| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 1mg | ||
| 5mg | ||
| 10mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
L-leucine activates the mechanistic target of rapamycin (mTOR) signaling pathway, serving as a critical nutrient sensor for protein synthesis and cell growth regulation.
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| 体外研究 (In Vitro) |
药物化合物中通常包含碳、氢和其他元素的稳定重同位素，主要用作药物研发过程中定量分析的示踪剂。由于氘代可能改变药物的药代动力学和代谢特性，因此备受关注[1]。
亮氨酸在代谢研究中被用作示踪剂，并用于定量分析蛋白质合成。13C标记的亮氨酸能够精确监测碳流经包括三羧酸循环（TCA循环）和蛋白质合成在内的各种途径。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
13C6标记的亮氨酸用于稳定同位素示踪实验，以追踪支链氨基酸的代谢途径。SILAV（体内氨基酸稳定同位素标记）方法可以提供有关活体生物体内蛋白质代谢的信息。
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| 酶活实验 |
用于支链氨基酸代谢的非细胞酶活性测定方法是将纯化的 BCAT1 或 BCAT2 酶与亮氨酸-13C6 作为底物进行孵育。反应混合物包含 50 mM Tris-HCl（pH 7.8）、0.5 mM α-酮戊二酸、1 mM NAD+ 和 5-50 uM 亮氨酸-13C6。在 37℃ 孵育 10-30 分钟后，加入 10% 三氯乙酸终止反应。离心后，取上清液进行丹酰氯衍生化，或直接用 LC-MS/MS 分析，以定量 13C 标记的 α-酮异己酸的生成，并监测与 6 个碳标记模式相对应的质量偏移。
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| 细胞实验 |
为进行代谢通量分析，将细胞在含有浓度为0.4-0.8 mM的亮氨酸-13C6（作为唯一亮氨酸来源）的培养基中培养12-48小时。在指定时间点，用冷PBS洗涤细胞，收集细胞，并用80%甲醇提取代谢物。蒸发后，将样品复溶，并在全扫描模式下通过LC-MS/MS分析，以检测M+6质量偏移。数据处理包括校正天然丰度和计算同位素分布。为进行蛋白质合成研究，用亮氨酸-13C6脉冲处理细胞不同时间，裂解后，经胰蛋白酶消化，并通过质谱法测定蛋白质中的13C富集度。
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| 动物实验 |
在动物示踪研究中，小鼠或大鼠接受静脉推注或持续输注亮氨酸-13C6，剂量通常为10-50 mg/kg。对于SILAV方案，动物接受大剂量13C6-亮氨酸以平衡前体池。在5分钟至24小时的时间点，通过尾静脉采集血样。分离血浆并对氨基酸进行衍生化。采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）或液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定13C-亮氨酸的富集度。采集包括肝脏、肌肉和脑组织在内的组织，液氮速冻，并分析13C掺入游离氨基酸和组织蛋白的情况。利用已建立的动力学模型，根据13C富集数据计算蛋白质合成速率。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种稳定同位素示踪剂，亮氨酸-13C6通常仅以极少量用于代谢研究，无需进行正式的药代动力学评估。母体化合物L-亮氨酸通过氨基酸转运蛋白（LAT1、SLC7A5）从胃肠道迅速吸收。人体血浆亮氨酸浓度范围为100-300 μM。亮氨酸主要在骨骼肌、肝脏和脂肪组织中代谢，首先通过转氨作用生成α-酮异己酸，然后通过支链α-酮酸脱氢酶复合物进行氧化脱羧。其消除半衰期约为1-2小时。亮氨酸不会以原形大量排出体外。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
碳-13标记的亮氨酸不具有放射性，在示踪剂量下被认为对研究用途安全。未标记的亮氨酸作为一种必需氨基酸和膳食补充剂，具有已确立的安全性。啮齿动物急性口服LD50大于5000 mg/kg。当亮氨酸剂量超过生理需求时，可能导致氨积累、高氨血症以及其他氨基酸水平紊乱。碳-13同位素稳定且无毒，除母体化合物外，不会产生其他危害。
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| 参考文献 |
[1]. Russak EM, et al. Impact of Deuterium Substitution on the Pharmacokinetics of Pharmaceuticals. Ann Pharmacother. 2019;53(2):211-216.
[2]. Baoshan Xu, et al. Stimulation of mTORC1 with L-leucine rescues defects associated with Roberts syndrome. PLoS Genet. 2013;9(10):e1003857. [3]. Bruckbauer A, et al. Synergistic effects of leucine and resveratrol on insulin sensitivity and fat metabolism in adipocytes and mice. Nutr Metab (Lond). 2012 Aug 22;9(1):77. [4]. Rachdi L, et al. L-leucine alters pancreatic β-cell differentiation and function via the mTor signaling pathway. Diabetes. 2012 Feb;61(2):409-17. |
| 其他信息 |
亮氨酸-13C6广泛用作代谢通量分析、蛋白质周转研究、肌肉蛋白质合成研究和支链氨基酸（BCAA）代谢研究的稳定同位素示踪剂。它可用作基于质谱定量分析的非放射性内标，并应用于SILAC（细胞培养中氨基酸稳定同位素标记）蛋白质组学和临床示踪研究。该化合物还用于研究mTOR信号通路激活，并在糖尿病、肥胖症和恶病质的研究中具有应用价值。
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| 分子式 |
13C6H13NO2
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| 相关CAS号 |
L-Leucine;61-90-5
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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