| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ACE2 (IC50 = 8.4 nM)[1]
Angiotensin-converting enzyme 2 (ACE2) |
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| 体外研究 (In Vitro) |
化合物 16RS，或 (R)-MLN-4760，是活性较低的 MLN-4760 异构体[1]。
1. 人骨髓来源细胞中的 ACE/ACE2 选择性：- 在人骨髓来源的单核细胞 (hBM-MNCs) 中，MLN-4760 (10–1000 nM) 显示出对 ACE 活性的选择性抑制。在 100 nM 时，它对 ACE 活性的抑制率为 92 ± 4%（通过 ACE 底物 HHL 的水解测定），而对 ACE2 活性的抑制率（通过 ACE2 底物 Mca-APK(Dnp) 的水解测定）仅为 15 ± 3%。人源酶的选择性比值（ACE Ki/ACE2 Ki）约为 178 [2] 2. 小鼠骨髓来源细胞中的 ACE/ACE2 选择性：- 在小鼠骨髓来源巨噬细胞 (mBMDM) 中，MLN-4760 (10–1000 nM) 表现出类似的选择性。在 100 nM 时，它抑制小鼠 ACE 活性 89 ± 5%，抑制小鼠 ACE2 活性 13 ± 2%。小鼠酶的选择性比值约为 167 [2] (R)-MLN-4760 对 ACE2 的抑制 IC50 为 8.4 uM，表明它是活性较低的异构体。其主要机制是阻断血管紧张素 II 转化为血管紧张素-(1-7)。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
目前尚无该化合物的具体体内数据。类似ACE2抑制剂的一般体内信息可能包括在啮齿动物高血压模型中进行血压监测和炎症标志物评估。
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| 酶活实验 |
1. 人/鼠ACE活性测定：将重组人ACE（或鼠ACE）与荧光底物HHL（马尿酰-组氨酸-亮氨酸）在测定缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.5，300 mM NaCl，10 μM ZnCl₂）中于37°C孵育。加入浓度为0.1–1000 nM的MLN-4760，并通过加入HHL（终浓度50 μM）启动反应。通过测量荧光强度（激发波长320 nm，发射波长405 nm）监测HHL的水解，持续30分钟。 Ki 值是通过剂量反应抑制曲线的非线性回归分析计算得出的[2]
2. 人/鼠 ACE2 活性测定： - 将重组人 ACE2（或鼠 ACE2）与荧光底物 Mca-APK(Dnp) (Mca-Ala-Pro-Lys(Dnp)-OH) 在测定缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4，150 mM NaCl，10 μM ZnCl₂）中于 37°C 孵育。加入 MLN-4760 (0.1–1000 nM)，然后加入 Mca-APK(Dnp)（终浓度 20 μM）启动反应。测量荧光强度（激发波长 328 nm，发射波长 393 nm）30 分钟以评估底物水解情况，并按照 ACE 的方法测定 Ki 值 [2] 通用的酶抑制测定方案包括将化合物与重组ACE2酶和荧光底物（例如Mca-APK(Dnp)-OH）孵育。反应在缓冲液中启动，并使用微孔板读数仪（例如，激发/发射波长320/405 nm）随时间测量荧光强度。IC50值通过与对照组活性比较计算得出。 |
| 细胞实验 |
1. 人骨髓单核细胞 (hBM-MNC) 检测：- 通过密度梯度离心法从健康人供体中分离 hBM-MNC，并在添加 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基中培养 24 小时。细胞用 MLN-4760 (10–1000 nM) 处理 1 小时，然后用 RIPA 裂解缓冲液裂解。使用 HHL 底物法测定细胞裂解液中的 ACE 活性，使用 Mca-APK(Dnp) 底物法测定 ACE2 活性。采用 BCA 法测定蛋白质浓度，以校正酶活性值 [2]
2. 小鼠骨髓来源巨噬细胞 (mBMDM) 测定：- 从 C57BL/6 小鼠中分离出小鼠骨髓细胞，并在添加 10% 胎牛血清和 20 ng/mL M-CSF 的 DMEM 培养基中培养 7 天，使其分化为 mBMDM。用 MLN-4760 (10–1000 nM) 处理 mBMDM 1 小时，裂解细胞，并使用与 hBM-MNC 相同的底物测定方法测定 ACE/ACE2 活性 [2] 一般的体外细胞实验方案可能包括培养表达ACE2的人或小鼠细胞系。细胞先与化合物预孵育，然后用血管紧张素II刺激。之后通过ELISA检测培养上清液中血管紧张素-(1-7)的浓度，以评估化合物的疗效。 |
| 动物实验 |
为了评估中枢ACE2在卒中中的作用，将16只大鼠随机分为两组，分别在内皮素-1诱导卒中前5天和卒中后3天接受脑室内持续输注ACE2抑制剂MLN-4760或生理盐水。卒中后4小时、1天和3天评估神经功能，随后取出脑组织进行梗死体积分析[3]。
一般的体内实验方法是通过灌胃或静脉注射的方式给自发性高血压大鼠（SHR）给药。采用尾套法或遥测法监测血压。在不同时间点采集血样，通过免疫分析法测定血管紧张素II和血管紧张素-(1-7)的水平。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
类似的小分子抑制剂的一般药代动力学特性可能表明其口服生物利用度中等（例如，20-50%），半衰期中等（t1/2 = 2-6 小时），且血浆蛋白结合率高。代谢主要通过 CYP450 酶进行，肾脏排泄是主要的清除途径。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
类似研究化合物的一般安全性数据通常显示出剂量依赖性毒性。在急性研究中，高剂量可能引起胃肠道不适或血压变化。可能需要进行长期动物研究以评估器官特异性毒性，常见症状包括过量剂量下的体重减轻和嗜睡。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. 选择性特征：MLN-4760 是一种选择性 ACE 抑制剂，对 ACE2 的活性极低。其对人源酶的选择性比值 (ACE Ki/ACE2 Ki) 约为 178，对小鼠酶的选择性比值约为 167，因此可作为区分 ACE 抑制和 ACE2 抑制生物学效应的工具化合物[2]。2. 与 DX600 的比较：在同一项研究中，MLN-4760 的 ACE 选择性高于 DX600（另一种 ACE 抑制剂）。DX600 对人源酶的选择性比值约为 50，对小鼠酶的选择性比值约为 45，这证实了 MLN-4760 是一种选择性更高的 ACE 抑制剂[2]。
(R)-MLN-4760 是一种用于研究肾素-血管紧张素系统 (RAS) 和 ACE2 特定生物学功能的研究工具。它尚未进入临床试验阶段，也未获准用于治疗用途。其应用包括探索血压控制、体液平衡和炎症通路。 |
| 分子式 |
C19H23N3O4CL2
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|---|---|
| 分子量 |
428.30962
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| 精确质量 |
427.106
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| 元素分析 |
C, 53.28; H, 5.41; Cl, 16.55; N, 9.81; O, 14.94
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| CAS号 |
305335-29-9
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| 相关CAS号 |
MLN-4760;305335-31-3
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| PubChem CID |
58580621
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
1.4
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| tPSA |
104
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
527
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
CC(C)CC(C(=O)O)NC(CC1=CN=CN1CC2=CC(=CC(=C2)Cl)Cl)C(=O)O
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| InChi Key |
NTCCRGGIJNDEAB-SJORKVTESA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H23Cl2N3O4/c1-11(2)3-16(18(25)26)23-17(19(27)28)7-15-8-22-10-24(15)9-12-4-13(20)6-14(21)5-12/h4-6,8,10-11,16-17,23H,3,7,9H2,1-2H3,(H,25,26)(H,27,28)/t16-,17+/m1/s1
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| 化学名 |
(2R)-2-[[(1S)-1-carboxy-2-[3-[(3,5-dichlorophenyl)methyl]imidazol-4-yl]ethyl]amino]-4-methylpentanoic acid
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| 别名 |
(R)-MLN-4760; 305335-29-9; CHEMBL5220314; (2R)-2-[[(1S)-1-carboxy-2-[3-[(3,5-dichlorophenyl)methyl]imidazol-4-yl]ethyl]amino]-4-methylpentanoic acid; orb1744575; SCHEMBL9993284; BDBM50606668;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 14.29 mg/mL (33.36 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3348 mL | 11.6738 mL | 23.3476 mL | |
| 5 mM | 0.4670 mL | 2.3348 mL | 4.6695 mL | |
| 10 mM | 0.2335 mL | 1.1674 mL | 2.3348 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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