CFTR corrector 12

别名: CFTR corrector 12; C17; 958941-60-1; SMR000156108; MLS000561583; corr15jf; CHEMBL262627; orb2277839; SCHEMBL3800272;
目录号: V74164 纯度: ≥98%
CFTR 校正剂 12(化合物 C17)是一种双噻唑类似物,用作 CFTR 校正剂。
CFTR corrector 12 CAS号: 958941-60-1
产品类别: CFTR
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
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纯度/质量控制文件

纯度: =99.42%

产品描述
CFTR 校正剂 12(化合物 C17)是一种双噻唑类似物,用作 CFTR 校正剂。 CFTR 校正子 12 可校正某些负责控制氯离子跨质膜转运的通道中的折叠缺陷突变。 CFTR 校正器 12 可恢复突变细胞中的 α-肌聚糖 (α-SG) 含量。
CFTR矫正剂12(化合物C17) 是一种4'-甲基-4,5'-联噻唑衍生物,最初被鉴定为用于修复囊性纤维化跨膜传导调节因子通道折叠缺陷突变体的小分子矫正剂。除了在囊性纤维化中的作用外,C17还显示出挽救其他错误折叠蛋白的能力,包括ATP8B1的I661T突变体以及与肢带型肌营养不良症R3相关的α-肌聚糖突变体。在使用LGMDR3患者原代肌源性细胞的临床前研究中,C17处理可使突变的α-肌聚糖蛋白表达量翻倍,显示出与其对CFTR相当的效果。虽然其确切的分子靶点尚待完全阐明,但C17作为研究蛋白质错误折叠疾病的重要药理学工具,并为开发用于机制研究的新型联噻唑衍生物提供了指导。
生物活性&实验参考方法
靶点
Cystic fibrosis transmembrane regulator (CFTR); α-Sarcoglycan (α-SG). CFTR corrector 12 (compound C17) is a 4'-methyl-4,5'-bithiazole derivative previously identified as a cystic fibrosis transmembrane regulator (CFTR) corrector. In the context of this study, it was evaluated for its ability to recover folding-defective mutants of α-sarcoglycan. [1]
体外研究 (In Vitro)
在来自 LGMDR3 患者(α-肌聚糖蛋白 V247M 和 L31P 突复合杂合子)的原代肌源性细胞中,用 C17 在 20 μM 和 15 μM 浓度下处理 72 小时,产生了最大效果,使肌管中表达的突变型 α-肌聚糖含量翻倍(通过 Western blot 分析确定)。该效果显著高于溶剂对照(1% DMSO)。 [1]
在 L31P/V247M α-SG 突变细胞中,CFTR 校正剂 12(化合物 17C)(15 μM;72 小时)可以补充 α-肌聚糖含量 [1]。
体内研究 (In Vivo)
文章提及在表达 R98H-α-肌聚糖的人源化小鼠模型中,缺陷蛋白的恢复与肌肉力量的改善相关(引用先前工作),但未呈现新的体内实验。 [1]
细胞实验
细胞培养与处理: 来自 LGMDR3 患者(α-肌聚糖 V247M 和 L31P 突变复合杂合子)的原代肌源性细胞在增殖培养基中培养。通过将培养基更换为分化培养基诱导肌管分化,持续 7 天。在分化的最后 72 小时内加入 C17,终浓度为 20 μM 和 15 μM(溶于 DMSO,DMSO 终浓度 1‰)。溶剂对照为 1% DMSO。 [1]
Western Blot 分析: 处理后,用含蛋白酶抑制剂的 RIPA 缓冲液裂解细胞。通过 BCA 法测定蛋白浓度。等量总蛋白经 SDS-PAGE 分离,转移至硝酸纤维素膜,用兔单克隆抗 α-肌聚糖抗体和小鼠单克隆抗 β-肌动蛋白抗体进行检测。二抗为 HRP 偶联物。使用 ECL 底物显影,采集化学发光信号。使用 ImageJ 软件进行光密度分析。α-肌聚糖条带强度以 Ponceau Red 染色的总蛋白和 β-肌动蛋白信号进行标准化。C17 在 20 和 15 μM 浓度下均使 α-肌聚糖含量较溶剂对照翻倍。 [1]
参考文献

[1]. Synthesis and Evaluation of Bithiazole Derivatives As Potential α-Sarcoglycan Correctors. ACS Med Chem Lett. 2023 Jul 28;14(8):1049-1053.

其他信息
化合物 C17 是一种 4'-甲基-4,5'-联噻唑衍生物,先前被鉴定为 CFTR 矫正剂,能够修复 CFTR 通道的折叠缺陷突变体。它还被证明可以恢复其他蛋白质的折叠缺陷突变体,包括 ATP8B1 的 I661T 突变体以及与肢带型肌营养不良症 R3 相关的 α-肌聚糖突变体。在本研究中,C17 被用作参考化合物,以比较新合成的联噻唑衍生物的活性。结果显示,C17 在 20 和 15 μM 浓度下对 LGMDR3 肌管中 α-肌聚糖表达的恢复效果最大,使蛋白含量翻倍。新衍生物保留了部分活性,但效果不如 C17,表明联噻唑骨架上的两个取代基对于充分发挥活性都很重要。 [1]
4'-甲基-4,5'-联噻唑类化合物此前已被鉴定为囊性纤维化跨膜调节因子(CFTR)校正剂,能够纠正该通道折叠缺陷突变体,从而调控氯离子跨膜转运。此外,据报道联噻唑衍生物C17可在体外和体内恢复α-肌聚糖的表达。本文报道了两种新的C17衍生物的合成,其中联噻唑骨架的两侧均进行了修饰。我们利用肌源性细胞测试了合成的化合物及其相应的前体,以评估α-肌聚糖的表达。结果表明,联噻唑骨架上的两个取代基对于最大限度地恢复α-肌聚糖突变体均至关重要。尽管如此,仍观察到部分活性保留。因此,这为进一步的衍生化/优化和靶向捕获研究铺平了道路,这些研究已在本研究中初步进行,作为概念验证,从而可以研究导致 α-肌聚糖校正的分子机制。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C19H21CLN4O2S2
分子量
436.978640317917
精确质量
436.079
CAS号
958941-60-1
PubChem CID
11958611
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
5.5
tPSA
133
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
7
可旋转键数目(RBC)
6
重原子数目
28
分子复杂度/Complexity
551
定义原子立体中心数目
0
SMILES
ClC1C=CC(=C(C=1)NC1=NC(=CS1)C1=C(C)N=C(NC(C(C)(C)C)=O)S1)OC
InChi Key
XERLNCVIGMCAMO-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C19H21ClN4O2S2/c1-10-15(28-18(21-10)24-16(25)19(2,3)4)13-9-27-17(23-13)22-12-8-11(20)6-7-14(12)26-5/h6-9H,1-5H3,(H,22,23)(H,21,24,25)
化学名
N-[5-[2-(5-chloro-2-methoxyanilino)-1,3-thiazol-4-yl]-4-methyl-1,3-thiazol-2-yl]-2,2-dimethylpropanamide
别名
CFTR corrector 12; C17; 958941-60-1; SMR000156108; MLS000561583; corr15jf; CHEMBL262627; orb2277839; SCHEMBL3800272;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.2884 mL 11.4422 mL 22.8843 mL
5 mM 0.4577 mL 2.2884 mL 4.5769 mL
10 mM 0.2288 mL 1.1442 mL 2.2884 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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