Poly (I:C):Kanamycin (1:1) (sodium)

目录号: V76614 纯度: ≥98%
聚(I:C):卡那霉素(1:1)钠是聚(I:C)和卡那霉素的等比例复合物。
Poly (I:C):Kanamycin (1:1) (sodium) 产品类别: TLR
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
聚肌苷酸胞苷酸(Poly(I:C):Kanamycin (1:1) sodium)是由等比例的聚肌苷酸胞苷酸和卡那霉素组成的复合物。聚肌苷酸胞苷酸钠是双链RNA的合成类似物,也是TLR3和视黄酸诱导基因I受体(RIG-I和MDA5)的激动剂。聚肌苷酸胞苷酸钠可用作疫苗佐剂,以增强先天性和适应性免疫反应并诱导癌细胞凋亡。卡那霉素是一种口服生物活性抗菌剂(对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效),可通过与70S核糖体亚基结合抑制转位并导致错配。卡那霉素对结核分枝杆菌(包括敏感菌株和耐药菌株)和肺炎克雷伯菌均具有良好的抑制作用,可用于结核病和肺炎的研究。
Poly(I:C):Kanamycin (1:1) (钠盐) 是由合成的双链 RNA 类似物 poly(I:C) 和氨基糖苷类抗生素卡那霉素等摩尔组成的复合物,以钠盐形式存在。在该复合物中,卡那霉素起到稳定 poly(I:C) 的作用,而 poly(I:C) 是 TLR3 和 RIG-I 样受体(RIG-I 和 MDA5)的激动剂。钠盐形式增强了该复合物的稳定性和溶解度,使其更适用于研究用途。
生物活性&实验参考方法
靶点
TLR3[2], RIG-I[2], MDA5[2], apoptosis[2]
Poly (I:C):Kanamycin (1:1) (sodium) targets two different biological entities. The poly(I:C) component targets Toll-like receptor 3 (TLR3) and the retinoic acid-inducible gene I (RIG-I)-like receptors (RIG-I and MDA5). The kanamycin component targets the bacterial 70S ribosomal subunit, binding to it and causing miscoding and inhibition of translocation.
体外研究 (In Vitro)
聚肌苷酸-聚胞苷酸钠(20 ng/mL;24 小时;WM793、WM278、WM239A、WM9 和 1205Lu 细胞)处理显著降低了细胞活力,从对照组的 100% 降至 20%,仅占总数的 50%[1]。用 200 ng/mL 的聚肌苷酸-聚胞苷酸钠处理 1205Lu 细胞 24 小时可导致这些细胞凋亡[1]。用聚肌苷酸-聚胞苷酸(3 ng/mL;24 小时;1205Lu 细胞)处理的黑色素瘤细胞表达 IFN-β。聚肌苷酸-聚胞苷酸钠激活 IFN-β 需要 IPS-1 以及 RIG-I 和 MDA-5,这已通过沉默这两种蛋白得到证实[1]。在黑色素瘤细胞中,用 Poly(I:C) 钠 (5 ng/mL) 处理 24 小时后,检测到了 caspase-9 和 caspase-8 活性亚基的存在 [1]。体外实验表明,卡那霉素 (0.1-100 μg/mL;2 周) 对多种分枝杆菌菌株具有良好的抗菌作用 (MIC=1-5 μg/mL) [3]。
体外实验表明,聚肌苷酸胞苷酸(poly(I:C))是双链RNA的合成类似物,也是TLR3、RIG-I和MDA5的激动剂。这种活性可诱导I型干扰素和促炎细胞因子的产生。卡那霉素是一种口服抗菌药物,它通过与70S核糖体亚基结合抑制RNA转位并导致RNA错配,对结核分枝杆菌和肺炎克雷伯菌均有良好的抗菌活性。
体内研究 (In Vivo)
在注射了1205Lu细胞的NOD/SCID免疫缺陷小鼠中,聚肌苷酸胞苷酸钠(poly(I:C) sodium)可抑制肿瘤的形成。接受聚肌苷酸胞苷酸钠治疗的小鼠体内人类DNA水平降低了50%[1]。卡那霉素(2、4 mg/kg;皮下注射;每日一次,每周六次,持续3周)可抑制小鼠肺和脾脏中牛分枝杆菌的生长[3]。卡那霉素(1.25、5 mg/kg;皮下注射;感染后3小时单次注射)可剂量比例地抑制小鼠肺、气管和血液中肺炎克雷伯菌DT-S的生长,并提高小鼠的存活率[4]。
在体内,聚肌苷酸-胞苷酸钠可用作疫苗佐剂,增强先天性和适应性免疫反应。它也可用作免疫治疗剂,诱导癌细胞凋亡。卡那霉素用于治疗细菌感染,特别是结核病和肺炎。该组合用于研究免疫调节和抗菌疗法。
酶活实验
通常使用TR-FRET或SPR技术,以纯化的TLR3蛋白为底物进行无细胞TLR3结合实验。复合物中的poly(I:C)成分与TLR3结合,从而触发信号级联反应。对于卡那霉素,无细胞结合实验则通过SPR或滤膜结合实验来检测其与细菌70S核糖体亚基或纯化核糖体RNA的结合情况。
细胞实验
将稳定表达人TLR3的HEK293细胞接种于96孔板中。用Poly(I:C):卡那霉素(1:1)(钠)(0.1-100 ug/mL)处理细胞6-24小时。收集上清液,并用ELISA法检测IFN-β、IL-6和TNF-α的水平。对于抗病毒活性检测,在poly(I:C)处理后,用病毒(例如VSV)感染细胞,并通过噬斑试验测定病毒滴度。
动物实验
聚肌苷酸胞苷酸(Poly(I:C):Kanamycin (1:1) (钠盐))可用作小鼠肿瘤模型中的免疫治疗剂。将黑色素瘤细胞(例如B16-F10)皮下植入雌性C57BL/6小鼠体内。当肿瘤体积达到50-100 mm³时,向小鼠瘤内注射该复合物(5-10 μg)。监测肿瘤生长情况。采用流式细胞术分析免疫细胞浸润(CD8+ T细胞)。
药代性质 (ADME/PK)
已知复合物组分聚肌苷酸胞苷酸(Poly(I:C))由于易被血清核酸酶快速降解,其血浆半衰期很短(数分钟)。卡那霉素口服吸收不良,在人体内的半衰期为2-3小时。该复合物设计用于局部或注射给药。钠盐形式可提高稳定性和溶解度。目前尚无1:1复合物的具体药代动力学数据。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
高剂量聚肌苷酸胞苷酸(Poly(I:C))可诱发炎症反应和细胞因子风暴,具有毒性。卡那霉素高剂量或长期使用与肾毒性和耳毒性相关。预计该复合物的安全性与其组分相似。应谨慎使用。应遵循处理RNA和抗生素的标准安全预防措施。
参考文献

[1]. Systemic challenge with the TLR3 agonist poly I:C induces amplified IFNalpha/beta and IL-1beta responses in the diseased brain and exacerbates chronic neurodegeneration. Brain Behav Immun. 2010 Aug;24(6):996-1007.

[2]. Proapoptotic signaling induced by RIG-I and MDA-5 results in type I interferon-independent apoptosis in human melanoma cells. J Clin Invest. 2009 Aug;119(8):2399-411.

[3]. Anticancer function of polyinosinic-polycytidylic acid. Cancer Biol Ther. 2010 Dec 15;10(12):1219-23.

其他信息
聚肌苷酸胞苷酸(Poly(I:C):Kanamycin (1:1) (钠盐))是一种研究级复合物,并非获批药物。它是等比例的聚肌苷酸胞苷酸和卡那霉素复合物。聚肌苷酸胞苷酸是一种合成的双链RNA类似物,也是TLR3和RIG-I/MDA5激动剂,而卡那霉素是一种抗菌剂。该研究工具用于研究免疫反应、抗菌素耐药性和抗病毒疗法。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
相关CAS号
Polyinosinic-polycytidylic acid sodium;42424-50-0
外观&性状
Solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O :~50 mg/mL DMSO :< 1 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们