| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 靶点 |
SF2312 ammonium is a highly potent inhibitor of Enolase (ENO2 and ENO1). The enzymatic inhibition IC₅₀ for SF-2312 against human Enolase 2 (ENO2) is in the low nM range (approximately 10 nM). [1]
Enolase (ENO1 and ENO2), a key glycolytic enzyme that converts 2-phosphoglycerate to phosphoenolpyruvate. SF2312 ammonium is a highly potent enolase inhibitor with an enzymatic inhibition IC50 against human enolase 2 (ENO2) in the low nanomolar range (approximately 10 nM). It selectively targets enolase-deficient cancer cells and has antibiotic activity. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
SF2312铵盐在体外能有效抑制烯醇化酶的酶活性，其IC₅₀值在低纳摩尔范围内。[1] SF-2312在低微摩尔浓度下即可选择性抑制ENO1缺失的胶质瘤细胞系（D423和Gli56）的增殖，而同源ENO1恢复的细胞仅在浓度高于200微摩尔时才表现出抑制作用。[1] SF-2312（10微摩尔）处理72小时后，可显著抑制ENO1缺失的胶质瘤细胞的糖酵解，表现为¹³C-葡萄糖转化为¹³C-乳酸的减少和转化为¹³C-甘油酸的增加。 [1] SF-2312 处理可显著提高 ENO1 缺失的胶质瘤细胞中 3-PGA/PEP 的比值，表明其特异性抑制了细胞内的烯醇化酶活性。[1] SF-2312 在 12.5 µM 浓度下即可诱导 ENO1 缺失的 D423 胶质瘤细胞凋亡，而 ENO1 恢复的对照组细胞仅在 400 µM 浓度下才出现细胞死亡诱导。[1] SF-2312 处理可在治疗开始后 8 小时内降低 ENO1 缺失的胶质瘤细胞中的 ATP 水平和其他高能磷酸盐（例如磷酸肌酸）的含量。[1]
体外实验表明，SF2312铵盐能有效抑制烯醇化酶的活性，其IC50值在低纳摩尔范围内。它能选择性地抑制ENO1缺失的胶质瘤细胞系（D423和Gli56）的增殖，抑制浓度在低微摩尔范围内；而ENO1恢复的细胞仅在浓度高于200微摩尔时才表现出抑制作用。10微摩尔浓度的SF2312铵盐处理72小时可显著抑制糖酵解，浓度≥12.5微摩尔时可诱导细胞凋亡，并在8小时内降低ATP水平。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
SF2312铵盐的体内活性数据有限。SF2312是一种膦酸盐类抗生素，最初从微单孢菌属（Micromonospora）中分离得到，已被证实具有厌氧活性。作为一种烯醇化酶抑制剂，该化合物有望在ENO1缺陷型肿瘤模型中发挥抗肿瘤活性。其对ENO1缺陷型胶质瘤细胞的选择性毒性提示其可能具有治疗该亚型肿瘤的潜力。需要进一步的体内研究来评估其疗效和耐受性。
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| 酶活实验 |
烯醇化酶的酶活性采用两种方法测定：荧光NADH偶联法和通过磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）生成直接分光光度法。荧光法测定中，烯醇化酶活性通过丙酮酸激酶-乳酸脱氢酶偶联反应中NADH的氧化来测定。该反应在含有KCl、MgSO₄、三乙醇胺、NADH和ADP的缓冲液中进行，并加入过量的2-磷酸甘油酸（2-PGA）、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶。烯醇化酶活性通过荧光法测定NADH的氧化来确定，激发波长为340 nm，发射波长为460 nm。底物浓度为5 mM 2-PGA。另一种方法是直接测定烯醇化酶活性，即通过240 nm处的吸光度来检测2-PGA生成PEP的量，无需辅助试剂。两种测定均在96孔板中进行。 [1]
烯醇化酶活性测定（非细胞法）：烯醇化酶活性可通过荧光NADH偶联法或直接分光光度法测定，后者通过磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）的生成来检测。荧光法测定是在含有KCl、MgSO4、三乙醇胺、NADH、ADP、2-磷酸甘油酸（2-PGA）、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶的缓冲液中，通过丙酮酸激酶-乳酸脱氢酶偶联反应测定NADH的氧化活性。测量荧光强度（激发波长340 nm，发射波长460 nm）。或者，也可直接通过检测2-PGA在240 nm处生成的PEP来测定烯醇化酶活性。 |
| 细胞实验 |
细胞增殖采用结晶紫染色法或使用自动化成像系统进行活细胞汇合度测量进行检测。结晶紫染色法中，将细胞接种于96孔板中，经处理后用福尔马林固定，再用结晶紫染色，最后用乙酸提取染料，并在595 nm处测量吸光度。[1] 细胞凋亡采用YO-PRO®-1碘化物染色法进行评估。凋亡细胞可被染料渗透，而活细胞则不被染色。细胞总数采用Hoechst 33342进行定量。将细胞接种于96孔板中，经处理、染色后，使用高内涵筛选系统进行成像。[1] ATP含量采用基于荧光素酶/荧光素的检测方法进行测定。将检测试剂加入96孔板中的细胞中，并测量发光值。[1] 糖酵解通量采用¹³C同位素示踪法进行测定。细胞培养于添加了¹³C-1或均匀标记的¹³C-葡萄糖的无葡萄糖DMEM培养基中。培养基代谢物用甲醇提取，冻干，重悬于D₂O中，并用¹³C NMR光谱进行分析。[1] 进行细胞热位移实验以证明SF-2312与完整细胞中的烯醇化酶直接结合。细胞用药物处理后，经胰蛋白酶消化、洗涤，重悬于PBS中，并进行温度梯度处理。然后裂解细胞，离心，并用Western blot分析上清液。[1]
细胞增殖和凋亡检测方案：将ENO1缺失和ENO1恢复的胶质瘤细胞（D423、Gli56）接种于96孔板（5000个细胞/孔）。加入SF2312铵（0-400 uM）培养72小时。采用结晶紫染色或活细胞汇合度自动成像法检测细胞增殖。采用Annexin V/PI双染法通过流式细胞术评估细胞凋亡。采用发光ATP检测法测定ATP水平。采用13C-葡萄糖示踪法评估代谢通量。 |
| 动物实验 |
异种移植胶质瘤模型方案（推荐）：将ENO1基因敲除的胶质瘤细胞（5×10⁶个细胞/只小鼠）皮下植入6-8周龄的雌性无胸腺裸鼠体内。当肿瘤体积达到约100-150 mm³时，将小鼠随机分组（n=6-8）。每日腹腔注射SF2312铵，剂量为5-25 mg/kg，持续14-21天。每2-3天使用游标卡尺测量肿瘤体积。实验结束时，收集肿瘤组织，用于分析烯醇化酶活性、糖酵解中间产物（3-PGA/PEP比值）、ATP水平和细胞凋亡标志物（裂解型caspase-3、PARP）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
SF2312铵盐的药代动力学数据有限。作为一种小分子膦酸盐类抗生素（分子量214.11，铵盐），该化合物具有良好的水溶性。与游离酸相比，铵盐形式提高了溶解度和稳定性。未来需要利用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析来确定其体内药代动力学特性，包括半衰期、清除率和生物利用度。建议储存于-20℃，并避光保存。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
与ENO1恢复或ENO1完整的细胞相比，SF-2312对ENO1缺失的胶质瘤细胞表现出选择性毒性。在ENO1缺失的D423细胞中，低µM浓度即可抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡，而对于ENO1恢复的细胞，则需要更高的浓度（高于200 µM）。[1]
SF2312铵的毒性数据有限。该化合物仅供研究使用，不可用于人体治疗。它在低微摩尔浓度下对ENO1缺陷型胶质瘤细胞表现出选择性毒性，而对ENO1恢复型细胞的抑制浓度则需>200微摩尔，这表明在ENO1缺陷的情况下，该化合物具有良好的治疗窗口。应遵循标准安全预防措施。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
SF2312铵盐是一种天然膦酸盐类抗生素，由放线菌小单孢菌（Micromonospora）产生，最初因其在厌氧条件下的抗菌活性而被发现。其作用机制此前尚不清楚。[1] SF-2312是顺式和反式非对映异构体的外消旋混合物。X射线晶体衍射分析表明，(S,S)-对映异构体是与烯醇化酶结合的活性形式。[1] SF-2312可能通过葡萄糖-6-磷酸转运系统穿透细菌膜，类似于磷霉素，这或许可以解释其对真菌缺乏活性。[1] SF-2312的膦酸盐部分使其细胞渗透性较差，这限制了其作为治疗药物的开发。[1]
SF2312铵盐是一种研究化合物，尚未进入临床试验或获得监管部门批准用于人体。它是一种新型膦酸盐类抗生素和烯醇化酶抑制剂，最初从微单孢菌属（Micromonospora）中分离得到。该化合物在厌氧条件下具有活性，并对ENO1缺陷细胞表现出选择性毒性，使其成为研究糖酵解和癌症代谢脆弱性的宝贵工具。储存于-20℃，避光保存。 |
| 分子式 |
C4H11N2O6P
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|---|---|
| 分子量 |
214.11
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| 精确质量 |
231.0620221
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| 相关CAS号 |
SF2312;107729-45-3
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| PubChem CID |
170900975
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
126 Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
0
|
| 重原子数目 |
14
|
| 分子复杂度/Complexity |
236
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1C(C(=O)N(C1O)O)P(=O)([O-])[O-].[NH4+].[NH4+]
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| InChi Key |
HWIRXQWBKSFJJG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C4H8NO6P.2H3N/c6-3-1-2(12(9,10)11)4(7)5(3)8;;/h2-3,6,8H,1H2,(H2,9,10,11);2*1H3
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| 化学名 |
diazanium;1,5-dihydroxy-3-phosphonatopyrrolidin-2-one
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| 别名 |
SF2312 ammonium; SF-2312 ammonium
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 本产品在运输和储存过程中需避光。 (2). 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :≥ 30 mg/mL (~140.11 mM)
DMSO :< 1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.6705 mL | 23.3525 mL | 46.7050 mL | |
| 5 mM | 0.9341 mL | 4.6705 mL | 9.3410 mL | |
| 10 mM | 0.4670 mL | 2.3352 mL | 4.6705 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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