P2Y1 receptor
MRS2179 tetrasodium hydrate targets the P2Y1 purinergic receptor, a G protein-coupled receptor activated by ADP. It acts as a competitive antagonist, binding to the P2Y1 receptor and blocking ADP-induced activation. It is selective for P2Y1 over P2X1, P2X3, P2X2, P2X4, P2Y2, P2Y4, and P2Y6 receptors.

MRS2179可抑制血小板聚集[3]
在加入ADP (1 μM) 前30秒，向洗涤过的人血小板中加入MRS2179 (10 μM)，可抑制血小板聚集和形态改变（图1A）。而MRS2179单独使用即使在高浓度（高达100 μM，数据未显示）下也不会诱导形态改变或聚集。通过在不同浓度MRS2179存在下绘制一系列ADP浓度-效应曲线，确定了抑制作用的性质。MRS2179使浓度-效应曲线向右平行移动，但高浓度ADP可以完全抵消高浓度MRS2179的抑制作用（图1B）。抑制作用的Schild分析结果显示pA2值为6.55±0.05 (n=5)，斜率为0.64，这可能是由于我们观察到的聚集过程是一个整合过程，涉及两个受体（P2Y1和P2cyc）及其信号转导机制的激活。使用洗涤的大鼠血小板也获得了相同的结果，MRS2179抑制ADP诱导的血小板聚集，浓度-反应曲线平行右移，pA2值为6（数据未显示）。MRS2179仅影响P2Y1受体信号转导通路[3]。ADP通过分别激活P2Y1和P2cyc受体，诱导细胞内Ca2+储存的动员和腺苷酸环化酶的抑制。在洗涤后的人血小板中，0.5 μM ADP 诱导的细胞内 Ca2+ 升高可被 3 μM MRS2179 完全抑制，无论是否存在 2 mM 的胞外 Ca2+（图 2A，左图）或不存在（数据未显示）。MRS2179 以剂量依赖的方式调节 1 μM ADP 诱导的 [Ca2+]i 升高，IC50 为 0.26 μM（图 2A，右图）。在洗涤后的大鼠和小鼠血小板中也观察到了类似的 ADP 诱导的 [Ca2+]i 升高抑制（数据未显示）。

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[33P]MRS2179 是一种适合用于评估 P2Y1 位点数量和亲和力的放射性配体 [3]
目前，ADP 与其血小板受体结合的研究采用 [33P]2MeSADP，这是一种可同时与 P2Y1 和 P2cyc 结合的放射性配体（Gachet 等，1995；Hechler 等，1998a；Léon 等，1999b）。另一方面，我们认为 MRS2179 是一种适合用作 P2Y1 特异性放射性配体的候选物。首先，为了验证MRS2179是否仅从P2Y1受体上置换[33P]2MeSADP，我们将其作用与已知的P2Y1受体拮抗剂A3P5P的作用进行了比较（Hechler等人，1998b；Léon等人，1999b）。MRS2179（Ki=111 nM）和A3P5P（Ki=0.25±0.06 μM，数据未显示）均能竞争性地部分置换[33P]2MeSADP与洗涤人血小板的结合位点，置换率约为20%（图3A）。在初步实验中，我们分别在+4°C、+20°C和+37°C三个温度下测试了[33P]MRS2179与洗涤血小板的结合情况。最佳反应条件为20°C，结合率与血小板浓度成正比，在20°C下孵育30秒至1分钟后即可达到最大结合，且至少稳定30分钟（数据未显示）。所有后续饱和实验均使用6×10⁵/ml的血小板浓度，并在20°C下孵育30分钟。[³³P]MRS2179与洗涤后的人血小板的特异性结合具有饱和性（图3B），Scatchard图呈线性关系（插图），每个血小板结合位点数为134±8，亲和力(Kd)为109±18 nM (n=3)。通过测量[³³P]MRS2179与转染P2Y1受体或仅转染空载体的星形细胞瘤细胞(1321 NI)的结合，证实了该结果。在转染了 P2Y1 的细胞中，P2Y1 表现出正常的药理选择性和信号传导特性，每个细胞的结合位点数为 162,500±7500，Kd 为 138±8 nM (n=3)，而对照细胞未显示 [33P]MRS2179 的结合。对小鼠血小板 P2Y1 受体也观察到了类似的亲和力（数据未显示）。

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MRS2179四钠水合物是一种竞争性P2Y1受体拮抗剂，对火鸡P2Y1受体的Kb值为102 nM，pA2值为6.99。它对P2Y1受体具有选择性，对P2X1（IC50 = 1.15 uM）、P2X3（IC50 = 12.9 uM）和其他P2X/Y受体（IC50 > 10 uM）的选择性较低。它能抑制血小板聚集，证实了其对P2Y1介导通路的功能性拮抗作用。

MRS2179四钠水合物（50 mg/kg；腹腔注射）可延长出血时间[3]。
与对照组小鼠相比，MRS2179处理组小鼠在注射MRS2179（50 mg/kg）后30秒，出血时间显著延长（图5C），该指标反映了体内初级止血功能。MRS2179处理组小鼠的平均出血时间（±SD）为595±189秒（范围120-1200秒，n=4），对照组小鼠为83.5±5.7秒（范围68-110秒，n=6），两组间差异具有统计学意义（P<0.01，非配对t检验）。MRS2179处理的大鼠出血时间也延长（数据未显示）。

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MRS2179 在体外抑制血小板聚集 [3]
为了检测 MRS2179 在胞外核苷酸酶存在下的稳定性，我们将其与 0.1 U/ml 的腺苷三磷酸酶 (apyrase) 孵育 2 小时后，测定了可能的降解产物。孵育前（图 4A1）和孵育后（图 4A2）MRS2179 的 HPLC 图谱完全一致。因此，MRS2179 在腺苷三磷酸酶存在下具有化学稳定性。将 MRS2179 在柠檬酸盐处理的富血小板血浆中孵育 2 小时，并未影响其对 ADP 诱导的血小板聚集的抑制活性（数据未显示）。此外，当将 MRS2179 (100 μM) 与洗涤后的血小板孵育 2 小时后，ADP 诱导的聚集仍然受到抑制（图 4B），进一步证实了 MRS2179 的稳定性。随后，将MRS2179静脉注射到麻醉大鼠体内，以研究离体ADP诱导的血小板聚集。注射50 mg/kg后，在不同时间点采集血样，以追踪该化合物的活性。在MRS2179处理的大鼠的柠檬酸盐抗凝血小板富集血浆中，注射MRS2179 5分钟后，ADP浓度高达10 μM时，ADP诱导的血小板聚集受到抑制（图5A、B）。在该剂量（50 mg/kg）下，对30 μM ADP仍存在聚集反应，但与对照组相比有所降低（图5A、B）。

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腺苷酸环化酶活性测定[3]
将450 μl洗涤后的血小板重悬于含2 mM Ca2+和1 mM Mg2+的Tyrode氏缓冲液中，置于血小板聚集仪比色皿中，以1100 rpm的转速搅拌，并每隔30秒加入以下试剂：(i) 10 μM前列腺素E1，(ii) 1 μM AR-C66096MX或不同浓度的MRS-2179，以及(iii) 5 μM ADP或溶剂对照（不含Ca2+或Mg2+的Tyrode氏缓冲液）。1分钟后，加入50 μl冰冷的6.6 N高氯酸终止反应。高氯酸提取物以 11,000×g 离心 5 分钟以去除蛋白质沉淀，并使用三辛胺和氟利昂的混合物（28:22，体积比）从上清液中分离环磷酸腺苷 (cAMP)。将上层水相冻干，并将干燥残余物溶解于用于测定 cAMP 的商业放射免疫测定试剂盒提供的缓冲液中。

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结合研究[3]
按照先前工作中描述的方法（Gachet 等，1995），测定了 [33P]2MeSADP (850 Ci/mmol) 与洗涤血小板在 37°C 下 5 分钟的竞争性结合。在含有0.01%人血清白蛋白（不含脂肪酸）的Tyrode氏缓冲液中，于20°C下，在3 ml聚丙烯管中，以1 ml的最终体积测定[33P]MRS-2179（2000 Ci/mmol）与洗涤的人血小板的结合情况，反应30分钟。通过同位素稀释法测定饱和度。反应通过向反应混合物中加入洗涤的血小板启动，所有实验均重复三次。非特异性结合（通过在1 mM未标记的A3P5P存在下孵育测定）约占总结合的10-15%。在饱和和置换实验中，使用单一浓度的放射性标记配体[33P]MRS2179（0.5 nM，200,000 dpm）或[33P]2MeSADP（0.2 nM，200,000 dpm），并加入递增浓度的相应未标记配体。反应通过加入冰冷的Tyrode氏缓冲液终止，并在真空条件下快速通过Whatman GF/C玻璃纤维滤膜过滤，之后用滤管和滤膜冲洗两次。使用闪烁计数法（Wallac 1409 β计数器，计数率（DPM/CPM±SEM）：1.070±0.0018；芬兰图尔库）测量滤膜上血小板结合的放射性，并使用EBDA-LIGAND程序（Munson和Rodbard，1980）分析数据。使用 GraphPad 软件计算放射性配体的解离常数 (Kd) 和药物的抑制常数 (Ki)。

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标准的体外竞争性结合实验采用表达火鸡P2Y1受体的细胞膜制备物。将膜（10-50 ug蛋白）与固定浓度（1-5 nM）的放射性标记高亲和力激动剂（例如[3H]MRS2365）以及不同浓度（0.1-10,000 nM）的未标记MRS2179在结合缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.4，10 mM MgCl2，1 mM EDTA）中于室温孵育60-90分钟。在100 uM未标记ADP存在下测定非特异性结合。通过快速过滤分离结合的放射性配体，并用液体闪烁计数法测量放射性。根据竞争曲线计算Kb值（102 nM）。

如前所述，我们测定了腺嘌呤核苷酸类似物通过P2Y1受体促进的肌醇磷酸酯生成在火鸡红细胞膜中的活性。每种化合物的K0.5值取自3-8条独立测定的浓度-效应曲线的平均值。简而言之，将1 mL洗涤后的火鸡红细胞置于不含肌醇的培养基中，加入0.5 mCi的2-[3H]肌醇（20 Ci/mmol；美国放射性标记化学品公司，圣路易斯，密苏里州），在37℃、95%空气/5% CO2的湿润环境中孵育18-24小时。按照文献36所述方法，在低渗缓冲液（5 mM磷酸钠，pH 7.4，5 mM MgCl2，1 mM EGTA）中快速裂解制备红细胞膜。在含有424 μM CaCl2、0.91 mM MgSO4、2 mM EGTA、115 mM KCl、5 mM KH2PO4和10 mM Hepes（pH 7.0）的培养基中，测定25 μL [3H]肌醇标记的红细胞膜（约175 μg蛋白，200–500000 cpm/次测定）中的磷脂酶C活性。测定（终体积200 μL）包含1 μM GTPγS和指定浓度的核苷酸类似物。将细胞幽灵在 30 °C 下孵育 5 分钟，然后按照先前描述的方法 [1] 通过阴离子交换色谱法定量总 [3H]肌醇磷酸盐。

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标准的细胞功能检测包括测量表达人P2Y1受体的细胞（例如，稳定表达P2Y1的1321N1星形胶质细胞）中激动剂诱导的钙动员或cAMP抑制。细胞用钙敏感染料（例如，Fluo-4 AM）孵育30-60分钟。然后，细胞与不同浓度的MRS2179（10 nM-100 uM）预孵育10-15分钟，随后用P2Y1激动剂（例如，EC80浓度的ADP或2MeSADP）刺激。使用荧光酶标仪测量细胞内钙离子浓度的增加。拮抗剂的效力以使激动剂反应降低50%所需的浓度（IC50）来评估。

动物/疾病模型： CL57BLr6 小鼠[3]
剂量： 50 mg/kg
给药途径： 小鼠颈静脉注射
实验结果： 经 MRS2179 处理的小鼠在注射 MRS2179 后 30 秒，出血时间（反映体内初级止血）显著延长。

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离体研究[3]
体重 300 g 的雄性 Wistar 大鼠经腹腔注射 200 μl 盐酸赛拉嗪 (0.2 mg/kg) 和氯胺酮 (1 mg/kg) 麻醉。在零时点，将MRS-2179 (50 mg/kg) 或载体注射到阴茎静脉。 5分钟后，从腹主动脉抽取6.3 ml血液至含有0.7 ml 3.15%柠檬酸钠的注射器中，并立即在室温下以1570×g离心70秒。去除柠檬酸盐处理的富血小板血浆（cPRP），并用贫血小板血浆（PPP）将血小板浓度调整至5×10⁵/μl。如上所述，在对照组和MRS-2179处理组大鼠的柠檬酸盐处理的富血小板血浆中测定血小板聚集率。体内研究[3]：向小鼠颈静脉注射MRS-2179（50 mg/kg）或载体后1分钟测量出血时间。CL57BL/6小鼠由Iffa Credo饲养。体重20-30克的雄性小鼠经腹腔注射150微升含0.2%赛拉嗪碱和1%氯胺酮的生理盐水混合液进行麻醉。小鼠尾部距尾尖3毫米处截断，立即浸入37℃的0.9%氯化钠等渗缓冲液中。出血时间定义为止血所需的时间。

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标准的体内实验方案包括在动物模型中测试 MRS2179 的抗血小板聚集作用。将 MRS2179 四钠水合物（例如，0.5-10 mg/kg）通过静脉或腹腔注射给药于小鼠或大鼠。在不同时间点（给药前、给药后 15、30、60 和 120 分钟）采集血样。使用 ADP（1-10 μM）在体外诱导血小板聚集，并通过光透射聚集法或阻抗聚集法进行测量。聚集抑制率以与载体对照组相比的降低百分比计算。

MRS2179四钠水合物是一种核苷酸类似物，可溶于水和水性缓冲液。其分子结构基于腺苷3′,5′-二磷酸，并经2′-脱氧和N6-甲基修饰。四钠水合物盐形式可提高其水溶性。体外研究中，可使用水或磷酸盐缓冲液配制储备液。体内研究中，可将其溶解于生理盐水中进行静脉或腹腔注射。

目前文献中尚无关于MRS2179的具体毒理学数据。作为一种P2Y1受体拮抗剂，其毒性可能与抑制血小板聚集有关，从而增加出血风险。在动物模型中，治疗剂量（例如0.5-10 mg/kg）通常耐受性良好，未见明显不良反应，但尚未发表关于该研究化合物的全面毒理学研究。

[1]. Synthesis, biological activity, and molecular modeling of ribose-modified deoxyadenosine bisphosphate analogues as P2Y(1) receptor ligands. J Med Chem. 2000;43(5):829-842.

[2]. von Kügelgen I. Pharmacological profiles of cloned mammalian P2Y-receptor subtypes. Pharmacol Ther. 2006;110(3):415-432.

[3]. Inhibition of platelet function by administration of MRS2179, a P2Y1 receptor antagonist. Eur J Pharmacol. 2001;412(3):213-221.

我们研究了腺苷-3',5'-二磷酸作为P2Y(1)受体拮抗剂的构效关系，揭示了N(6)-甲基的增强作用以及核糖部分取代的可能性（Nandanan等，J. Med. Chem. 1999, 42, 1625-1638）。我们引入了一个受限的碳环（以探究聚糖环皱缩的作用）、一个与腺嘌呤部分连接的非糖苷键以及磷酸基团转移。通过测定每种类似物刺激火鸡红细胞膜中磷脂酶C的能力（激动剂效应）以及抑制30 nM 2-甲基硫代腺苷-5'-二磷酸诱导的磷脂酶C刺激的能力（拮抗剂效应），表征了其对P2Y(1)受体的生物活性。在某些情况下，引入N(6)-甲基可以将纯激动剂转化为拮抗剂。一种碳环N(6)-甲基-2'-脱氧腺苷二磷酸类似物是一种纯P2Y(1)受体拮抗剂，其效力与核苷类似物(MRS-2179)相当。在一系列环状甲氧碳衍生物中，稠合的环丙烷部分将核苷的假糖苷环限制在假旋转循环中定义的北(N)或南(S)构象，其中6-NH(2)(N)-分析物是一种纯激动剂，EC(50)为155 nM，其效力比相应的(S)-异构体高86倍。 2-氯-N(6)-甲基-(N)-甲氧基碳类似物是一种拮抗剂，IC50值为51.6 nM。因此，核苷环(N)构象在P2Y(1)受体识别中似乎更为占主导地位。环丁基类似物是一种拮抗剂，IC50值为805 nM，而含吗啉环的类似物几乎没有活性。脱水己糖醇环修饰的二磷酸衍生物作为激动剂(6-NH2)或拮抗剂(N(6)-甲基)表现出微摩尔级的效力。强效拮抗剂能量最小化结构的分子模型表明，两个磷酸基团可能占据同一区域。(N)-和(S)-甲氧基碳激动剂类似物与先前报道的P2Y(1)受体模型的假定结合位点进行了分子对接。 [1]

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膜结合的P2受体介导细胞外核苷酸在细胞间信号转导中的作用。P2X受体是配体门控离子通道，而P2Y受体属于G蛋白偶联受体（GPCR）超家族。目前，P2Y家族包含8种人类亚型，这些亚型已被克隆并进行了功能鉴定；在许多脊椎动物中也发现了物种同源物。P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6和P2Y11受体均与磷脂酶C的激活偶联。P2Y11受体还介导腺苷酸环化酶的激活。相反，P2Y12、P2Y13和P2Y14受体的激活会导致腺苷酸环化酶活性的抑制。P2Y1受体广泛表达。该受体参与血小板聚集、血管舒张和神经调节。 P2Y2受体可被ADP及其类似物激活，包括2-甲基硫代ADP（2-MeSADP）。2'-脱氧-N6-甲基腺苷-3',5'-二磷酸（MRS-2179）和2-氯-N6-甲基-(N)-甲氧基碳-2'-脱氧腺苷-3',5'-二磷酸（MRS2279）是强效且选择性的拮抗剂。P2Y2转录本含量丰富。其重要功能之一是控制气道上皮细胞中的氯离子流。P2Y2受体可被UTP和ATP激活，并可被苏拉明阻断。P2Y2激动剂二喹诺酮用于治疗干眼症。P2Y4受体在胎盘和上皮细胞中表达。人P2Y4受体对UTP具有很强的亲和力，而大鼠P2Y4受体对UTP和ATP均表现出相似的激活作用。P2Y4受体不被苏拉明阻断。P2Y6受体广泛分布于心脏、血管和脑等组织中。该受体对UDP具有很强的亲和力，可被1,2-二-(4-异硫氰酸苯基)乙烷（MRS2567）选择性阻断。P2Y11受体可能在免疫细胞分化中发挥作用。人P2Y11受体可被天然存在的激动剂ATP激活，并可被苏拉明和活性蓝2（RB2）阻断。P2Y12受体在血小板聚集和神经元细胞抑制中起着至关重要的作用。P2Y12受体可被ADP激活，尤其是2-甲基硫代ADP能更有效地激活该受体。核苷酸拮抗剂，包括N6-(2-甲基硫代乙基)-2-(3,3,3-三氟丙基硫代)-β,γ-二氯亚甲基-ATP（=卡那瑞洛；AR-C69931MX）、核苷类似物AZD6140以及噻吩并吡啶类化合物氯吡格雷和普拉格雷的活性代谢物，均可阻断该受体。这些P2Y12受体拮抗剂用于药物治疗，以抑制血小板聚集。P2Y13受体表达于免疫细胞和神经元上，也可被ADP和2-甲基硫代ADP激活。2-氯-5-硝基吡哆醛磷酸类似物6-(2'-氯-5'-硝基偶氮苯基)-吡哆醛-α5-磷酸（MRS2211）是一种选择性拮抗剂。编码人P2Y14受体的mRNA存在于多种组织中。然而，该受体的生理功能仍不清楚。UDP-葡萄糖及其类似物作为激动剂发挥作用；其拮抗剂目前尚不清楚。此外，有报道称UDP可作为半胱氨酰白三烯受体的另一种激动剂——提示这些受体具有双重激动剂特异性。[2]

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本研究旨在确定强效P2Y1受体拮抗剂N6-甲基-2'-脱氧腺苷-3',5'-二磷酸（MRS-2179）对体外分离的腺苷-5'-二磷酸（ADP）诱导的血小板聚集和体内出血时间的影响。在洗涤的血小板悬液中，MRS-2179抑制了ADP诱导的血小板形态变化、聚集和Ca2+升高，但对ADP诱导的腺苷酸环化酶抑制没有影响。使用新型放射性配体[33P]MRS-2179进行的结合研究表明，每个洗涤后的人血小板具有134±8个结合位点，亲和力(Kd)为109±18 nM。此外，静脉注射MRS-2179可抑制大鼠对ADP的血小板聚集反应，并延长大鼠或小鼠的出血时间（与对照组相比）。这些结果表明，这种强效的P2Y1受体拮抗剂可能是一种评估靶向P2Y1受体的药物在体内抗血栓治疗中作用的有效工具。[3]

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MRS2179四钠水合物是一种研究级P2Y1受体拮抗剂。它最初由美国国立卫生研究院分子库计划开发，并广泛用作嘌呤能信号通路研究中的参考P2Y1拮抗剂。该化合物尚未获准用于临床。它是研究血小板聚集、血栓形成、血管生物学和神经生物学的重要工具。本产品仅供实验室研究使用。

C11H13N5O9P2NA4.3?H2O

576.21

MRS2179 tetrasodium;1454889-37-2; 101204-49-3

52944044

White to off-white solid powder

210Ų

CNC1=C2C(=NC=N1)N(C=N2)[C@H]3C[C@@H]([C@H](O3)COP(=O)([O-])[O-])OP(=O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+]

XLPQPYQWGFCKEY-IDAKGYGSSA-J

InChI=1S/C11H17N5O9P2.4Na/c1-12-10-9-11(14-4-13-10)16(5-15-9)8-2-6(25-27(20,21)22)7(24-8)3-23-26(17,18)19;;;;/h4-8H,2-3H2,1H3,(H,12,13,14)(H2,17,18,19)(H2,20,21,22);;;;/q;4*+1/p-4/t6-,7+,8-;;;;/m0..../s1

tetrasodium;[(2R,3S,5S)-5-[6-(methylamino)purin-9-yl]-2-(phosphonatooxymethyl)oxolan-3-yl] phosphate hydrate

MRS 2179 tetrasodium salt; 1454889-37-2; MRS2179TetrasodiumSalt; tetrasodium;[(2R,3S,5S)-5-[6-(methylamino)purin-9-yl]-2-(phosphonatooxymethyl)oxolan-3-yl] phosphate; MRS 2179 tetrasodium;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples

注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。

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注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。

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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

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口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。

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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

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注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。