Isocitrate dehydrogenase (ICDH)

别名: 异柠檬酸脱氢酶;异柠檬脱氢酶;异柠檬脱氢酶3-8 U;苏式-Ds-异柠檬酸: NADP+ 氧化还原酶;异柠檬脱氢酶;异柠檬脱氢酶 (NADP);苏式-DS-异柠檬酸: NADP+ 氧化还原酶;异柠檬脱氢酶 (NADP) 来源于猪心脏;异柠檬酸脱氢酶(液体)
目录号: V74040 纯度: ≥98%
异柠檬酸脱氢酶 (ICDH) 异柠檬酸脱氢酶是一种广泛用于生化研究的柠檬酸或三羧酸循环酶。
Isocitrate dehydrogenase (ICDH) CAS号: 9028-48-2
产品类别: IDH
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10mg
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产品描述
异柠檬酸脱氢酶 (ICDH) 是一种广泛应用于生物化学研究的柠檬酸或三羧酸循环酶。异柠檬酸脱氢酶催化异柠檬酸的氧化脱羧反应生成α-酮戊二酸,并将NAD(P)+还原为NAD(P)H,在细胞代谢中发挥重要作用。
异柠檬酸脱氢酶 (ICDH) (CAS#: 9028-48-2) 是一种同源二聚体酶,催化异柠檬酸的氧化脱羧反应生成α-酮戊二酸,这是柠檬酸循环中的关键步骤。它将NAD(P)+还原为NAD(P)H,在细胞代谢中发挥着至关重要的作用,包括适应缺氧、组蛋白去甲基化和DNA修饰。该酶以多种同工酶形式存在,例如胞质NADP+依赖型IDH1和线粒体NAD+依赖型IDH3。CAS号为9028-48-2的特定产品通常为猪心来源的NADP+依赖型异柠檬酸脱氢酶(IV型),以50%甘油溶液(含EDTA缓冲盐,pH 6.0)的形式供应,其质量控制标准表明,当以NAD+作为辅因子时,其主要活性≤0.2%。
生物活性&实验参考方法
靶点
The primary targets of ICDH are its substrates, isocitrate and the cofactors NAD+ or NADP+, depending on the isoform. The enzyme is also regulated by allosteric effectors; for example, the NAD+-linked mitochondrial enzyme displays allosteric properties, while the NADP+-linked enzyme is non-allosteric.
体外研究 (In Vitro)
ICDH 的体外比活性为 3-20 单位/mg 蛋白。一个单位定义为在 pH 7.4 和 37°C 条件下,每分钟将 1.0 μmol 异柠檬酸转化为 α-酮戊二酸所需的酶量。该酶对 NADP+ 具有很高的亲和力,以 NAD+ 为辅因子时,其活性仅为主要活性的约 0.2%。它已被用于活性测定,以研究各种化合物(例如钍)对柠檬酸循环酶的影响,并作为标准品来测量温度对 NADP-IDH 活性的影响。
体内研究 (In Vivo)
在体内,ICDH参与多种关键生理过程,包括适应缺氧、组蛋白去甲基化和DNA修饰。其活性对于维持细胞氧化还原平衡和为生物合成途径提供中间体至关重要。
酶活实验
体外ICDH酶活性测定通常采用分光光度法,在340 nm波长下测量NAD(P)+还原为NAD(P)H的速率。测定体系包含异柠檬酸、NADP+、氯化镁和酶样品,并置于合适的缓冲液(例如,Tris-HCl,pH 7.4)中。酶活性根据吸光度增加速率计算。此类试剂盒的检测范围通常为0.2 mmol/L至20 mmol/L。适用于这些测定的样品类型包括血清、血浆、组织提取物和细胞裂解液。
细胞实验
细胞ICDH活性通常使用比色法或分光光度法微孔板检测试剂盒在细胞裂解液中进行测定。细胞在合适的缓冲液中裂解,裂解液与异柠檬酸和NADP+底物孵育。NADPH的生成可通过比色法(450 nm波长)或荧光法检测。这些试剂盒适用于多种样本类型,包括血清、血浆、组织提取物、细胞裂解液和细胞培养上清液。
动物实验
涉及ICDH的体内动物研究通常采用啮齿动物模型,以评估实验干预后不同组织中的酶活性。从肝脏、心脏或大脑等器官制备组织匀浆,并使用与体外试验相同的分光光度法测定ICDH活性。研究可能探讨毒素、药物或基因修饰对特定组织中酶活性的影响。
药代性质 (ADME/PK)
作为一种酶,ICDH 不具备传统的药代动力学特性,例如吸收、分布、代谢和排泄 (ADME)。然而,该酶在缓冲的甘油水溶液中稳定,并在适当的储存条件(2-8°C)下保持活性。其稳定性可能受温度、pH 值以及辅因子或抑制剂的影响。该化合物通常采用湿冰运输。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
ICDH通常被认为作为研究试剂无毒。该酶本身是一种天然存在的蛋白质,在实验室环境中不会造成显著的毒性问题。处理该酶制剂时应遵循标准的实验室安全操作规程,包括使用个人防护装备,例如防尘口罩、护目镜和手套。
参考文献

[1]. Reitman ZJ, Yan H. Isocitrate dehydrogenase 1 and 2 mutations in cancer: alterations at a crossroads of cellular metabolism. J Natl Cancer Inst. 2010 Jul 7;102(13):932-41.

其他信息
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ICDH (EC 1.1.1.42) 是代谢研究中广泛使用的研究工具,其活性常被作为线粒体功能和细胞代谢状态的标志。它参与适应缺氧、组蛋白去甲基化和 DNA 修饰等多个过程。IDH1 和 IDH2 基因的突变与某些癌症相关,使该酶成为治疗研究的目标。来自猪心脏的产品是研究应用的常见来源。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C46H56O2
分子量
640.935653686523
精确质量
640.428
CAS号
9028-48-2
PubChem CID
77834905
外观&性状
Colorless to light yellow liquid
tPSA
40.5
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
2
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
48
分子复杂度/Complexity
933
定义原子立体中心数目
0
SMILES
OC1CC(C)(C)C2C=CC(C(=CC3C=CC=CC=3)C)=CC=2C1(C)C.OC1CC(C)(C)C2C=C(C(=CC3C=CC=CC=3)C)C=CC=2C1(C)C
InChi Key
GQASXCYBZFOWQR-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/2C23H28O/c1-16(13-17-9-7-6-8-10-17)18-11-12-19-20(14-18)22(2,3)15-21(24)23(19,4)5;1-16(13-17-9-7-6-8-10-17)18-11-12-19-20(14-18)23(4,5)21(24)15-22(19,2)3/h2*6-14,21,24H,15H2,1-5H3
化学名
1,1,4,4-tetramethyl-6-(1-phenylprop-1-en-2-yl)-2,3-dihydronaphthalen-2-ol;1,1,4,4-tetramethyl-7-(1-phenylprop-1-en-2-yl)-2,3-dihydronaphthalen-2-ol
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.5602 mL 7.8010 mL 15.6021 mL
5 mM 0.3120 mL 1.5602 mL 3.1204 mL
10 mM 0.1560 mL 0.7801 mL 1.5602 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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