| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 靶点 |
SF-2312 is a highly potent inhibitor of Enolase (ENO2 and ENO1). The enzymatic inhibition IC₅₀ for SF-2312 against human Enolase 2 (ENO2) is in the low nM range (approximately 10 nM). [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
SF2312 优先毒害缺乏 ENO1 的神经胶质瘤细胞。相比之下,异位重新表达 ENO1 的同基因 ENO1 拯救的 D423 细胞仅在 SF2312 剂量大于 200 μM 时才表现出增殖。经过两周的治疗后,ENO1 缺失的 D423 神经胶质瘤细胞系的增殖能力在低 μM 范围内受到抑制。克制。只有 ENO1 耗尽的神经胶质瘤细胞才会选择性地受到 SF2312 (10 μM) 的影响,SF2312 (10 μM) 会剂量依赖性地降低 U-13C 葡萄糖向 13C 乳酸的转化 [1]。这种效应不会发生在 ENO1 拯救的或其他 ENO1 完整的神经胶质瘤细胞中。放线菌小单孢菌产生 SF2312,具有广谱抗菌作用。它对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌特别有效,但对大肠杆菌效果较差,对真菌无效[1]。
SF-2312 在体外能有效抑制 Enolase 的酶活性,IC₅₀ 在低 nM 范围。[1] SF-2312 选择性地抑制 ENO1 缺失的胶质瘤细胞系(D423 和 Gli56)的增殖,抑制浓度在低 µM 范围,而同基因 ENO1 修复的细胞仅在浓度高于 200 µM 时才显示出抑制。[1] 用 10 µM 的 SF-2312 处理 72 小时,可显著抑制 ENO1 缺失胶质瘤细胞的糖酵解,表现为 ¹³C-葡萄糖向 ¹³C-乳酸的转化减少,而向 ¹³C-甘油酸的转化增加。[1] SF-2312 处理导致 ENO1 缺失胶质瘤细胞中 3-PGA/PEP 比率显著增加,表明在细胞内特异性抑制了 Enolase 活性。[1] SF-2312 在 12.5 µM 浓度下开始诱导 ENO1 缺失的 D423 胶质瘤细胞凋亡,而 ENO1 修复的对照细胞仅在 400 µM 浓度下才显示细胞死亡诱导。[1] SF-2312 处理在开始后 8 小时即可降低 ENO1 缺失胶质瘤细胞中的 ATP 水平和其他高能磷酸盐(如磷酸肌酸)水平。[1] |
| 酶活实验 |
Enolase 酶活性使用两种方法测量:荧光 NADH 偶联法和通过形成磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的直接分光光度法。对于荧光测定法,Enolase 活性通过丙酮酸激酶-乳酸脱氢酶偶联测定中的 NADH 氧化来测量。测定在含有 KCl、MgSO₄、三乙醇胺、NADH 和 ADP 的缓冲液中进行,并加入过量的 2-磷酸甘油酸(2-PGA)、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶。通过荧光法测量 NADH 的氧化来确定 Enolase 活性,激发波长为 340 nm,发射波长为 460 nm。底物浓度为 5 mM 2-PGA。或者,通过 2-PGA 形成 PEP 在 240 nm 处的吸光度直接测量 Enolase 活性,省略了辅助试剂。两种测定均在 96 孔板中进行。[1]
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| 细胞实验 |
细胞增殖通过结晶紫染色或使用自动成像系统进行活细胞汇合度测量来测定。对于结晶紫测定,将细胞接种在 96 孔板中,处理后用福尔马林固定,用结晶紫染色,并用乙酸提取染料,在 595 nm 处测量吸光度。[1]
通过用 YO-PRO®-1 碘化物染色细胞来评估细胞凋亡。凋亡细胞对染料变得可渗透,而活细胞不被染色。使用 Hoechst 33342 量化总细胞数。将细胞接种在 96 孔板中,处理,染色,并使用高内涵筛选系统成像。[1] 使用基于荧光素酶/荧光素的测定法测量 ATP 含量。将测定试剂添加到 96 孔板中的细胞中,并测量化学发光。[1] 使用 ¹³C 同位素示踪法测量糖酵解通量。细胞在补充有 ¹³C-1 或均匀标记的 ¹³C-葡萄糖的无葡萄糖 DMEM 中培养。用甲醇提取培养基中的代谢物,冻干,重悬于 D₂O 中,并通过 ¹³C NMR 光谱分析。[1] 进行细胞热转移测定以证明 SF-2312 在完整细胞中与 Enolase 的直接结合。用药物处理细胞,胰蛋白酶消化,洗涤,重悬于 PBS 中,并进行温度梯度处理。然后裂解细胞,离心,上清液通过 Western blot 分析。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
SF-2312对ENO1缺失的胶质瘤细胞表现出选择性毒性,而对ENO1恢复或ENO1完整的细胞则无此作用。在ENO1缺失的D423细胞中,低µM浓度即可抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡,而对于ENO1恢复的细胞,则需要更高的浓度(高于200 µM)。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
SF-2312 是一种由放线菌小单孢菌(Micromonospora)产生的天然膦酸酯类抗生素,最初因其在厌氧条件下的抗菌活性而被发现。其作用机制此前尚不清楚。[1] SF-2312 是顺式和反式非对映异构体的外消旋混合物。X射线晶体衍射分析表明,(S,S)-对映异构体是与烯醇化酶结合的活性形式。[1] SF-2312 可能通过葡萄糖-6-磷酸转运系统穿透细菌膜,类似于磷霉素,这或许可以解释其对真菌缺乏活性。[1] SF-2312 的膦酸酯部分使其细胞渗透性较差,这限制了其作为治疗药物的开发。[1]
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| 分子式 |
C4H8NO6P
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|---|---|
| 分子量 |
197.08322
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| 精确质量 |
197.009
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| 元素分析 |
C, 24.38; H, 4.09; N, 7.11; O, 48.71; P, 15.72
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| CAS号 |
107729-45-3
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| 相关CAS号 |
SF2312 ammonium
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| PubChem CID |
52913330
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| LogP |
-2.4
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| tPSA |
128.11
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
12
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| 分子复杂度/Complexity |
248
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ON1C(O)CC(P(=O)(O)O)C1=O
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| InChi Key |
CGWBGDOPBYWJKZ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C4H8NO6P/c6-3-1-2(12(9,10)11)4(7)5(3)8/h2-3,6,8H,1H2,(H2,9,10,11)
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| 化学名 |
(1,5-dihydroxy-2-oxopyrrolidin-3-yl)phosphonic acid
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| 别名 |
SF2312; SF 2312; SF-2312
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.0741 mL | 25.3704 mL | 50.7408 mL | |
| 5 mM | 1.0148 mL | 5.0741 mL | 10.1482 mL | |
| 10 mM | 0.5074 mL | 2.5370 mL | 5.0741 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
![]() SF2312 is a potent inhibitor of Enolase with mixed competitive and non-competitive kinetics.Nat Chem Biol.2016Dec;12(12):1053-1058. th> |
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![]() SF2312 stabilizes Enolase 2 against thermal denaturation.Nat Chem Biol.2016Dec;12(12):1053-1058. td> |
![]() SF2312 inhibits Enolase activity and is selectively toxic to ENO1-deleted glioma cells.Nat Chem Biol.2016Dec;12(12):1053-1058. td> |