| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
RNF114 (IC50 = 470 nM)
RNF114 (Ring Finger protein 114). EN219 is a covalent inhibitor of the E3 ubiquitin ligase RNF114. It binds with moderate specificity to the N-terminal cysteine C8 of RNF114 with an IC50 of 470 nM. It inhibits RNF114-mediated autoubiquitination and p21 ubiquitination. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
同位素串联正交蛋白水解 ABPP (isoTOP-ABPP) 分析[1] 表明 EN219 (1 μM; 90 分钟) 与 RNF114 C8、TUBB1 C201、HSPD1 C442 和 HIST1H3A C97 相互作用。
EN219 是一种合成的共价配体，对 RNF114 的 N 端半胱氨酸 C8 具有中等特异性，IC50 值为 470 nM。它通过共价修饰 RNF114，抑制该蛋白的 E3 泛素连接酶活性，阻断 RNF114 介导的自身泛素化及其底物 p21 的泛素化。这导致 p21 的稳定，p21 是一种细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂，参与细胞周期调控。未提供其他具体的体外效力数据。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
供应商提供的资料中并未详细列出EN219的体内活性数据。作为一种RNF114的共价抑制剂，EN219在研究该E3连接酶在癌症和免疫调节中的作用方面具有潜在应用价值。需要进一步的体内研究来表征其疗效、药代动力学和安全性。共价结合机制表明，EN219可能具有持久的药效。
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| 酶活实验 |
非细胞检测 RNF114 活性的方法包括体外泛素化反应，该反应使用纯化的重组 RNF114、E1 酶、E2 酶（例如 UbcH5c）和泛素。将 EN219 与 RNF114（0.1-100 uM）预孵育 30 分钟，以促进共价结合。然后加入其他组分启动反应。反应终止后，通过蛋白质印迹法检测泛素化 RNF114（自泛素化）的水平。高分子量条带的减少表明活性受到抑制。对于结合研究，可通过液相色谱-质谱联用（LC-MS）监测共价加合物形成引起的质量增加。
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| 细胞实验 |
细胞实验包括用 EN219（0.1-50 uM）处理细胞（例如 HEK293T 细胞）6-24 小时。通过蛋白质印迹法分析细胞裂解液中 p21 蛋白的水平。p21 水平的升高表明 RNF114 介导的 p21 泛素化和降解被成功抑制。该化合物对整体泛素化的影响也可以进行评估。使用 MTT 或 CellTiter-Glo 检测细胞活力，以评估任何脱靶细胞毒性。如果引入炔烃标签，则可以通过“点击化学”方法确认共价结合。
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| 动物实验 |
对于体内研究，EN219 可配制成含有 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80 和 45% 生理盐水的溶剂，并腹腔注射给小鼠。可通过组织中 p21 水平的蛋白质印迹法评估靶点结合情况。由于该化合物是共价结合剂，即使游离药物从血浆中清除后，其药效学作用（p21 水平升高）仍可维持。本文未描述详细的药代动力学研究。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
EN219 是一种可透过细胞膜的共价抑制剂。其分子量为 456.56 g/mol，分子式为 C17H13Br2ClN2O。它可溶于 DMSO。该化合物储存于 -20℃。供应商提供的资料中未报告详细的药代动力学参数（半衰期、口服生物利用度）。由于其含有活性氯乙酰基，因此可能与其他蛋白质发生脱靶反应，应谨慎操作。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无EN219的详细毒理学数据。该产品仅供研究使用，不得用于人体。操作研究用化学品时应遵循标准安全预防措施，包括佩戴手套和护目镜。由于EN219是一种共价抑制剂，因此可能存在脱靶反应，需要进行全面的选择性分析以评估其在任何体内环境下的安全性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
将具有功能活性的天然产物转化为全合成的小分子类似物一直是药物化学领域的重要课题。我们近期发现萜类天然产物印楝素可作为E3泛素连接酶RNF114的共价募集剂，用于靶向蛋白质降解——这是一种在现代药物研发中极具潜力的治疗方法。本文报道了利用基于活性的蛋白质组学分析共价配体筛选方法，发现全合成的RNF114募集剂分子。这些分子也可用于PROTAC应用，并且已证实其能够有效降解细胞中具有治疗意义的靶点（如BRD4和BCR-ABL）。鉴定能够模拟复杂天然产物功能的简单易用的类药骨架，将有助于进一步拓展E3连接酶募集剂的工具箱，这对于药物研发和化学生物学至关重要。[1]
EN219 是一种研究级化学品，并非 FDA 批准的药物。它最初被描述为 RNF114 的合成配体，是化学生物学领域的重要工具。它可用于研究 p21 的泛素化和细胞周期的调控。RNF114 也是自身免疫性疾病和癌症的潜在靶点，因此 EN219 可作为靶点验证的有效探针。在化学生物学文献中，该化合物也被称为 EN219。 |
| 分子式 |
C17H13BR2CLN2O
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|---|---|
| 分子量 |
456.558921575546
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| 精确质量 |
455.906
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| CAS号 |
380351-29-1
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| 相关CAS号 |
EN219-alkyne
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| PubChem CID |
3413196
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| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
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| LogP |
4.7
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| tPSA |
32.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
458
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C(=O)(N1C(C2=CC=C(Br)C=C2)CC(C2=CC=C(Br)C=C2)=N1)CCl
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| InChi Key |
CXRHMHAKZPJNKS-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H13Br2ClN2O/c18-13-5-1-11(2-6-13)15-9-16(22(21-15)17(23)10-20)12-3-7-14(19)8-4-12/h1-8,16H,9-10H2
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| 化学名 |
1-[3,5-bis(4-bromophenyl)-3,4-dihydropyrazol-2-yl]-2-chloroethanone
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| 别名 |
EN219; 380351-29-1; 1-[3,5-bis(4-bromophenyl)-3,4-dihydropyrazol-2-yl]-2-chloroethanone; CHEMBL5274261; 3,5-bis(4-bromophenyl)-1-(chloroacetyl)-4,5-dihydro-1H-pyrazole; 1-[3,5-bis(4-bromophenyl)-4,5-dihydro-1H-pyrazol-1-yl]-2-chloroethanone; 1-(3,5-Bis(4-bromophenyl)-4,5-dihydro-1H-pyrazol-1-yl)-2-chloroethanone;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 65 mg/mL (142.37 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1903 mL | 10.9515 mL | 21.9029 mL | |
| 5 mM | 0.4381 mL | 2.1903 mL | 4.3806 mL | |
| 10 mM | 0.2190 mL | 1.0951 mL | 2.1903 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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