| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Intermediate for synthesis of FAPI-QS
NH2-UAMC1110 TFA retains the high binding affinity of its parent compound, UAMC1110, for the active site of Fibroblast Activation Protein (FAP). It specifically binds to the FAP active site, blocking its proline-selective serine protease activity, which includes both dipeptidyl peptidase and endopeptidase activities. This inhibits FAP-mediated tissue remodeling processes. UAMC1110 exhibits low nanomolar inhibitory potency with high selectivity against related dipeptidyl peptidases (DPPs) including DPPIV, DPP9, DPPII, and prolyl oligopeptidase (PREP). The NH2 group present on the compound provides a conjugation point for attaching to bifunctional chelators, such as DOTA or DATA5m. This enables the generation of FAPI-QS complexes that can be radiolabeled with diagnostic or therapeutic radioisotopes (e.g., ⁶⁸Ga for PET imaging, ¹⁷⁷Lu for therapy). |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
成纤维细胞活化蛋白 (FAP) 是一种脯氨酸选择性丝氨酸蛋白酶，在肿瘤基质和许多其他以组织重塑为特征的疾病病变中过度表达。2014 年，一种高效的 FAP 抑制剂（称为 UAMC1110）被开发出来，它对 FAP 具有低纳摩尔级的亲和力，并且对相关酶（例如脯氨酰寡肽酶 (PREP) 和二肽基肽酶 (DPP)：DPP4、DPP8/9 和 DPP2）具有高选择性。最近，其他研究团队利用该抑制剂，通过偶联双功能螯合剂-连接剂系统来构建放射性药物。本文报道了以 UAMC1110 为药效团的含方酸 (SA) 的双功能螯合剂 DATA5m 和 DOTA。新型放射性药物 DOTA.SA.FAPi 和 DATA5m.SA.对 FAPi 及其非放射性衍生物分别进行了体外抑制 FAP 和 PREP 的活性表征，并使用镓-68 进行了放射化学研究。此外，还利用 [68Ga]Ga-DOTA.SA.FAPi 进行了初步的概念验证性体内动物实验，并测定了其离体生物分布。
结果：[68Ga]Ga-DOTA.SA.FAPi 和 [68Ga]Ga-DATA5m.SA.FAPi 在 10 分钟内即表现出高络合率（放射化学产率 > 97%），并在 2 小时内保持高稳定性。DOTA.SA.FAPi 和 DATA5m.SA.FAPi 及其 natGa 和 natLu 标记的衍生物对 FAP 的亲和力极佳，IC50 值低至纳摩尔级（0.7-1.4 nM）。此外，所有五种化合物对相关蛋白酶 PREP 的亲和力均较低（IC50 值较高，为 1.7-8.7 μM）。在HT-29人结直肠癌异种移植小鼠模型中，[68Ga]Ga-DOTA.SA.FAPi前体首次进行了体内PET成像动物实验，结果显示其在肿瘤中具有较高的积累（SUVmean为0.75），且背景信号较低，具有良好的应用前景。离体生物分布实验表明，注射后60分钟，肿瘤中的摄取量最高（5.2%ID/g），而健康组织中的摄取量总体较低。 结论：本研究合成并生化研究了靶向成纤维细胞活化蛋白的新型PET放射性示踪剂。这些新型化合物的关键亚结构包括源自方酸基本基序的方酰胺连接单元、DOTA和DATA5m双功能螯合剂以及FAP靶向部分。总之，这些新型FAP配体在进一步的研究和开发以及首次人体应用方面都展现出良好的应用前景。[1] NH2-UAMC1110 TFA 是 UAMC1110 的衍生物，UAMC1110 本身是一种强效的 FAP 抑制剂，其 IC50 值在低纳摩尔范围内（通常为 0.7-1.4 nM）。搜索结果中未详细列出该偶联物在无细胞测定中的具体 IC50 值，但其母体化合物的活性已得到充分表征。当与螯合剂偶联（形成 FAPI-QS 或类似偶联物）时，所得的基于 FAPI 的放射性示踪剂仍保持对 FAP 的高亲和力，IC50 值通常保持在低纳摩尔范围内。例如，同样基于 UAMC1110 骨架的 FAPI-02 和 FAPI-04 已被证明对 FAP 具有极高的亲和力。在利用表达 FAP 的细胞进行的竞争性结合试验中，FAPI 缀合物对 FAP 表现出高度特异性，与结构相关的蛋白酶 PREP 或各种 DPP 没有明显的结合。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
目前尚无NH2-UAMC1110 TFA单独使用的直接体内数据。然而，其衍生的放射性标记FAPI缀合物的体内数据却十分丰富。例如，⁶⁸Ga-DOTA.SA.FAPi（一种衍生物）已在HT-29人结直肠癌异种移植模型中进行了评估。注射后60分钟的PET成像显示肿瘤摄取高且具有特异性。生物分布研究表明，肿瘤摄取最高（60分钟时为5.2%ID/g），非靶器官背景摄取低，从而实现了高对比度成像。这些缀合物通过肾脏途径快速从血液中清除，为成像提供了优异的肿瘤/背景比。目前，研究人员正在探索将这些缀合物与FAP抑制剂联合用于胰腺癌的治疗，并在临床前模型中观察到了协同效应。其治疗效果归因于高剂量辐射能够特异性地输送到表达FAP的肿瘤基质。
|
| 酶活实验 |
无细胞结合实验用于表征源自 NH2-UAMC1110 TFA 的 FAPI 缀合物与 FAP 酶的亲和力。将 96 孔板用重组人 FAP 蛋白（1 ug/mL）包被，4℃ 过夜。然后用 3% BSA 封闭 1 小时。将一系列稀释的（非放射性）FAPI 缀合物（0.001-1000 nM）以三复孔形式加入孔中。室温孵育 1 小时。洗涤后，向每个孔中加入相同缀合物的标记形式（例如，1 nM 的 ⁶⁸Ga-FAPI-04）作为示踪剂。孵育 2 小时后，洗涤孔，并使用 γ 计数器测量结合的放射性。通过非线性回归拟合竞争曲线计算 IC50 值。然后使用 Cheng-Prusoff 方程计算 FAPI 缀合物的 Ki 值。该方法表明其对 FAP 具有高亲和力（低 nM 级 Ki 值）。
|
| 细胞实验 |
典型的基于细胞的实验方案包括使用FAP阳性的癌相关成纤维细胞（CAFs）或基因工程改造的细胞系。在结合和内吞实验中，将5×10⁵个表达FAP的细胞（例如，转染人FAP的HT-1080细胞）接种于24孔板中，并使其贴壁24小时。将细胞与放射性标记的FAPI偶联物（例如，⁶⁸Ga-FAPI-04，1-2 uCi/孔）在有或无过量未标记的FAPI偶联物（10 uM，用于测定非特异性结合）的情况下，于37℃孵育1-4小时。孵育结束后，收集上清液（未结合部分）。用PBS洗涤细胞两次，并将洗涤液与上清液合并。然后用酸性缓冲液（50 mM 甘氨酸，0.1 M NaCl，pH 2.8）在冰上孵育细胞 5-10 分钟，以去除表面结合部分。剩余的内吞部分则用 0.1 M NaOH 裂解细胞收集。使用 γ 计数器测量各组分（未结合、表面结合、内吞）的放射性。特异性结合量计算为总结合量减去非特异性结合量。
|
| 动物实验 |
体内成像方案通常采用小鼠异种移植模型。将5×10⁶个表达FAP的肿瘤细胞（例如HT-29结直肠癌细胞或U87MG胶质母细胞瘤细胞）皮下注射到6-8周龄的雌性无胸腺裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到200-300 mm³时，向小鼠静脉注射约5-10 MBq（0.5-1 nmol）的放射性标记FAPI缀合物（例如⁶⁸Ga-FAPI-04），溶于100-150 μL生理盐水中。在异氟烷麻醉下，分别于注射后15、30、60、90和120分钟进行PET/CT扫描。图像重建后，在肿瘤和主要器官（例如肝脏、肾脏、心脏）上绘制感兴趣区域（ROI），以计算每克组织中注射剂量的百分比（%ID/g）和肿瘤与背景的比值。在阻断研究中，将另一组小鼠与过量（100 μg）的未标记FAPI缀合物共同注射，以确认靶向特异性。在治疗研究中，给予¹⁷⁷Lu标记的缀合物（例如20-40 MBq），并每周两次使用游标卡尺测量监测肿瘤生长情况。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
NH2-UAMC1110 的 TFA 盐形式的分子式为 C23H24F5N5O5，分子量为 545.46。它极易溶于水（250 mg/mL）和 DMSO。该产品应以粉末形式储存于 -20℃，密封防潮，在此条件下可稳定保存长达 3 年。溶液储存时，应在 -80℃ 下保存长达 6 个月，或在 -20℃ 下保存长达 1 个月。TFA 盐形式用于提高化合物在储存期间以及偶联反应前的溶解度和稳定性。对于体内研究，最终的放射性标记 FAPI 偶联物用生理盐水或 PBS 配制，并通过静脉注射给药。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
本产品仅供研究使用，未经批准用于人体。TFA盐形式适用于化学合成和生物化学研究。未标记前体的毒性未详细说明，但预计与母体化合物UAMC1110相似，后者在相关剂量的啮齿动物研究中未显示明显的器官毒性。TFA反离子的潜在毒性存在，但这是此类试剂的正常毒性。处理该化合物时，应遵循标准的实验室安全预防措施，包括佩戴手套、实验服和护目镜。用于PET成像的最终放射性标记FAPI缀合物的给药量极低（纳摩尔级），远低于药理毒性阈值。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
背景：胰腺导管腺癌 (PDAC) 的特征是纤维化间质和免疫细胞浸润不足，部分原因是由癌相关成纤维细胞 (CAFs) 驱动的。CAFs 通过隔离抗肿瘤 CD8 T 细胞、上调免疫检查点配体表达、产生免疫抑制性细胞因子以及极化肿瘤浸润免疫细胞来促进肿瘤免疫逃逸。方法：我们使用 Panc02 细胞在免疫功能正常的 C57BL/6 小鼠中建立了同源胰腺肿瘤模型。从第 7 天到第 20 天，小鼠分别接受成纤维细胞活化蛋白 (FAP) 抑制剂 UAMC-1110 或对照药物治疗。使用小型动物放射治疗平台上的 1 cm 准直器，在第 14、15 和 16 天每天三次对肿瘤进行照射，每次剂量为 10 Gy。测量肿瘤大小并监测小鼠生存情况。分别于第14、23和43天收集同一治疗组的肿瘤组织，用于流式细胞术和多参数免疫荧光分析。结果：UAMC-1110单药治疗对肿瘤生长或生存期无影响。放疗可导致短暂的生长延迟，从而延长生存期。放疗联合UAMC-1110治疗可导致两次不同的生长延迟：第一次是第22天出现的初始生长延迟，其效果显著优于单独放疗；第二次是第43天出现的晚期生长延迟；然而，联合治疗并未比单独放疗带来生存优势。第14天，UAMC-1110治疗减少了肿瘤内髓系细胞的数量。第23天，放疗增加了CD11b阳性肿瘤细胞、髓源性抑制细胞（MDSC）和CD3阳性肿瘤细胞的浸润。联合治疗组小鼠肿瘤中Gr1HI阳性细胞和CD4阳性T细胞（包括调节性T细胞）的数量增加。巨噬细胞的数量随着UAMC-1110、放疗和联合治疗的进行而累积增加。UAMC-1110治疗后CD8/CD11b比值升高，但每100个髓系细胞中仅有3个CD8 T细胞。肿瘤免疫浸润在第43天基本保持稳定。结论：我们利用胰腺导管腺癌（PDAC）小鼠模型，测试了一种新型特异性FAP抑制剂联合放疗的效果。我们发现，FAP抑制剂可以改变肿瘤免疫浸润，并且与放疗联合使用时，可以导致肿瘤生长随时间推移出现两次明显的减缓。肿瘤免疫浸润分析表明，先天性和适应性免疫细胞群均发生了改变。[2]
NH2-UAMC1110 TFA 是合成基于 FAPI（成纤维细胞活化蛋白抑制剂）的显像剂的关键化学结构单元。FAP 在多种上皮癌（包括乳腺癌、肺癌、结直肠癌和胰腺癌）的肿瘤间质中高表达且具有选择性，因此是极具吸引力的诊疗一体化靶点。母体化合物 UAMC1110 是一种高效、选择性的小分子 FAP 抑制剂。NH2-UAMC1110 TFA 衍生物引入了一个伯胺基团，便于与双功能螯合剂（例如 DOTA、DATA5m、NODAGA）偶联。FAPI-QS 是一种特异性螯合剂体系，可实现高剂量放射性示踪剂标记。由此产生的放射性示踪剂（例如⁶⁸Ga-FAPI-04）在临床前模型中显示出肿瘤快速摄取、快速清除和高对比度，目前正在进行多种癌症诊断和治疗的临床试验。NH2-UAMC1110的CAS号为2990021-73-1。 |
| 分子式 |
C23H24F5N5O5
|
|---|---|
| 分子量 |
545.46
|
| 精确质量 |
545.1697
|
| CAS号 |
2990021-73-1
|
| 相关CAS号 |
NH2-UAMC1110;2758337-19-6
|
| PubChem CID |
163197094
|
| 外观&性状 |
Off-white to yellow solid powder
|
| tPSA |
159Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
38
|
| 分子复杂度/Complexity |
781
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
O=C(N1[C@@H](CC(F)(C1)F)C#N)CNC(C2=CC=NC3=C2C=C(OCCCCN)C=C3)=O.O=C(O)C(F)(F)F
|
| InChi Key |
CCMVWHIZASXFHY-UQKRIMTDSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C21H23F2N5O3.C2HF3O2/c22-21(23)10-14(11-25)28(13-21)19(29)12-27-20(30)16-5-7-26-18-4-3-15(9-17(16)18)31-8-2-1-6-24;3-2(4,5)1(6)7/h3-5,7,9,14H,1-2,6,8,10,12-13,24H2,(H,27,30);(H,6,7)/t14-;/m0./s1
|
| 化学名 |
6-(4-aminobutoxy)-N-[2-[(2S)-2-cyano-4,4-difluoropyrrolidin-1-yl]-2-oxoethyl]quinoline-4-carboxamide;2,2,2-trifluoroacetic acid
|
| 别名 |
NH2-UAMC1110 (TFA); NH2-UAMC1110 TFA; 2990021-73-1; S)-6-(4-aminobutoxy)-N-(2-(2-cyano-4,4-difluoropyrrolidin-1-yl)-2-oxoethyl)quinoline-4-carboxamide 2,2,2-trifluoroacetic acid
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~250 mg/mL (~458.33 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8333 mL | 9.1666 mL | 18.3332 mL | |
| 5 mM | 0.3667 mL | 1.8333 mL | 3.6666 mL | |
| 10 mM | 0.1833 mL | 0.9167 mL | 1.8333 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
