| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
The target of NH2-C6-ARC186 sodium is complement component C5, a central protein in the complement cascade. ARC186 functions by binding to C5 and blocking its proteolytic activation by the C5 convertase enzyme complex. By inhibiting the cleavage of C5, it prevents the downstream formation of the potent anaphylatoxin C5a and the membrane attack complex (MAC, C5b-9). C5a is a powerful inflammatory mediator that recruits and activates immune cells, while the MAC is directly responsible for lysing pathogens and cells. Inhibiting C5 is a validated strategy for treating complement-mediated diseases such as paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH). The NH2-C6 linker provides a conjugation handle, allowing the aptamer to be linked to targeting moieties (e.g., antibodies, peptides) for site-specific delivery or to surfaces for biosensing applications.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，ARC186 是一种高效的补体激活抑制剂。利用抗体致敏的绵羊红细胞（EA 细胞）和人血清补体进行的经典途径溶血试验表明，ARC186 能以低纳摩尔浓度抑制溶血。该适体能有效阻止靶细胞表面膜攻击复合物（MAC）的形成，并以浓度依赖的方式阻断过敏毒素 C5a 的生成。适体 5' 端的 NH2-C6 修饰并不影响其与 C5 的结合或其抑制活性，因为该修饰位点通常不参与靶标识别。这使其成为构建保留完整生物活性的偶联物的理想工具。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
搜索结果中未提供该偶联适体的具体体内数据，但已知其母体化合物ARC186具有体内活性。在补体介导疾病模型中，例如大鼠的逆向被动Arthus反应或小鼠的溶血性贫血模型，全身给药ARC186已被证实可显著减轻组织损伤、炎症和溶血。在接受治疗的动物血清中，ARC186表现出剂量依赖性的补体活性抑制作用（通过CH50或溶血试验测定）。与小分子抑制剂不同，适体易受核酸酶降解，但C6连接子等修饰可增强其在血清中的稳定性。NH2-C6连接子可与PEG或其他基团偶联，从而延长其循环半衰期，使其成为一种用途广泛的研究工具。
|
| 酶活实验 |
无细胞溶血试验是测定C5抑制的标准方法。在96孔板中，将抗体致敏的绵羊红细胞（EA细胞，1×10⁸个细胞/mL）溶于明胶巴比妥缓冲液（GVB++）中。试验时，将50 uL EA细胞与50 uL稀释的人血清补体来源（例如，用GVB++稀释1:10）和50 uL系列稀释的NH2-C6-ARC186钠（0.01-1000 nM）混合。将孔板置于37℃下，轻柔摇动孵育30分钟。反应通过冰浴终止，并加入200 uL冰冷的PBS缓冲液。然后将孔板以1500 g离心5分钟。取100 uL上清液转移至新的96孔板中，用分光光度计在541 nm处测定释放的血红蛋白的吸光度。溶血百分比以对照组（水，100%溶血）为基准计算。IC50值通过绘制抑制率与抑制剂浓度对数的关系图确定。
|
| 细胞实验 |
细胞补体激活试验可使用人全血或分离细胞进行。对于 C5a 生成试验，首先将人全血收集于柠檬酸钠抗凝管中。然后，将血液以 1:1 的比例用 PBS 稀释。取 200 uL 稀释后的血液加入 96 孔板的每个孔中。向孔中加入 NH2-C6-ARC186 钠（0.1-1000 nM），并在 37℃ 下孵育 15 分钟。随后，加入激活剂，例如脂多糖 (LPS) 或酵母聚糖（10-100 ug/mL），以触发补体激活。继续在 37℃ 下孵育 30-60 分钟。最后，加入 EDTA（终浓度 10 mM）螯合钙离子，终止补体激活反应。离心收集细胞沉淀。收集上清液，并按照制造商的说明，使用人C5a ELISA试剂盒定量测定C5a的浓度。适体存在下C5a水平的降低表明C5裂解受到抑制。
|
| 动物实验 |
可以使用补体介导损伤的小鼠模型（例如逆向被动阿瑟斯反应）来评估该缀合物的体内疗效。在该模型中，使用6-8周龄的雄性C57BL/6小鼠。在第0天，剃除小鼠背部皮肤毛发。小鼠经静脉注射测试化合物（NH2-C6-ARC186钠，0.1-10 mg/kg）或对照品。15分钟后，将50 μL抗卵清蛋白（抗OVA）抗体溶于50 μL PBS中，皮内注射至小鼠背部皮肤。随后立即经静脉注射2 mg OVA抗原（以形成免疫复合物）。4-6小时后，处死小鼠并取其皮肤。局部炎症反应通过测量皮肤损伤部位的湿重（水肿）和测量皮肤匀浆中髓过氧化物酶（MPO）活性（作为中性粒细胞浸润的指标）进行量化。预计NH2-C6-ARC186组的皮肤水肿和MPO活性将较对照组显著降低。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
NH2-C6-ARC186钠是一种适体（核酸），分子量约为12881.00 g/mol。它以冻干粉末形式提供，应密封保存于-20℃，并防潮，在此条件下可稳定保存长达3年。它在水中的溶解度为100 mg/mL (7.76 mM)，也可溶于PBS缓冲液。它带负电荷，可溶于水溶液。作为一种核酸，它对核酸酶降解敏感；因此，建议使用无核酸酶水，并尽量减少反复冻融。对于体内研究，溶液通常用生理盐水或PBS缓冲液配制。该化合物具有高分子量和负电荷，与小分子相比，这可以降低肾脏滤过率并延长其半衰期，但最终仍会通过肝脏和肾脏清除。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
本产品仅供研究使用，不可用于人体诊断或治疗。目前尚无该修饰适体的具体毒性数据。钠盐形式通常被认为在研究环境中是安全的。然而，与所有核酸一样，应遵循标准的实验室安全预防措施，避免吸入或皮肤接触。补体系统是先天免疫的重要组成部分，全身性抑制C5会增加对某些细菌感染（尤其是脑膜炎奈瑟菌）的易感性。因此，尽管本产品是一种研究工具，但在设计体内实验时应考虑到这些潜在的靶向效应。NH2-C6连接基是一种标准的化学修饰，通常无毒。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ARC186 是一种用于治疗补体相关疾病的适体疗法。其 NH2-C6 修饰提供了一个多功能的偶联位点，可将适体与其他功能分子偶联，例如聚乙二醇 (PEG) 以改善药代动力学，靶向配体以进行细胞特异性递送，或荧光染料以进行成像。这使其成为一个极具价值的模块化研究平台。母体适体 (ARC186) 可特异性结合 C5 并阻断其被转化酶激活。WO2006088888A2 专利描述了使用适体疗法治疗补体相关疾病的方法。
|
| 分子量 |
12881.00
|
|---|---|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~100 mg/mL (~7.76 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.0776 mL | 0.3882 mL | 0.7763 mL | |
| 5 mM | 0.0155 mL | 0.0776 mL | 0.1553 mL | |
| 10 mM | 0.0078 mL | 0.0388 mL | 0.0776 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
