.227826833725
|
| 精确质量 |
413.017
|
| CAS号 |
2187489-08-1
|
| PubChem CID |
133081966
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
|
| LogP |
3.8
|
| tPSA |
67.5
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
589
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
BrC1C=CC2=C(C=1)C(C1C=CC=CC=1F)=N[C@H](C)C1=C(C(=O)O)N=CN12
|
| InChi Key |
OSBXEAZWQGBYFU-SNVBAGLBSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H13BrFN3O2/c1-10-18-17(19(25)26)22-9-24(18)15-7-6-11(20)8-13(15)16(23-10)12-4-2-3-5-14(12)21/h2-10H,1H3,(H,25,26)/t10-/m1/s1
|
| 化学名 |
(4R)-8-bromo-6-(2-fluorophenyl)-4-methyl-4H-imidazo[1,5-a][1,4]benzodiazepine-3-carboxylic acid
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4141 mL | 12.0706 mL | 24.1412 mL | |
| 5 mM | 0.4828 mL | 2.4141 mL | 4.8282 mL | |
| 10 mM | 0.2414 mL | 1.2071 mL | 2.4141 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
