H3 Receptor 8.9 (pKi, for rat) H3 Receptor 9.24 (pKi, for human)

体外表征JNJ-5207852 [1]
JNJ-5207852（1-[4-（3-哌啶-1-基丙氧基）苄基]-哌啶）的结构如图1所示。在放射性配体结合实验中，JNJ-5207852对人和大鼠H3受体均表现出较高的亲和力，pKi值分别为9.24±0.21和8.90±0.17（平均±s.d）。至少有两个三胞胎)。对照拮抗剂硫哌丁胺的对应值分别为7.40±0.33和8.40±0.20。因此，与参比化合物相比，JNJ-5207852对大鼠和人受体的亲和力分别高出3倍和100倍。基于功能细胞的拮抗剂效价测定测量了该化合物引起组胺介导的抑制福斯克林诱导的cAMP积累的浓度-反应曲线向右移动的能力。结果与结合实验得到的pKi值一致，大鼠H3和人H3受体的pA2值分别为8.94和9.84。Schild回归分析的斜率与统一无显著差异。
H3受体的组成活性已被描述（Wieland等人，2001年），开辟了一些化合物可能作为逆激动剂的可能性。然而，在我们的功能分析中，我们无法检测到H3受体一致且明显的构成活性，这使得很难直接评估中性拮抗作用或逆拮抗作用。相反，我们使用了一种结合试验的变体，在存在或不存在GppNHp和高浓度NaCl的情况下测定Ki值。对JNJ-5207852和参比激动剂imetit、参比逆激动剂硫哌丁胺进行评价。imeit的Ki比值为<1(0.47±0.11)，而硫哌丁胺的Ki比值为bbb1（3.39±0.50）。JNJ-5207852的Ki比值接近1(1.25±0.16)，表明具有中性拮抗作用。
JNJ-5207852不与人类H1， H2或H4组胺受体结合（pKi均<5），尽管H3和H4受体之间具有显著的序列同源性。相比之下，硫哌丁胺在人类H4受体上的pKi为7.1。JNJ-5207852还在商业电池（CEREP, ruel - malmaison, France）中进行了大约50个g蛋白偶联受体、离子通道和其他药物靶点的测试。在浓度为1 μM时，化合物对上述靶点的抑制作用均不超过50%。

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体外放射自显影[1]
JNJ-5207852用氚放射性标记（3H-JNJ-5207852）；这样我们就可以评估与H3受体的直接结合相互作用。用3H-JNJ-5207852对实验进行Scatchard分析，在人受体和大鼠受体上的pKd值分别为8.69和8.84（图2a，未示出）。为了进一步证实这种结合的特异性，我们用3H-JNJ-5207852对野生型或H3受体敲除（H3−/−）小鼠的脑切片进行了体外放射自成像。评价高亲和力H3受体激动剂3H-N-α-甲基组胺作为参考。3H-N-α-甲基组胺（未示出）和3H-JNJ-5207852在H3受体缺乏小鼠的大脑中均未显示出明显的结合，而野生型小鼠的H3受体与3H-JNJ-5207852的结合模式正常，在皮层、下丘脑和纹状体中有广泛的标记（图2b）。

在 H3 受体敲除小鼠中，JNJ-5207852（1-10 mg/kg sc）会增加清醒时间，减少快速眼动睡眠和慢波睡眠，但对清醒或睡眠没有影响。这种 H3 受体拮抗剂的促醒特性与过度运动无关。小鼠每天给予 JNJ-5207852（10 mg/kg ip），持续四个星期不会导致体重变化。口服治疗后，JNJ-5207852 被广泛吸收并达到较高的脑水平[1]。

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离体自心动图[1]
为了评估JNJ-5207852是否可以作为研究体内中枢H3受体功能的合适工具，我们进行了体外放射自显像来测量外周给药未标记化合物后受体占用率。给药JNJ-5207852 0.04 ~ 2.5 mg kg−1后进行体外脑放射自显影。通过对3H-N-α-甲基组胺结合位点的竞争，表明JNJ-5207852能快速进入大脑并获得良好的受体占用。给药后1小时受体占用的ED50为0.13 mg kg - 1，而硫哌丁胺为2 mg kg - 1（图3）。

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JNJ-5207852对大鼠的警戒作用[1]
根据受体占用数据，1和10 mg kg−1 JNJ-5207852的剂量预计会引起药理作用。JNJ-5207852（1和10 mg kg - 1）或对照剂分别给药于大鼠。在给药前和给药后分别进行两次30分钟和三次30分钟的睡眠监测。JNJ-5207852引起总清醒时间的剂量依赖性增加（图4a）。高剂量JNJ-5207852的唤醒作用最为明显，10 mg kg - 1 JNJ-5207852在给药后30分钟内引起清醒时间的增加，并在整个观察期内持续存在(给药后30 - 60分钟，给药后1580±103秒vs 640±122秒，P<0.05；在给药后60 ~ 90 min的观察间隔内，给药组为1525±241 s，给药组为577±184 s， P<0.05)。当剂量为1 mg kg−1时，实验组与对照组的苏醒时间明显增加，但未达到统计学意义。
醒着时间的增加伴随着SWS时间的显著减少，如图4b所示（例如，在60-90分钟的观察间隔中，10 mg kg - 1 JNJ-5207852处理的大鼠为253±219秒，而车辆处理的大鼠为1026±189秒，P<0.05）。REM睡眠同样减少，但差异没有达到统计学意义（图4e）。清醒的增加在安静和主动清醒时都很明显（图4c， d）。

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JNJ-5207852对野生型和H3受体敲除小鼠的睡眠-觉醒作用[1]
在H3+/+ (n=6)和H3 - / - (n=6)小鼠轻起时，用s.c注射JNJ-5207852 (10 mg kg - 1)对睡眠/觉醒的影响。JNJ-5207852 （10 mg kg−1）给予H3+/+小鼠，与车辆相比，1 - 2小时（+143%，P<0.01）、7-8小时（+153%，P<0.001）、11-12小时（+118%，P<0.05）和22-24小时（+125%，P<0.01）的清醒程度显著增加（P<0.03，处理时间×时间）（图5，上表）。因此，JNJ-5207852给药后24小时累计清醒量更大（P<0.001）。在相应的时间间隔内，清醒度的增加伴随着SWS的下降（P<0.04，治疗×时间），导致SWS在24小时内总体下降（P<0.001）（图5，中间面板）。在SWS减少的同时，REM也没有显著减弱（数据未显示）。同样，JNJ-5207852降低了总慢波δ功率（P<0.05），在特定的2小时间隔内效果显著（P<0.001，处理×时间），如图5底部面板所示。
JNJ-5207852也影响了H3+/+小鼠的睡眠-觉醒周期结构，这可以从阶段转移次数（P<0.001）、觉醒次数（P<0.001）和SWS次数（P<0.001）的时间依赖性增加中得到证明（图6，顶部面板）。清醒（P<0.001，治疗×时间）和SWS （P<0.001，治疗效果）的个体发作持续时间（min）减少（图6，底部面板）。综上所述，在H3+/+小鼠中，JNJ-5207853显著增加了清醒时间，降低了睡眠-觉醒周期的连续性。
相比之下，H3−/−小鼠对10 mg kg−1 JNJ-5207852的唤醒作用不敏感，睡眠-觉醒量与载药条件相当（图5）。JNJ-5207852对H3+/+或H3−/−小鼠的慢波睡眠和快速眼动睡眠潜伏期均无影响。无论基因型或注射条件如何，注射后期间的平均体温相似（数据未显示）。

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大鼠缺乏JNJ-5207852的运动刺激作用[1]
为了区分JNJ-5207852与其他类型兴奋剂的唤醒作用，我们测试了JNJ-5207852对运动活动的影响。给动物注射3、10或30 mg kg - 1 JNJ-5207852，观察4小时。另一组动物注射0.75 mg kg - 1 d -安非他明s.c。图7显示了给药后90分钟的运动活动。选择这一观察期是为了反映JNJ-5207852对大鼠脑电图影响的研究，该研究连续进行了三次，每次30分钟。如图7所示，安非他明在注射后的前90分钟内诱导了明显的运动增加。相比之下，JNJ-5207852在剂量高达30 mg kg - 1 （s.c）时，没有运动刺激作用。JNJ-5207852处理的动物的精细动作和饲养同样没有变化，表明没有刻板印象。当同样的剂量给药时，结果是相同的（未显示）。

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缺乏JNJ-5207852对对照组和ob/ob小鼠的影响[1]
对照组和ob/ob小鼠每天腹腔注射生理盐水3或10 mg kg−1 JNJ-5207852，每天测量体重，连续28天。实验开始时体重为40.4±1.6 g，实验结束时体重为52.2±1.0 g， ob/ob小鼠的体重迅速增加，这是该突变株的典型特征。用JNJ-5207852治疗ob/ob小鼠不影响体重随时间的增加。用3mg kg - 1 JNJ-5207852处理的ob/ob小鼠开始时体重为41.7±2.4 g，结束时体重为51.5±1.1 g。每天服用10 mg kg−1 i.p.的组从研究开始时的40.5±0.7 g增加到28天后的51.9±1.1 g。对照组小鼠增重速度较慢（从23.0±0.6 g降至27.1±0.6 g）。JNJ-5207852治疗10 mg kg−1的对照组小鼠开始剂量为22.9±0.8 g，结束剂量为28.4±0.9 g。对jnj -5207852治疗小鼠的日常检查没有发现任何总体健康或行为的重大变化。

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组胺H(3)受体（H(3)R）在焦虑中的作用是有争议的，由于药物选择性的限制和先前研究中使用的行为测试的有限有效性。在本报告中，我们描述了两个实验。在第一个实验中，Wistar大鼠用H(3)R激动剂（甲氧美匹）治疗，并暴露在一个开放的场地。在第二个实验中，Balb/c小鼠接受H(3)R激动剂（甲氧美匹普）或拮抗剂（JNJ-5207852）治疗，并暴露在开放空间3D迷宫中，这是一种改良版的径向臂迷宫。采用C57BL/6J生理盐水处理小鼠进行比较。当暴露在空旷的空地上时，Wistar大鼠在外围区域停留的时间更长，在中心区域短暂穿越的次数很少。而当有物体占据中心区域时，大鼠频繁进入中心区域并在中心区域停留较长时间。给药不同剂量的甲氧美平（选择性H(3)R激动剂）减少了新物体进入中央区域的次数，表明回避反应增强。在3D迷宫中，Balb/c和C57BL/6J盐处理的小鼠经常穿过从中央平台辐射的桥，但只有C57BL/6J小鼠穿过延伸桥的臂。这表明Balb/c小鼠比C57BL/6J小鼠更焦虑。甲氧美平和JNJ-5207852（选择性H(3)R拮抗剂/逆激动剂）均未诱导小鼠进入迷宫的臂部，表明其缺乏抗焦虑作用。［２］

H3受体结合[1]
如前所述，化合物与克隆的人类和大鼠H3受体结合，在SK-N-MC细胞中稳定表达（Lovenberg et al., 2000）。IC50值由单位点曲线拟合程序确定，并根据800 pM的N-[3H]-α-甲基组胺Kd和800 pM的配体浓度转换为Ki值（Cheng & Prusoff, 1973）
为了确定化合物的反向拮抗作用和中性拮抗作用，在25 μM - 5 ' -冠酰氨基二磷酸（GppNHp）和100 mM NaCl存在或不存在的情况下测定Ki （Martin et al., 2002）。
3H-JNJ-5207852 (20-30 Ci mmol−1)通过与Sibtech的合同制备。在0.5 ~ 65 nM的放射性配体浓度下进行饱和结合实验。在10 μM组胺存在下测定非特异性结合。

动物/疾病模型：雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠，体重282-334 g[1]。
剂量：3、10、30 mg/kg。
给药途径：皮下注射。
实验结果：清醒时间增加，快速眼动睡眠和慢波睡眠减少。\n\n

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\nJNJ-5207852和右旋安非他明均新鲜配制并溶解于无菌生理盐水中。所有化合物均采用皮下或腹腔注射给药，所有药物剂量均指化合物盐。在体内药理学研究中，除运动功能研究外，JNJ-5207852均以盐酸盐形式使用；运动功能研究则使用富马酸盐。在药代动力学研究中，也使用了富马酸盐，并应用了盐校正因子。。\n

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\n\nJNJ-5207852 对大鼠睡眠和觉醒的影响[1]
\n本文中报告的所有动物实验均符合《赫尔辛基宣言》的规定。\n

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\n\n动物和手术[1]
\n所有研究均使用体重 280–350 g 的雄性 Sprague–Dawley 大鼠。采用立体定位手术，通过鼻锥给予氟烷麻醉，门齿杆设置在耳杆零点下方 11.5 mm 处，体温维持在约 36°C。手术前后，动物均成对饲养。术后恢复时间为5-7天。脑电图（EEG）和肌电图（EMG）电极的植入方法如下所述。EEG/EMG电极用丙烯酸树脂水泥固定。动物饲养于11:13小时光照/黑暗循环环境中，光照时间为06:00。\n\n测试当天，将动物连接至EEG/EMG记录FET头戴式放大器。待动物恢复静息状态后，开始测试。测试时间为10:00至15:00。在采集60分钟基线数据后，动物皮下注射（sc）载体、1.0或10.0 mg kg−1的JNJ-5207852。随后继续记录行为和EEG/EMG数据90分钟。每只动物均接受两种剂量的JNJ-5207852测试。两次测试间隔3-4天。所有化合物均溶解于人工细胞外液（147 mM NaCl、1.3 mM CaCl2、0.9 mM MgCl2、2.5 mM KCl、5.0 mM NaH2PO4，pH 7.4）。\n

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\n\nJNJ-5207852对缺乏H3受体的小鼠的睡眠-觉醒和体温的影响[1]
\n电极和传感器植入[1]
\n3月龄时，将H3+/+ (n=6)和H3−/− (n=6)雄性(24–34 g)小鼠进行手术植入，用于脑电图/肌电图记录，如前所述(Toyota等人，2002)。此外，将传感器（PDT-4000 E-Mitter，Mini-Mitter）插入腹腔，用于生物遥测记录体温。手术后，小鼠单独饲养，并给予2周的恢复期。\n

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\n\n用JNJ-5207852进行攻击[1]
\n将小鼠连接到用于脑电图/肌电图记录的电缆/旋转系统，并使其适应睡眠记录室1周。记录环境的温度（23–24°C）和光照（12小时光照：12小时黑暗）受到控制，食物和水自由摄取。每只小鼠在第一天注射生理盐水（4 ml kg−1体重），第二天注射10 mg kg−1的JNJ-5207852（溶于生理盐水），随后进行24小时的脑电图/肌电图记录。皮下注射于昼夜节律光照期开始时（08:00）进行。脑电图/肌电图信号输入放大器，经滤波（0.3–50 Hz 带通）后数字化并存储于在线计算机数据采集程序中。\n

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\n\n离体放射自显影法测定受体占有率[1]
\n雄性Wistar大鼠（200 g）分别皮下注射赋形剂或JNJ-5207852，剂量范围为0.16至2.5 mg kg−1体重（剂量：0.16、0.63、2.5；每剂量组三只动物）。硫哌酰胺的给药剂量范围为0.16至10 mg kg−1（0.16、0.63、2.5、10）。给药1小时后处死动物。脑组织立即从颅骨中取出，并迅速置于干冰冷却的2-甲基丁烷（−40°C）中冷冻。使用Leica CM 3050低温恒温切片机切割20 μm厚的脑组织切片，并将切片解冻后贴于载玻片上。随后将切片保存于−20°C直至使用。在每只大鼠的纹状体中测定H3受体的占有率。解冻后，将切片在冷气流下干燥，然后在室温下于含有2 nM [3H]-R-α-甲基组胺的50 mM磷酸钠/钾缓冲液（pH 7.4）中孵育10分钟。在1 μM氯苯丙胺存在下，于相邻切片上测定非特异性结合。孵育后，将载玻片在冰冷的缓冲液中洗涤（4 × 20秒），然后用冰水快速冲洗。随后将切片置于冷气流下干燥。\n
\n根据我们的标准方案（Langlois 等，2001），使用β成像仪采集1小时后进行定量放射自显影分析。使用GraphPad Prism程序，通过非线性回归分析计算ED50值（产生50% H3受体占有率的化合物剂量）。\n

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\n\nJNJ-5207852对对照组和ob/ob小鼠体重的影响[1]
\n雄性小鼠（C57BL/6和ob/ob）购自Jackson实验室，单独饲养于12小时光照：12小时黑暗的光周期条件下。它们可以自由摄取食物（标准饲料）和水。实验从小鼠5周龄开始，持续4周。每组包含8-10只小鼠。 ob/ob小鼠每日腹腔注射生理盐水或3–10 mg kg⁻¹ JNJ-5207852；10 mg kg⁻¹ JNJ-5207852组的小鼠在实验第一天接受单次30 mg kg⁻¹ JNJ-5207852负荷剂量。C57BL/6小鼠接受生理盐水或10 mg kg⁻¹ JNJ-5207852注射。给药时间均为每日上午9:00。每日给药前，使用Sartorius BL1500电子秤测量体重。\n

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\n\nJNJ-5207852对大鼠运动活性的影响[1]
\n本研究使用体重282-334 g的、未经实验处理的雄性Sprague-Dawley大鼠。动物单独饲养，可自由获取食物和水。动物饲养室温度维持在22±2°C，光照周期为12小时光照/12小时黑暗，光照时间为06:00至18:00。行为学测试在光照期（08:30至14:30）进行。\n
\n实验开始前，对动物进行处理，并使其适应动物饲养室1周。测试时，将动物放入活动箱中进行6小时的测试。测试包括2小时的适应期和4小时的观察期。为了确保在开始治疗前各组动物的活动水平没有预先存在的差异，在2小时的适应期内监测并记录了LMA（局部活动量）。2小时适应期结束后，短暂中断测试，并向动物皮下注射生理盐水（1 ml kg⁻¹；n=6）、JNJ-5207852（3、10、30 mg kg⁻¹；每组6-7只动物）或D-安非他明（0.75 mg kg⁻¹；n=6）。化合物注射后立即恢复测试，并在剩余的测试时间内持续监测LMA。\n

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\n\nJNJ-5207852的药代动力学[1]
\n本研究选取了16只健康状况良好的雄性和雌性Sprague-Dawley大鼠（每种制剂每性别4只），并将其随机分为两组。静脉注射制剂配制成浓度为5.0 mg ml−1的10% Solutol/5%葡萄糖溶液。口服制剂配制成浓度为15 mg ml−1的0.5%甲基纤维素混悬液。在第1天，动物禁食过夜后称重（体重范围：258–307 g），并将每种制剂分别给予4只雄性和4只雌性大鼠。静脉注射制剂通过颈静脉穿刺给药，剂量为2 ml kg⁻¹。口服制剂通过灌胃给药，剂量为2 ml kg⁻¹。给药后，在异氟烷麻醉下，通过颈静脉穿刺从每只动物采集血样（0.25–0.40 ml）。分别在给药前以及给药后0.08小时（仅限腹腔注射）、0.25小时（仅限口服）、0.33小时（仅限腹腔注射）、0.5小时（仅限口服）、1小时、2小时、4小时、8小时和24小时采集血样（使用肝素锂作为抗凝剂）。血样置于冰上，待离心。离心后，收集血浆并储存在约-20°C，待用定量下限为5 ng ml⁻¹的液相色谱法分析JNJ-5207852。除上述步骤外，在采集完最后一份血样后，从所有动物中采集脑组织（用液氮或甲醇/干冰混合物速冻）。动物经放血处死后，脑组织储存在−20°C，等待进行JNJ-5207852的分析。口服生物利用度是相对于静脉注射动物的平均AUC值计算的。\n\n

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\n药物处理[2]
\n在实验2中，有两个对照组（C57BL/6J，n = 8和Balb/c，n = 8），接受生理盐水注射；其他各组（每组n = 8）分别接受单次腹腔注射甲噻哌（1、2.5和5 mg/kg）。在实验3中，还设置了两个对照组（C57BL/6J，n = 8；Balb/c，n = 8），分别注射生理盐水；以及三个Balb/c组（每组n = 8），在进入3D迷宫前30分钟，分别腹腔注射单剂量JNJ-5207852（0.5、1和5 mg/kg）。Methimepip和JNJ-5207852分别由Rob Leurs教授和Nicholas Curruthers博士（美国强生公司）惠赠。药物剂量的选择基于之前的体内研究（例如，Kitbunnadaj等人，2005；Jia等人，2006）。

JNJ-5207852 的口服和静脉注射药代动力学 [1]
将 JNJ-5207852 分别以 30 mg kg⁻¹ 的剂量口服和 10 mg kg⁻¹ 的剂量腹腔注射给四只雄性和雌性大鼠。平均血浆浓度如图 8 所示。JNJ-5207852 口服吸收速度中等偏快，雄性和雌性大鼠的 Tmax 值分别为 4.5 小时和 4.0 小时。雄性和雌性大鼠的平均半衰期分别为 14.6 小时和 16.8 小时，表明其消除缓慢。腹腔注射后，雄性和雌性大鼠的半衰期分别为 13.2 小时和 20.1 小时。雄性和雌性大鼠的平均分布容积分别为 100070 ml kg⁻¹ 和 105737 ml kg⁻¹，表明药物在血浆外分布广泛。 JNJ-5207852 的平均口服生物利用度在男性和女性中均较高，分别为 107% 和 85%。
24 小时时间点还测定了 JNJ-5207852 在脑内的浓度。口服给药后，男性脑内浓度为 5306±282 ng ml⁻¹，女性为 6726±826 ng ml⁻¹。腹腔注射给药后，男性和女性脑内浓度分别达到 2096±46 ng ml⁻¹ 和 2483±54 ng ml⁻¹。这些数据表明该药物具有广泛的脑渗透性和滞留性。

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药代动力学实验表明，JNJ-5207852 口服后吸收广泛，具有优异的脑渗透性和相对较长的半衰期（静脉注射后 13-20 小时）。 JNJ-5207852 最显著的特点之一是其分布容积大（超过 100,000 ml kg−1），提示其组织分布广泛。因此，JNJ-5207852 可能是一种研究 H3 受体功能的绝佳工具。[1]

[1]. Acute wake-promoting actions of JNJ-5207852, a novel, diamine-based H3 antagonist. Br J Pharmacol. 2004 Nov;143(5):649-61.

[2]. Effects of methimepip and JNJ-5207852 in Wistar rats exposed to an open-field with and without object and in Balb/c mice exposed to a radial-arm maze. Front Syst Neurosci. 2012 Jul 16;6:54.

1-[4-(3-哌啶-1-基-丙氧基)-苄基]-哌啶 (JNJ-5207852) 是一种新型的非咪唑类组胺 H3 受体拮抗剂，对大鼠 (pKi=8.9) 和人 (pKi=9.24) H3 受体具有高亲和力。JNJ-5207852 对 H3 受体具有选择性，在 1 μM 浓度下与其他受体、转运蛋白和离子通道的结合可忽略不计。2 皮下注射后，JNJ-5207852 能迅速穿透脑组织，离体放射自显影法证实了这一点（小鼠 ED50 为 0.13 mg kg⁻¹）。在小鼠脑切片中进行的体外放射自显影实验表明，3H-JNJ-5207852 的结合模式与 3H-R-α-甲基组胺相同，在皮层、纹状体和下丘脑中具有高特异性结合。在 H3 受体敲除小鼠的脑组织中未观察到 3H-JNJ-5207852 的特异性结合。在小鼠和大鼠中，JNJ-5207852（1-10 mg kg⁻¹ 皮下注射）可增加清醒时间并减少快速眼动睡眠和慢波睡眠，但对 H3 受体敲除小鼠的清醒或睡眠没有影响。未观察到通过慢波δ波功率测量的反弹性嗜睡。这种 H3 受体拮抗剂的促醒作用与运动过度无关。 4. 小鼠连续4周每日腹腔注射JNJ-5207852（10 mg kg⁻¹）后，体重未发生变化，这可能是由于该化合物是H3受体的中性拮抗剂。5. 口服给药后，JNJ-5207852吸收广泛，并在脑内达到较高浓度。6. 数据表明，JNJ-5207852是一种新型、高效且选择性的H3受体拮抗剂，具有良好的体外和体内疗效，并证实了H3受体拮抗剂的促醒作用。[1] 我们探讨了JNJ-5207852是否可能是一种反向激动剂。由于在我们的细胞系统中难以获得稳定的组成型活性，我们无法通过功能性信号转导分析来明确回答这个问题。我们采用了一种基于中性拮抗剂和反向激动剂对偶联和解偶联受体结合行为差异的方法（Childers & Snyder, 1980）。反向激动剂对受体的解偶联状态具有更高的亲和力，激动剂对解偶联状态的亲和力较低，而中性拮抗剂的亲和力不受偶联状态的影响。因此，在不存在GppNHp/NaCl的情况下与存在这些解偶联条件的情况下获得的Ki值之比，对于中性拮抗剂预计约为1，对于激动剂预计小于1，对于反向激动剂预计大于2。利用这种方法，我们确定Ki比值为1.25的JNJ-5207852最可能是H3受体的中性拮抗剂。总之，JNJ-5207852 是一种强效、选择性的非咪唑类 H3 受体拮抗剂，在啮齿动物觉醒模型中具有明显的体内疗效，且无食欲抑制作用。它能抑制慢波睡眠 (SWS) 并增加觉醒时间，而不会引起反弹性嗜睡或增加运动活性。因此，JNJ-5207852 作为一种中性拮抗剂，代表了一种新的药理学工具，可用于探索 H3 受体在睡眠和觉醒调节以及可能在昼夜节律等相关系统中的作用，并为治疗与白天过度嗜睡相关的疾病（例如睡眠呼吸暂停、多发性硬化症和纤维肌痛）开辟新的途径。[1]

C20H34CL2N2O

389.40

388.204

1782228-76-5

JNJ-5207852;398473-34-2

90488903

Typically exists as solid at room temperature

15.7

2

3

7

25

303

0

C1CCN(CC1)CCCOC2=CC=C(C=C2)CN3CCCCC3.Cl.Cl

RLLXSVVZCGBIJR-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C20H32N2O.2ClH/c1-3-12-21(13-4-1)16-7-17-23-20-10-8-19(9-11-20)18-22-14-5-2-6-15-22;;/h8-11H,1-7,12-18H2;2*1H

1-[3-[4-(piperidin-1-ylmethyl)phenoxy]propyl]piperidine;dihydrochloride

1782228-76-5; 1-(4-(3-(Piperidin-1-yl)propoxy)benzyl)piperidine dihydrochloride; JNJ-5207852 dihydrochloride; JNJ-5207852 (dihydrochloride); 1-[3-[4-(piperidin-1-ylmethyl)phenoxy]propyl]piperidine;dihydrochloride; 1-{3-[4-(piperidin-1-ylmethyl)phenoxy]propyl}piperidine dihydrochloride; starbld0001161;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。