| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Ezrin (Hep-receptor in the α domain, amino acids 308–372). No IC50, Ki, EC50, or DC50 values reported. [1]
B-cell receptor (BCR) complex; ezrin-actin cytoskeleton. [1] Antiviral against various viruses such as HIV, HCV, herpes viruses, HPV, and influenza viruses HEP-1 enhances antibody titers generated by hepatitis B vaccination and is effective against infections by various viruses including HIV, HCV, herpes viruses, HPV, and influenza viruses. As an immunomodulator, it enhances immune responses to vaccination and viral infection. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在PHA(3 μg/mL,24小时,37°C)刺激的人外周血白细胞中,GEPON(Rupe312,RepG3的活性序列)在1、3、10、30、100 ng/mL浓度下抑制IL-6、IL-1β、IL-8和TNFα的表达。在100 ng/mL时,IL-6表达相对对照(零肽)降低95%。IL-2表达不受影响。[1]
在小鼠DSS诱导的结肠炎模型中,HEP1 (Gepon) 和RepG3(GEKKRRETVEREGG)在有无LPS存在下均降低结肠组织IL-6 mRNA表达。RepG3的抗炎活性是HEP1的两倍。[1] 在NIH/3T3成纤维细胞中,GEPON 诱导分化,激活ERK1/2依赖性信号通路,划痕试验中细胞迁移率增加25%。GEPON还诱导FAK磷酸化。[2] 从DSS结肠炎小鼠分离的骨髓Ly6C+单核细胞体外培养,加入GEPON(50 μg/mL,14小时,37°C,5% CO2)后,IL-1β和IL-6的mRNA表达显著下降(p=0.034和p=0.022)。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在DSS诱导的小鼠结肠炎模型(C57BL/6小鼠,2.5% DSS两周期,每周期5天间隔5天,GEPON 2.25 mg/kg腹腔注射,每48小时一次,第1天至第19天)中,GEPON显著减轻体重下降(DSS组下降14%,GEPON组下降<6%,p<0.0001),降低疾病活动指数(DAI从5-6降至2-3),降低死亡率,并防止结肠缩短(DSS组:7.0±0.6 cm;GEPON组:8.5±0.6 cm,p=0.008;健康组:9.6±0.5 cm)。GEPON使结肠组织中Il1b、Il6和Nos2的mRNA分别降低2.8倍、3.4倍和3.2倍。Tgfb1、Il10和Arg1无显著变化。[2]
GEPON使结肠CD45+白细胞浸润从1.2×10⁶降至0.7×10⁶个细胞/结肠(p=0.009),Ly6G+粒细胞从5.6×10⁴降至2.5×10⁴(p=0.012),Ly6C+单核细胞从9.3×10⁴降至4.5×10⁴(p=0.008)。巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、CD4+和CD8+ T细胞无显著变化。单核细胞:巨噬细胞比值降低2倍(p=0.003)。[2] 在DSS小鼠分选的结肠Ly6C+单核细胞中,GEPON治疗使Tnf mRNA降低4.1倍(p=0.004),Nos2 mRNA降低4.5倍(p=0.009),Arg1 mRNA降低2.5倍(p=0.035)。在Ly6G+粒细胞中,Tnf mRNA降低3.6倍(p=0.017),Nos2 mRNA降低4.3倍(p=0.048)。对巨噬细胞无影响。[2] 在绵羊红细胞或卵清蛋白免疫的小鼠中,HEP1 (Gepon)(腹腔注射0.1 μg/只,免疫前1小时)使脾脏中IgM抗体形成细胞数量增加2.5倍(从600增至1500个/脾)。口服HEP1预处理(0.5 mg/只/天,持续20天)使加强免疫后血清血凝素和溶血素滴度提高2-3倍。[1] 在致死性疱疹病毒感染小鼠模型(HSV-1,1000 LD50)中,HEP1预处理(100 ng/只,腹腔注射,感染前48小时和24小时)将存活期延长至10.1天,未处理对照组为1.25天,Ridostin组(100 μg/只)为6天。[1] 在一项儿童乙肝疫苗接种研究(Kombiotech疫苗,4次注射)中,舌下给予HEP1(每次接种前2 mg/2 mL)使平均抗-HBs滴度从90.4升至181.1 mIU/mL,并将100–1000 mIU/mL范围的患者比例提高2倍,>1000 mIU/mL的比例提高4倍。[1] |
| 细胞实验 |
分离人外周血白细胞,用植物血凝素(PHA,3 μg/mL)在37°C刺激24小时。向培养基中加入不同浓度的GEPON(Rupe312,1、3、10、30、100 ng/mL)。孵育后,以pg/mL测量细胞因子浓度(IL-6、IL-1β、IL-8、TNFα、IL-2),并相对于零肽对照(设为100)表示。100 ng/mL肽时IL-6表达降低95%。[1]
从naive小鼠和DSS结肠炎小鼠(第6天)分离骨髓Ly6C+单核细胞和Ly6G+粒细胞。通过FACS分选细胞,以DMEM培养基(含FBS)在96孔板中培养,密度分别为每孔50,000个Ly6C+细胞或150,000个Ly6G+细胞,三复孔。GEPON以50 μg/mL加入。细胞在37°C、5% CO2孵育14小时,然后收获用于实时定量PCR分析mRNA。GEPON显著降低Ly6C+单核细胞中IL-1β和IL-6的mRNA(p=0.034和p=0.022)。[2] 培养NIH/3T3成纤维细胞,加入GEPON评估分化和迁移。进行划痕试验,GEPON处理使细胞迁移率增加25%。观察到ERK1/2依赖性细胞内信号级联激活和FAK磷酸化。[2] |
| 动物实验 |
DSS结肠炎模型:8-10周龄雄性C57BL/6小鼠(21-23 g),饮用水中加入2.5% DSS聚合物,连续5天,然后换普通水5天,再重复一个DSS周期,之后继续普通水4天。GEPON(2.25 mg/kg体重)溶于水,腹腔注射,体积50 μL,每48小时一次,从第1天至第19天。对照组仅给予水或DSS+溶剂(水,腹腔注射)。第19天处死小鼠,收集结肠用于长度测量、流式细胞术和PCR分析。[2]
小鼠免疫研究:(CBA × C57Bl)F1小鼠,HEP1口服给药0.5 mg/0.2 mL/只/天,持续20天,然后在第1天腹腔注射2000万绵羊红细胞进行免疫,第21天加强免疫(同样剂量)。每周测量血清血凝素和溶血素滴度。或者,小鼠在腹腔注射500万绵羊红细胞前1小时,腹腔注射HEP1(0.01-10 μg/只)。4天后收集脾脏计数抗体形成细胞。[1] 致死性疱疹感染模型:B/P白化小鼠(10-12 g),在感染前48小时和24小时腹腔注射HEP1(1、10或100 ng/只,溶于0.2 mL生理盐水),然后腹腔注射1000 LD50的1型单纯疱疹病毒(HSV-1 L2株,滴度3.5 Log/0.2 mL)。观察14天。阳性对照给予Ridostin(100 μg/只),阴性对照不给佐剂。[1] 儿童乙肝疫苗接种研究:患有恶性肿瘤的儿童接受Kombiotech乙肝疫苗(KHBV)注射,每月一次共3次,并在开始后第6个月注射第4次。HEP1组(n=15)在每次疫苗接种前舌下给予2 mg/2 mL HEP1溶液,含在口中2分钟后吞咽。对照组(n=16)接种疫苗但不给HEP1。测量抗-HBs滴度。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
接受鼻内GEPON(2 mg溶于2 mL水,每鼻孔5滴,每日2次,共5天)的儿童未观察到不良反应、副作用、过敏反应、超敏反应或禁忌症。未发现特应性皮炎加重。未报告药物不良相互作用。[1]
在俄罗斯超过20年的临床使用中,GEPON具有极好的安全性记录。[1] |
| 参考文献 |
[1]. Ezrin Peptide Therapy from HIV to COVID: Inhibition of Inflammation and Amplification of Adaptive Anti-Viral Immunity. Int J Mol Sci. 2021 Oct 28;22(21):11688.
[2]. Pharmaceutical grade synthetic peptide Thr-Glu-Lys-Lys-Arg-Arg-Glu-Thr-Val-Glu-Arg-Glu-Lys-Glu ameliorates DSS-induced murine colitis by reducing the number and pro-inflammatory activity of colon tissue-infiltrating Ly6G+ granulocytes and Ly6C+ monocytes. Peptides. 2020 Oct;132:170364. |
| 其他信息 |
GEPON (HEP1) 自2001年起在俄罗斯联邦注册用于人体,是一种局部和全身给药的免疫调节剂。对HIV患者的机会性感染、慢性复发性阴道念珠菌病、急慢性小肠结肠炎、菌群失调、胃十二指肠溃疡和炎症性肠病有效。已作为吸入喷雾用于治疗轻中度COVID-19。[1]
机制假说:埃兹蛋白肽结合到细胞表面(淋巴细胞、上皮细胞、成纤维细胞、单核细胞、巨噬细胞)埃兹蛋白的“受体”构象,诱导活性埃兹蛋白的变构打开,进而组织信号复合物(Ras>Raf>MEK>ERK,PI3K>AKT),增强B细胞活化和抗体产生。抑制IL-6可能通过激活CREB,与NFκB竞争CBP/p300辅因子实现。[1] GEPON 也称为HEP1(人埃兹蛋白肽一号),其活性药物成分为TEKKRRETVEREKE。衍生物RepG3(GEKKRRETVEREGG)在DSS结肠炎模型中的抗炎活性是HEP1的两倍。[1] |
| 分子式 |
C74H132N26O27
|
|---|---|
| 分子量 |
1817.99789619446
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| 精确质量 |
1816.975
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| CAS号 |
174641-44-2
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| PubChem CID |
25078222
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| 序列 |
Thr-Glu-Lys-Lys-Arg-Arg-Glu-Thr-Val-Glu-Arg-Glu-Lys-Glu
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| 短序列 |
TEKKRRETVEREKE
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| 外观&性状 |
White to off-white solid at room temperature
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| LogP |
-20.3
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| tPSA |
940
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
31
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
34
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| 可旋转键数目(RBC) |
69
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| 重原子数目 |
127
|
| 分子复杂度/Complexity |
3730
|
| 定义原子立体中心数目 |
16
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| SMILES |
O=C([C@H](CCCCN)NC([C@H](CCCCN)NC([C@H](CCC(=O)O)NC([C@H]([C@@H](C)O)N)=O)=O)=O)N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@@H]([C@@H](C)O)C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(N[C@H](C(=O)O)CCC(=O)O)=O)CCCCN)=O)CCC(=O)O)=O)CCC/N=C(\N)/N)=O)CCC(=O)O)=O)C(C)C)=O)=O)CCC(=O)O)=O)CCC/N=C(\N)/N)=O)CCC/N=C(\N)/N
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| InChi Key |
HTQONPPEZULJKY-XRBNWYQFSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C74H132N26O27/c1-36(2)56(69(124)97-47(22-27-52(107)108)66(121)93-44(19-13-35-87-74(83)84)61(116)94-45(20-25-50(103)104)64(119)90-41(16-7-10-32-77)63(118)98-49(71(126)127)24-29-54(111)112)99-70(125)57(38(4)102)100-67(122)48(23-28-53(109)110)95-62(117)43(18-12-34-86-73(81)82)92-60(115)42(17-11-33-85-72(79)80)91-59(114)39(14-5-8-30-75)88-58(113)40(15-6-9-31-76)89-65(120)46(21-26-51(105)106)96-68(123)55(78)37(3)101/h36-49,55-57,101-102H,5-35,75-78H2,1-4H3,(H,88,113)(H,89,120)(H,90,119)(H,91,114)(H,92,115)(H,93,121)(H,94,116)(H,95,117)(H,96,123)(H,97,124)(H,98,118)(H,99,125)(H,100,122)(H,103,104)(H,105,106)(H,107,108)(H,109,110)(H,111,112)(H,126,127)(H4,79,80,85)(H4,81,82,86)(H4,83,84,87)/t37-,38-,39+,40+,41+,42+,43+,44+,45+,46+,47+,48+,49+,55+,56+,57+/m1/s1
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| 化学名 |
(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]hexanoyl]amino]pentanedioic acid
|
| 别名 |
HEP-1; gepon; Human ezrin peptide (324-337); 174641-44-2; orb1942551; SCHEMBL30942637;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O: ~ 50 mg/mL (27.5 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5501 mL | 2.7503 mL | 5.5006 mL | |
| 5 mM | 0.1100 mL | 0.5501 mL | 1.1001 mL | |
| 10 mM | 0.0550 mL | 0.2750 mL | 0.5501 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。