| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GPR54[1]; Angiogenesis[1]
The primary target of Kisspeptin-10 is the KISS1 receptor (KISS1R), previously known as GPR54, AXOR12, or hOT7T175. KISS1R is a G protein-coupled receptor belonging to the rhodopsin family, widely distributed in tissues including the hypothalamus, pituitary, placenta, pancreas, testis, liver, and small intestine. Upon KP-10 binding, KISS1R primarily activates the phospholipase C pathway, leading to inositol trisphosphate (IP₃) accumulation and intracellular calcium mobilization, while also activating ERK1/2 and p38 mitogen-activated protein kinase signaling pathways. The receptor is also involved in G protein-coupled receptor signaling, cytoskeleton organization regulation, positive regulation of luteinizing hormone secretion, and MAPK cascade activation. Kisspeptin-10, human TFA targets the kisspeptin receptor (KISS1R/GPR54), a GPCR that plays a central role in the regulation of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis. Binding of the peptide to GPR54 activates Gq/11 signaling, resulting in phospholipase C activation, IP3-mediated calcium release, and stimulation of GnRH secretion. The kisspeptin-GPR54 signaling pathway also suppresses tumor metastasis through its effects on cell adhesion and migration. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
受体GPR54和kisspeptin-10 (KP-10)在控制人类和其他哺乳动物体内促性腺激素释放激素(GnRH)的释放中起着至关重要的作用。GPR54与kisspeptin-10蛋白结合。Kisspeptin-10是乳腺癌细胞的转移抑制因子，激活后可减少人肺黑色素瘤[1]。体外研究表明，Kisspeptin-10显著抑制人脐静脉内皮细胞的迁移、侵袭和管状结构形成，这些过程对血管生成至关重要。在用高糖（模拟妊娠糖尿病）处理的HTR8/SVneo滋养层细胞中，Gpr54表达下调，导致葡萄糖摄取受损和胰岛素抵抗；Kp-10处理可恢复cAMP/PKA信号通路，并通过上调Glut-4、Insr和Irs1的表达来增强葡萄糖摄取。 Kp-10还能抑制滋养层细胞的侵袭和迁移（胚胎着床过程中的关键调控过程），并抑制分离的滋养层细胞的明胶酶活性。在KISS1R转染的CHO细胞中，人Kp-10对Ca²⁺反应激活的EC₅₀值约为1.54-2.6 × 10⁻⁸ M。
在无细胞实验中，Kisspeptin-10 能以高亲和力（Kd 值通常在亚纳摩尔范围内）与膜制备物中纯化的 GPR54 结合。该结合通过放射性配体置换法测定，使用 [125I]-kisspeptin-10，对人 GPR54 的 Ki 值为 0.5-1.5 nM。该肽具有高度选择性；经广泛的 GPCR 筛选证实，在纳摩尔浓度下，它与其他 GPCR 的结合并不显著。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
当静脉输注kisspeptin-10（7.5、35和100 nM）时，LH分泌呈剂量依赖性增加。GnRH拮抗剂西曲瑞克可阻止kisspeptin-10（100 nM）刺激LH产生，从而阻止其对促性腺激素细胞的单一作用[4]。在体内，kisspeptin-10抑制血管生成。通过抑制肿瘤血管生成，Kp-10可抑制移植了人前列腺癌细胞（PC-3）的SCID小鼠的肿瘤生长[5]。
Kisspeptin-10在多种动物模型中均表现出显著的体内活性。静脉注射1 μg/kg Kp-10可在30分钟内使健康男性血清LH水平从4.1 ± 0.4 IU/L升高至12.4 ± 1.7 IU/L；以 1.5 μg/kg/h 的剂量持续输注 22.5 小时，可使 LH 脉冲频率从 0.7 ± 0.1 次/小时增加至 1.0 ± 0.2 次/小时，脉冲分泌量从 3.9 ± 0.4 IU/L 增加至 12.8 ± 2.6 IU/L。在妊娠糖尿病大鼠模型中，Kp-10 治疗（静脉注射，每日一次）可改善空腹血糖水平、胰岛素敏感性和胎儿结局，包括增加胎儿体重和降低胎儿血糖。在移植了人前列腺癌细胞 (PC-3) 的 SCID 小鼠中，Kp-10 通过抑制肿瘤血管生成来抑制肿瘤生长。在鸡绒毛尿囊膜实验和 VEGF 诱导的小鼠角膜微囊实验中，Kp-10 均能显著抑制体内血管生成。 在以表达人GPR54的HEK293细胞进行的细胞实验中，Kisspeptin-10（人TFA，0.1-100 nM）可诱导强烈的钙动员（EC50通常为0.5-2 nM），增加细胞内IP3的积累，并激活ERK1/2 MAP激酶信号通路。在乳腺癌细胞系中，该肽在10-100 nM浓度下可抑制Transwell实验中的细胞迁移和侵袭，并在小鼠模型中抑制肺转移。该肽还能刺激下丘脑神经元分泌GnRH。 |
| 酶活实验 |
用于研究Kisspeptin-10与受体结合的无细胞实验主要采用放射性配体结合试验。典型的实验方案包括：1）制备表达KISS1R的膜悬液（使用天然组织或KISS1R转染细胞）；2）将Kp-10溶解于结合缓冲液（含50 mM HEPES pH 7.4、5 mM MgCl₂、0.1% BSA）中，配制一系列浓度；3）加入放射性标记的Kp-10类似物（例如[¹²⁵I]-Kp-10），并在室温下孵育60分钟；4）通过快速真空过滤终止反应，并用冰冷的缓冲液洗涤滤膜以去除未结合的配体；5）使用γ计数器测量膜结合的放射性；6）根据竞争性结合曲线计算IC₅₀和Kᵢ值。结构活性关系研究表明，Kp-10 在 Asn4 和 Tyr10 残基之间呈现螺旋结构（混合 α- 和 3₁₀-螺旋特征），6 或 10 位丙氨酸取代显著降低了受体亲和力和功能活性。
采用无细胞放射性配体结合试验测定Kisspeptin-10与GPR54的结合亲和力。将表达人GPR54的CHO或HEK293细胞膜与0.1 nM [125I]-kisspeptin-10和浓度递增（0.0001-1000 nM）的未标记Kisspeptin-10和人TFA孵育。室温孵育60-90分钟后，通过预先浸泡在0.3%聚乙烯亚胺中的GF/C滤膜快速过滤分离结合态和游离态示踪剂。计数放射性，并使用非线性回归分析计算Ki值。 |
| 细胞实验 |
Kisspeptin-10 的体外细胞检测方案如下：1）将靶细胞（例如 KISS1R 转染的 CHO 细胞、HTR8/SVneo 滋养层细胞、HUVEC 内皮细胞或原代滋养层细胞）接种于培养板中，并在 37°C、5% CO₂ 的条件下培养至适当密度；2）用不同浓度的 Kp-10（通常为 10⁻¹¹ 至 10⁻⁶ M）处理细胞；3）对于 Ca²⁺ 动员实验，用荧光探针（例如 Fluo-4 AM）标记细胞，并在 Kp-10 刺激后使用荧光显微镜或酶标仪实时监测荧光强度变化；4）对于迁移和侵袭实验，使用 Transwell 小室（孔径 8 μm），将细胞接种于上室，下室加入含 Kp-10 的培养基，孵育后，对穿过膜的细胞进行染色和计数。 5) 对于管状结构形成实验，将 HUVEC 接种在 Matrigel 包被的培养板上，加入 Kp-10，孵育 6-18 小时，并在显微镜下观察和计数管状结构；6) 通过蛋白质印迹法检测相关信号通路蛋白的表达和磷酸化水平。
将稳定表达人GPR54的HEK293细胞接种于96孔板中，并在含有20 mM HEPES（pH 7.4）的HBSS缓冲液中加入钙敏感荧光染料Fluo-4 AM（2 uM），于37℃孵育30-60分钟。使用自动进样器注入不同浓度（0.0001-1000 nM）的Kisspeptin-10和人TFA，并实时测量荧光强度（激发波长485 nm/发射波长525 nm）。使用四参数逻辑方程，根据荧光强度相对于基线的最大变化计算EC50值。 |
| 动物实验 |
Kisspeptin-10 的体内动物试验方案如下：1）选择合适的动物模型：SD 大鼠（妊娠糖尿病模型）、SCID 小鼠（肿瘤异种移植模型）、比格犬（毒理学研究）或雄性猴（生殖研究）；2）分组：将动物随机分为溶剂对照组和多个 Kp-10 剂量组（例如，犬毒理学研究中的 30、100 和 1000 μg/kg）；3）给药途径：静脉注射、皮下注射或脑室内注射；给药体积通常为 2.6 mL/kg，每日一次，连续 14 天；4）样本采集：在给药后多个时间点（例如，5、15、30 分钟）采集血样，并测量 LH 水平作为药效学指标；5）行为学测试：使用旷场试验和新奇环境试验评估焦虑样行为和运动活性； 6) 组织采集：在研究结束时对动物实施安乐死，并采集主要器官（如肝脏、肾脏、脾脏、大脑、胎盘）进行组织病理学检查；7) 数据采集：测量体重、食物消耗量、体温、心电图和呼吸频率。
在乳腺癌转移小鼠模型（例如，尾静脉注射表达荧光素酶的MDA-MB-231乳腺癌细胞）中，小鼠每日腹腔或静脉注射Kisspeptin-10或人TFA（例如，10-100 μg/kg），持续3-4周。通过生物发光成像监测转移负荷。该肽显著减少了肺转移灶的数量和大小。此外，还通过离体肺组织切片评估了肿瘤细胞的迁移。对照组使用乱序的kisspeptin肽。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
Kisspeptin-10 在体内表现出极快的药代动力学特征。体外稳定性研究表明，Kp-10 在大鼠血浆中的分解半衰期在 37°C 时仅为 1.7 分钟，在 25°C 时为 2.9 分钟，在 4°C 时为 6.8 分钟；其主要分解产物为 N 端酪氨酸缺失的 des-Tyr1-Kp-10。静脉推注 1.0 mg/kg Kp-10 后，仅在给药后的最初几分钟内可在大鼠血浆中检测到低浓度（ng/mL）的 Kp-10，30 分钟后即检测不到。在人体中，静脉输注 Kp-10 后的终末半衰期约为 3.8-4.1 分钟。在犬体内皮下注射放射性标记的Kp-10类似物后，给药的放射性剂量可在48-72小时内基本完全回收，主要经广泛代谢后通过尿液排出。由于该肽在体内清除迅速，因此在研究中通常使用LH水平作为Kp-10暴露的替代指标。
Kisspeptin-10，人源三氟乙酸盐（TFA），分子量为1416.46 Da（游离碱），分子式为C63H83N17O14，TFA盐可提高其溶解度和储存稳定性。由于易被蛋白酶快速降解，该肽的血浆半衰期很短（仅数分钟）；为维持疗效，需持续输注或每日频繁注射。该肽可溶于无菌水，浓度最高可达1 mg/mL，应以冻干粉末形式储存于-20℃，避光保存。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Kisspeptin-10 在临床前研究中展现出良好的安全性。在一项为期 14 天的重复给药 GLP 毒理学研究中，比格犬每日一次静脉注射 30、100 和 1000 μg/kg 剂量的 KP-10，持续 14 天，未观察到明显的药物相关毒性症状。在临床症状、体重、食物消耗量、临床病理学、组织病理学、尿液分析、心电图或呼吸频率方面均未观察到显著毒性。1000 μg/kg 剂量被确定为未观察到不良反应剂量 (NOAEL)。该研究还提及一项为期 20 天的大鼠毒代动力学 (TK) 研究，该研究提示 KP-10 可能对幼年动物的骨骼发育具有潜在毒性，因此需要进一步评估 KP-10 在幼年动物中的安全性。在更年轻（4 周龄）的大鼠中，雌性动物的单甲基组胺 (MCH) 水平略有升高。在人体研究中，Kp-10 给药后未报告严重不良事件，常见不良反应主要为轻微的注射部位反应。
在动物实验中，Kisspeptin-10 在典型研究剂量下耐受性良好。在安全数据表 (SDS) 中，Kisspeptin-10 和人源三氟乙酸 (TFA) 被列为非危险物质或混合物。然而，仍应遵循标准的实验室安全预防措施：避免吸入、接触眼睛和皮肤，并仅在通风良好的区域使用。高剂量时，血管收缩作用可能导致血压和心率变化。目前尚未有明显的器官毒性报告。 |
| 参考文献 |
[1]. Kisspeptin-10 (KP-10) stimulates osteoblast differentiation through GPR54-mediated regulation of BMP2 expression and activation. Sci Rep. 2018 Feb 1;8(1):2134.
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| 其他信息 |
Kisspeptin-10（人源TFA）是一种研究用肽，尚未获准用于临床。它来源于KiSS1基因的产物，该基因最初被鉴定为人类黑色素瘤转移抑制因子。该肽可激活GPR54受体，该受体也称为kisspeptin受体。Kisspeptin-10已被研究用于生殖医学（例如，治疗不孕症、低促性腺激素性性腺功能减退症）以及肿瘤学（限制转移）领域的潜在应用。它也是一种强效血管收缩剂。
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| 分子式 |
C63H83N17O14.C2HF3O2
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|---|---|
| 分子量 |
1416.46
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| 精确质量 |
1415.6234041
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| 相关CAS号 |
Kisspeptin-10, human;374675-21-5
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| PubChem CID |
155977641
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| 序列 |
H-Tyr-Asn-Trp-Asn-Ser-Phe-Gly-Leu-Arg-Phe-NH2.TFA
L-tyrosyl-L-asparagyl-L-tryptophyl-L-asparagyl-L-seryl-L-phenylalanyl-glycyl-L-leucyl-L-arginyl-L-phenylalaninamide trifluoroacetic acid |
| 短序列 |
YNWNSFGLRF-NH2
YNWNSFGLRF |
| 外观&性状 |
White to off-white solid at room temperature
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| tPSA |
575 Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
19
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| 氢键受体(HBA)数目 |
21
|
| 可旋转键数目(RBC) |
38
|
| 重原子数目 |
101
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| 分子复杂度/Complexity |
2670
|
| 定义原子立体中心数目 |
9
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| SMILES |
CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC3=CNC4=CC=CC=C43)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CC5=CC=C(C=C5)O)N.C(=O)(C(F)(F)F)O
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| InChi Key |
TYHMUNFOLJTKBC-QDUZOICUSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C63H83N17O14.C2HF3O2/c1-34(2)24-45(58(90)74-43(18-11-23-70-63(68)69)57(89)75-44(54(67)86)26-35-12-5-3-6-13-35)73-53(85)32-72-56(88)46(27-36-14-7-4-8-15-36)77-62(94)50(33-81)80-61(93)49(30-52(66)84)79-59(91)47(28-38-31-71-42-17-10-9-16-40(38)42)78-60(92)48(29-51(65)83)76-55(87)41(64)25-37-19-21-39(82)22-20-37;3-2(4,5)1(6)7/h3-10,12-17,19-22,31,34,41,43-50,71,81-82H,11,18,23-30,32-33,64H2,1-2H3,(H2,65,83)(H2,66,84)(H2,67,86)(H,72,88)(H,73,85)(H,74,90)(H,75,89)(H,76,87)(H,77,94)(H,78,92)(H,79,91)(H,80,93)(H4,68,69,70);(H,6,7)/t41-,43-,44-,45-,46-,47-,48-,49-,50-;/m0./s1
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| 化学名 |
(2S)-N-[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[2-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-amino-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]-2-[[(2S)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]butanediamide;2,2,2-trifluoroacetic acid
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| 别名 |
Kisspeptin-10 human TFA; Kisspeptin-10, human (TFA); orb1296647; KISSPEPTIN-10, HUMAN TFA; ...; Kisspeptin-10, human (TFA)(374675-21-5,FREE);
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~70.60 mM)
H2O :~4 mg/mL (~2.82 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.7060 mL | 3.5299 mL | 7.0599 mL | |
| 5 mM | 0.1412 mL | 0.7060 mL | 1.4120 mL | |
| 10 mM | 0.0706 mL | 0.3530 mL | 0.7060 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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