| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
STAT3[1]
W1131 TFA targets the STAT3 transcription factor, a key node in the IL6-JAK-STAT3 signaling pathway. STAT3 is a cytoplasmic transcription factor that, when activated by phosphorylation (specifically at Tyr705) by JAK family kinases, dimerizes and translocates to the nucleus, where it binds to DNA response elements and drives the transcription of genes involved in cell proliferation (e.g., Cyclin D1, c-Myc), survival (e.g., Bcl-xL, Mcl-1, Survivin), angiogenesis (VEGF), and metastasis (MMPs). Persistent STAT3 activation is a hallmark of many cancers, including gastric cancer, where it is associated with poor prognosis, drug resistance, and increased tumor progression. In addition to STAT3 inhibition, W1131 TFA induces ferroptosis, a non-apoptotic, iron-dependent form of cell death characterized by lipid peroxidation and accumulation of reactive oxygen species (ROS). Ferroptosis is regulated by pathways involving GPX4 (glutathione peroxidase 4), SLC7A11 (a component of the xCT cystine-glutamate antiporter), and the accumulation of lipid peroxides. By inducing ferroptosis, W1131 TFA can kill cancer cells that are resistant to apoptosis. Thus, W1131 TFA has a dual mechanism of action: inhibition of STAT3 signaling plus induction of ferroptosis. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外细胞实验表明，W1131 TFA 是一种强效的胃癌细胞生长抑制剂。在胃癌细胞系（例如 AGS、MKN45、MKN74、HGC-27 和 NCI-N87）中，使用 W1131 TFA（0.1-20 uM，24-72 小时）处理可降低细胞活力，抑制细胞增殖，并诱导细胞周期阻滞和 DNA 损伤反应。Western blotting 结果表明，该化合物能以剂量依赖的方式有效抑制 STAT3 磷酸化（p-STAT3 Tyr705）。此外，它还能下调 STAT3 靶基因的表达，包括 Cyclin D1、c-Myc、Bcl-xL 和 Survivin。 W1131 TFA 可诱导铁死亡，表现为脂质过氧化水平升高（通过 C11-BODIPY 581/591 探针和流式细胞术检测）、细胞内铁水平升高以及还原型谷胱甘肽 (GSH) 耗竭。铁死亡抑制剂（ferrostatin-1 和 liproxstatin-1）可阻断铁死亡的诱导，证实了其特异性。W1131 TFA 与 5-氟尿嘧啶 (5-FU) 具有协同作用，可克服化疗耐药性，使耐药胃癌细胞中 5-FU 的 IC₅0 值降低数倍。MTT 或 LDH 释放试验表明，在杀死癌细胞的浓度下，该化合物对正常胃上皮细胞 (GES-1) 无显著毒性。抑制 STAT3 磷酸化和诱导细胞死亡的 EC₅0 值通常在低微摩尔范围内。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，W1131 TFA 已在多种胃癌模型中展现出抗癌功效。在皮下异种移植模型中，将胃癌细胞系（例如 MKN45 或 AGS 细胞）植入 BALB/c 裸鼠体内，腹腔注射 (IP) W1131 TFA，剂量为 10-30 mg/kg，每日一次或隔日一次，持续 14-21 天，可显著抑制肿瘤生长，肿瘤生长抑制率 (TGI) >50%。在胃癌患者来源的异种移植 (PDX) 模型（将原发肿瘤组织直接植入小鼠体内）中，W1131 TFA 也抑制了肿瘤生长。在类器官模型（源自胃癌患者的 3D 培养物）中，W1131 TFA 治疗降低了类器官的活力和体积。该化合物还能降低胃癌对 5-氟尿嘧啶 (5-FU) 的体内耐药性。 W1131 TFA 与 5-FU 联合治疗较单独使用任一药物均能更有效地抑制肿瘤生长并提高患者生存率。W1131 TFA 在这些剂量下通常耐受性良好，未观察到明显的体重减轻或全身毒性。其抗癌活性和克服耐药性的潜力源于其双重机制（STAT3 抑制 + 铁死亡诱导）。
|
| 酶活实验 |
典型的W1131 TFA非细胞结合试验是利用基于ELISA的转录因子检测方法测定STAT3的DNA结合活性。重组人STAT3蛋白（全长）通过JAK2磷酸化激活（或使用组成型活性STAT3突变体）。该试验在包被有包含STAT3共有DNA结合位点（例如，5′-TTCCCGGAA-3′）的寡核苷酸的96孔板上进行。将激活的STAT3与W1131 TFA（0.1-50 uM）在结合缓冲液（10 mM HEPES，pH 7.9，50 mM KCl，0.2 mM EDTA，2.5 mM DTT，0.05% NP-40，10%甘油）中于室温孵育30分钟。将混合物加入DNA包被的孔中，孵育1小时。用抗STAT3抗体检测结合的STAT3，随后加入HRP标记的二抗和TMB底物。测量450 nm处的吸光度。STAT3-DNA结合的抑制百分比相对于不含抑制剂的对照孔计算。IC₅0值由剂量-反应曲线确定。对于铁死亡机制，可以使用非细胞检测方法来测量W1131 TFA诱导的脂质过氧化：将含有多不饱和脂肪酸（例如，含花生四烯酸的磷脂酰胆碱）的脂质体或纯化脂质囊泡与Fe2⁺（10-50 uM）和W1131 TFA（1-50 uM）在37℃下孵育30-60分钟。脂质氢过氧化物的定量可通过比色法脂质氢过氧化物检测试剂盒（例如FOX检测）或硫代巴比妥酸反应物（TBARS）检测法测定丙二醛（MDA）来实现。此外，还可以进行体外GPX4活性测定：将重组人GPX4与谷胱甘肽（GSH）、磷脂氢过氧化物底物（例如磷脂酰胆碱氢过氧化物，PCOOH）和W1131 TFA（0-50 uM）孵育，并通过GSH氧化速率或氢过氧化物还原速率来测定GPX4活性。
|
| 细胞实验 |
使用胃癌细胞系（例如 AGS、MKN45、MKN74、HGC-27）进行 W1131 TFA 的体外细胞实验。细胞在添加 10% FBS 和 1% 青霉素-链霉素的 RPMI-1640 或 DMEM 培养基中，于 37℃、5% CO2 条件下培养。进行细胞活力检测时，将细胞以 5 × 103-1 × 10⁴ 个/孔的密度接种于 96 孔板中，过夜培养使其贴壁，然后用浓度分别为 0、0.1、0.5、1、2.5、5、10、20 和 50 uM 的 W1131 TFA 处理 24、48 或 72 小时。细胞活力采用 MTT 法（0.5 mg/mL，37℃孵育 4 小时，570 nm 波长处测定吸光度）或 CellTiter-Glo 发光细胞活力检测法进行测定。为抑制 STAT3，将细胞用 W1131 TFA（0.1-20 uM）处理 6-24 小时，并制备全细胞裂解液。采用针对 p-STAT3(Tyr705)、总 STAT3 和 STAT3 靶基因（Cyclin D1、c-Myc、Bcl-xL、Survivin）的抗体进行蛋白质印迹分析。为诱导铁死亡，将细胞用 W1131 TFA（1-20 uM）处理 12-48 小时。脂质过氧化通过将细胞与 C11-BODIPY 581/591 (5 uM) 在 37°C 下孵育 30 分钟来测定，随后进行流式细胞术（FL1 通道）或荧光显微镜检查。使用 Ferrostatin-1 (2 uM) 或 liproxstatin-1 (1 uM) 作为铁死亡抑制剂来验证特异性。细胞内 GSH 水平使用 GSH-Glo 检测试剂盒或比色法测定。细胞死亡也通过 PI（碘化丙啶）染色和流式细胞术进行测定。计算生长抑制的 IC₅0 值。与 5-FU 的协同作用采用 Chou-Talalay 组合指数 (CI) 法进行评估。
|
| 动物实验 |
W1131 TFA 的体内动物研究在雌性 BALB/c 裸鼠（6-8 周龄，18-22 g）中进行。对于皮下异种移植模型，将胃癌细胞（例如 MKN45 或 AGS，5 × 10⁶ 个细胞溶于 0.1 mL PBS）皮下注射到小鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到约 100-150 mm³（通常在接种后 7-10 天）时，将小鼠随机分组（每组 n = 6-10）。W1131 TFA 配制于合适的溶剂中（例如 5% DMSO + 5% Tween-80 + 90% 生理盐水或 0.5% CMC 的 PBS 溶液）。该化合物以 10、20 或 30 mg/kg 的剂量腹腔注射（IP），每日一次或隔日一次，持续 14-21 天。在联合用药研究中，5-氟尿嘧啶（5-FU，25 mg/kg，腹腔注射，每周两次）单独给药或与W1131 TFA联合给药。对照组仅接受赋形剂。每2-3天使用数字游标卡尺测量肿瘤体积，计算公式为（长度×宽度²）/2。肿瘤生长抑制率（TGI）计算公式为（1 - [终点时治疗组肿瘤体积]/[终点时对照组肿瘤体积]）× 100%。每2-3天监测体重，作为毒性指标。对于PDX模型，将患者来源的胃肿瘤组织块（2-3 mm³）皮下植入小鼠体内；给药和监测方法与上述类似。研究结束时（通常为对照组肿瘤体积达到约 1000-1500 mm³ 或治疗 21 天后），对小鼠实施安乐死，切除肿瘤，称重，并进行蛋白质印迹分析（以确认 p-STAT3 抑制和 GPX4 下调）、免疫组织化学分析（Ki67 用于检测增殖，TUNEL 用于检测凋亡，4-HNE 用于检测脂质过氧化）和组织病理学分析（H&E 染色）。在生存研究中，小鼠将被追踪观察直至达到人道终点或死亡。所有动物实验程序均须经机构动物护理和使用委员会批准。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
W1131 TFA 的药代动力学 (PK) 特性尚未公开报道。根据其在小鼠异种移植模型中的应用（每日一次或隔日一次，腹腔注射剂量为 10-30 mg/kg），该化合物的消除半衰期 (t1/2) 可能为数小时，足以支持每日或隔日给药。三氟乙酸盐形式可提高其在体内研究中的溶解度和稳定性。该化合物通常配制于含有 DMSO、Tween-80 和生理盐水的载体中，或配制于 0.5% CMC 中。目前尚无关于口服生物利用度、分布容积、血浆蛋白结合率或代谢途径的数据。由于该化合物尚未进入临床开发阶段，因此缺乏人体药代动力学数据。仅供研究使用；不可用于人体给药。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
W1131 TFA 在动物体内的毒理学数据仅限于抗肿瘤疗效研究的观察结果。在这些研究中，小鼠在有效剂量（10-30 mg/kg，腹腔注射）下对 W1131 TFA 的耐受性通常良好，未报告明显的体重减轻、行为异常或明显的毒性症状。尚未有关于主要器官（肝脏、肾脏、心脏、肺脏）的特定组织病理学检查报告。使用正常胃上皮细胞 (GES-1) 进行的体外细胞毒性研究表明，W1131 TFA 在浓度高达 10 μM 时毒性极低，正常细胞的 IC₅₀ 值通常 >25 μM，提示存在治疗窗口。该化合物尚未进行标准遗传毒性试验（Ames 试验、体外微核试验）的评估。也未进行生殖和发育毒性研究。应采取标准的实验室安全防护措施（手套、实验服、护目镜）。仅供研究使用；不可用于人体治疗。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
W1131 TFA尚未获准用于临床，目前正处于抗癌研究化合物的临床前开发阶段。其作用机制涉及STAT3信号通路的双重抑制和铁死亡的诱导。STAT3是胃癌的关键驱动因子，持续的STAT3激活会导致肿瘤生长、存活和耐药性。铁死亡是一种独特的非凋亡性细胞死亡形式，可以克服癌症中常见的凋亡抵抗。W1131 TFA通过调节IL6-JAK-STAT3和铁死亡通路，影响细胞周期、DNA损伤反应和氧化磷酸化，从而抑制胃癌的发生发展。该化合物可降低对5-氟尿嘧啶（5-FU，胃癌的标准化疗药物）的耐药性，并在更接近临床肿瘤的PDX和类器官模型中显示出疗效。W1131 TFA尚未注册任何临床试验。仅供研究使用；不得用于人体诊断或治疗。
|
| 分子式 |
C25H20F3N5O6
|
|---|---|
| 分子量 |
543.45
|
| 相关CAS号 |
W1131;2740522-79-4
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8401 mL | 9.2005 mL | 18.4010 mL | |
| 5 mM | 0.3680 mL | 1.8401 mL | 3.6802 mL | |
| 10 mM | 0.1840 mL | 0.9200 mL | 1.8401 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
