Anticancer; amylin analog; diabetes
Amylin receptors (AMY receptors), calcitonin receptor (CTR). Pramlintide is an amylin analog and agonist. Amylin receptors are heterodimers of the calcitonin receptor (CTR) and one of three receptor activity-modifying proteins (RAMPs), giving rise to the AMY1, AMY2, and AMY3 subtypes.

普兰林肽以剂量依赖的方式抑制HCT-116和HT-29细胞的生长，对后者疗效更佳（IC50值分别为48.67和9.10 μg/mL）[1]。当向HCT-116和HT-29细胞中加入5、10和20 μg/mL的普兰林肽时，5-氟尿嘧啶、奥沙利铂或伊立替康的抗增殖作用具有协同增强作用[1]。

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普兰林肽是一种强效的胰淀素受体激动剂。它通过与这些受体结合并激活它们而发挥作用，这些受体存在于包括胰腺、大脑和胃肠道在内的多种组织中。这会导致餐后胰高血糖素分泌减少、胃排空减缓和饱腹感增强。

在针对 1 型糖尿病患者的临床研究中，普兰林肽可降低餐后血糖波动。它还能降低餐后胰高血糖素分泌（1 型糖尿病患者的胰高血糖素分泌异常升高），并减缓胃排空速度，从而改善血糖控制并带来适度的体重减轻。

由于胰淀素受体需要多种蛋白质（CTR + RAMP），因此无细胞结合试验较为复杂。通常，将共表达人CTR和RAMP1/2/3的细胞膜与[125I]-胰淀素和不同浓度的普兰林肽孵育。孵育后，通过过滤分离结合的和游离的配体，并测定Ki值。

MTT 检测 [1]
将 HCT-116（野生型 p53）和 HT-29（突变型 p53）细胞以 5×10³ 个/孔的密度接种于 96 孔板中，每孔加入 200 μL 培养基，培养过夜使其贴壁。将贴壁细胞用一系列药物浓度处理：普兰林肽（0–102.4 μg/mL）、5-氟尿嘧啶（0–200 μM）、奥沙利铂（0–300 μM）或伊立替康（0–160 μM），单独处理或与三种不同浓度的普兰林肽（5、10 和 20 μg/mL）联合处理，这三种浓度的普兰林肽分别对应于 HT-29 细胞的 0.5×IC50、IC50 和 2×IC50。仅用培养基培养的细胞（仅用于普兰林肽处理）或含有等量DMSO的培养基作为对照（用于其他处理条件）。[1]
将细胞与指定浓度的药物孵育72小时。所有测量均重复三次。之后，按照制造商的方案进行细胞增殖实验。简而言之，将MTT染料加入到处理过的细胞中，使其在PBS中的最终浓度为0.5 mg/mL。然后，将培养板在37°C下孵育3小时，弃去MTT溶液，并向每个孔中加入100 μL DMSO溶解生成的甲臜产物，振荡5分钟。然后，使用酶联免疫吸附测定（ELISA）酶标仪在570 nm处读取吸光度值，参考波长为690 nm。细胞活力计算如下：实验组的吸光度值/对照组的吸光度值。 IC50值定义为使细胞活力降低50%所需的浓度。剂量-效应分析和IC50计算均使用Compusyn 1.0软件进行。

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在基于细胞的功能分析中，将共表达降钙素受体 (CTR) 和受体活性调节蛋白 (RAMP1、2 或 3) 的细胞（例如 CHO-K1）接种于 96 孔板中，并用钙指示剂染料（例如 Fluo-4）进行标记。用不同浓度的普兰林肽处理细胞，并测量细胞内钙离子浓度的增加，以确定激动剂的 EC50 值。

在研究和临床应用中，普兰林肽均采用皮下注射给药。在糖尿病啮齿动物模型中，通过测量餐后血糖水平、胰高血糖素浓度、胃排空率（使用标记餐）以及体重随时间的变化来评估其疗效。此外，静脉葡萄糖耐量试验（IVGTT）也是评估其疗效的手段之一。

由于普兰林肽是一种肽类药物，因此需皮下注射给药，不宜口服。在人体内，其吸收相对缓慢，皮下注射后约1小时达到血药峰浓度（Cmax）。普兰林肽清除迅速（半衰期约48分钟），主要在肾脏代谢。

临床应用中，普兰林肽主要引起胃肠道副作用，包括恶心、呕吐和厌食，这些副作用与剂量相关，且通常会随时间推移而消退。最严重的风险是严重低血糖，尤其是在与胰岛素联合使用时，因此需要谨慎调整剂量。

[1]. Pramlintide, an antidiabetic, is antineoplastic in colorectal cancer and synergizes with conventional chemotherapy. Clin Pharmacol. 2018 Mar 5;10:23-29.

为了研究普兰利奈与化疗药物在结直肠癌细胞系中的协同作用，我们尝试测试了三种不同浓度的普兰利奈，分别对应于每种细胞系的0.5×IC50、IC50和2×IC50。然而，由于HCT-116细胞系对普兰利奈的浓度要求较高，且药物供应有限，为了保持研究的一致性，我们最终使用了5、10和20 μg/mL的普兰利奈浓度，分别对应于HT-29细胞系的0.5×IC50、IC50和2×IC50。我们首次证实，在临床可达到的低浓度下，普兰林肽与5-氟尿嘧啶（5-FU）、奥沙利铂（OXA）和伊立替康（IRN）联合使用时，能够以浓度依赖的方式协同抑制HCT-116和HT-29细胞系中结直肠癌细胞的增殖。这些结果表明，普兰林肽是一种新型的潜在辅助抗癌药物，有助于克服对5-氟尿嘧啶（5-FU）、奥沙利铂（OXA）和伊立替康（IRN）的耐药性。需要进一步的体内和临床研究来证实普兰林肽作为结直肠癌有效化学预防和化疗药物的有效性。[1]
尽管本研究取得了令人鼓舞的结果，但仍存在一些局限性。首先，我们仅使用短期MTT法检测了普兰林肽的抗肿瘤活性。其次，我们仅使用了两种具有代表性的细胞系来研究普兰林肽基于p53状态的差异性作用；因此，HT-29和HCT-116细胞对普兰林肽反应的差异可能并非由p53引起。[1]
结论：本研究首次证实普兰林肽对结直肠癌具有抗癌活性，并与5-氟尿嘧啶、奥沙利铂和伊立替康具有协同作用。未来的研究将更全面地探索普兰林肽的抗增殖机制及其协同作用的潜在分子机制。此外，还将利用其他长期试验（例如克隆形成试验）和体内结直肠癌模型来分析普兰林肽的抗肿瘤潜力。[1]

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普兰林肽（商品名：Symlin）于2005年获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准，用于治疗1型和2型糖尿病。它是首个也是目前唯一获批的胰岛激素胰淀素的合成类似物。通过模拟胰淀素的天然作用，普兰林肽可与胰岛素疗法协同作用，更好地控制血糖水平，尤其是在餐后。其促进体重减轻的能力是另一项重要的临床优势，使其对超重糖尿病患者具有重要价值。

C173H271N51O55S2

4009.44157624245

4007.9451

187887-46-3

Pramlintide;151126-32-8;Pramlintide TFA

118984456

Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH2 (Disulfide bridge:Cys2-Cys7); H-Lys-Cys(1)-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys(1)-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH2.CH3CO2H; L-lysyl-L-cysteinyl-L-asparagyl-L-threonyl-L-alanyl-L-threonyl-L-cysteinyl-L-alanyl-L-threonyl-L-glutaminyl-L-arginyl-L-leucyl-L-alanyl-L-asparagyl-L-phenylalanyl-L-leucyl-L-valyl-L-histidyl-L-seryl-L-seryl-L-asparagyl-L-asparagyl-L-phenylalanyl-glycyl-L-prolyl-L-isoleucyl-L-leucyl-L-prolyl-L-prolyl-L-threonyl-L-asparagyl-L-valyl-glycyl-L-seryl-L-asparagyl-L-threonyl-L-tyrosinamide (2->7)-disulfide acetic acid

KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 (Disulfide bridge:Cys2-Cys7); KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY

White to off-white solid powder

1780Ų

57

61

110

281

9690

41

S1C[C@@H](C(N[C@@H](C)C(N[C@@H]([C@@H](C)O)C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@@H](C)C(N[C@@H](CC(N)=O)C(N[C@@H](CC2C=CC=CC=2)C(N[C@@H](CC(C)C)C(N[C@@H](C(C)C)C(N[C@@H](CC2=CNC=N2)C(N[C@@H](CO)C(N[C@@H](CO)C(N[C@@H](CC(N)=O)C(N[C@@H](CC(N)=O)C(N[C@@H](CC2C=CC=CC=2)C(NCC(N2CCC[C@H]2C(N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(N[C@@H](CC(C)C)C(N2CCC[C@H]2C(N2CCC[C@H]2C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(NCC(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N)=O)CC2C=CC(=CC=2)O)=O)[C@@H](C)O)=O)CC(N)=O)=O)CO)=O)=O)C(C)C)=O)CC(N)=O)=O)[C@@H](C)O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)=O)CC(C)C)=O)CCCNC(=N)N)=O)=O)=O)=O)NC([C@H]([C@@H](C)O)NC([C@H](C)NC([C@H]([C@@H](C)O)NC([C@H](CC(N)=O)NC([C@H](CS1)NC([C@H](CCCCN)N)=O)=O)=O)=O)=O)=O.OC(C)=O

DTPWZYSUQQHRKD-VIUAGAKSSA-N

InChI=1S/C171H267N51O53S2.C2H4O2/c1-21-81(12)130(163(268)207-110(56-78(6)7)169(274)222-53-33-42-118(222)170(275)221-52-32-41-117(221)160(265)219-135(89(20)230)167(272)206-109(66-125(180)238)151(256)212-128(79(8)9)161(266)186-68-126(239)192-111(70-223)154(259)203-107(64-123(178)236)152(257)218-134(88(19)229)166(271)195-98(136(181)241)57-92-43-45-94(231)46-44-92)214-159(264)116-40-31-51-220(116)127(240)69-187-141(246)101(58-90-34-24-22-25-35-90)199-148(253)105(62-121(176)234)201-149(254)106(63-122(177)235)202-155(260)112(71-224)209-156(261)113(72-225)208-146(251)103(60-93-67-184-75-188-93)205-162(267)129(80(10)11)213-150(255)100(55-77(4)5)198-145(250)102(59-91-36-26-23-27-37-91)200-147(252)104(61-120(175)233)196-137(242)82(13)189-144(249)99(54-76(2)3)197-142(247)96(39-30-50-185-171(182)183)193-143(248)97(47-48-119(174)232)194-165(270)132(86(17)227)215-138(243)83(14)190-157(262)114-73-276-277-74-115(210-140(245)95(173)38-28-29-49-172)158(263)204-108(65-124(179)237)153(258)217-131(85(16)226)164(269)191-84(15)139(244)216-133(87(18)228)168(273)211-114;1-2(3)4/h22-27,34-37,43-46,67,75-89,95-118,128-135,223-231H,21,28-33,38-42,47-66,68-74,172-173H2,1-20H3,(H2,174,232)(H2,175,233)(H2,176,234)(H2,177,235)(H2,178,236)(H2,179,237)(H2,180,238)(H2,181,241)(H,184,188)(H,186,266)(H,187,246)(H,189,249)(H,190,262)(H,191,269)(H,192,239)(H,193,248)(H,194,270)(H,195,271)(H,196,242)(H,197,247)(H,198,250)(H,199,253)(H,200,252)(H,201,254)(H,202,260)(H,203,259)(H,204,263)(H,205,267)(H,206,272)(H,207,268)(H,208,251)(H,209,261)(H,210,245)(H,211,273)(H,212,256)(H,213,255)(H,214,264)(H,215,243)(H,216,244)(H,217,258)(H,218,257)(H,219,265)(H4,182,183,185);1H3,(H,3,4)/t81-,82-,83-,84-,85+,86+,87+,88+,89+,95-,96-,97-,98-,99-,100-,101-,102-,103-,104-,105-,106-,107-,108-,109-,110-,111-,112-,113-,114-,115-,116-,117-,118-,128-,129-,130-,131-,132-,133-,134-,135-;/m0./s1

acetic acid;(2S)-N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1-[[2-[(2S)-2-[[(2S,3S)-1-[[(2S)-1-[(2S)-2-[(2S)-2-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1-[[2-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-1-amino-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidine-1-carbonyl]pyrrolidin-1-yl]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(4R,7S,10S,13S,16S,19R)-16-(2-amino-2-oxoethyl)-19-[[(2S)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-7,13-bis[(1R)-1-hydroxyethyl]-10-methyl-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carbonyl]amino]propanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]pentanediamide

187887-46-3; Triproamylin acetate; UNII-JS41L76X7I; Tripro-amylin acetate; Pramlintide acetate anhydrous;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O: 50 mg/mL (12.47 mM)

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。