| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IC50: 60 nM (KDM6B)[2]
JMJD3 (KDM6B) and UTX (KDM6A). GSK-J1 lithium salt is a potent, selective, small-molecule inhibitor of the H3K27me3/me2 demethylases JMJD3 (KDM6B, Jumonji domain-containing protein 3) and UTX (KDM6A, ubiquitously transcribed tetratricopeptide repeat on chromosome X). These enzymes are Jumonji C (JmjC) domain-containing histone demethylases that remove the methyl groups from trimethylated and dimethylated lysine 27 on histone H3 (H3K27me3/me2), which is a repressive epigenetic mark associated with silenced genes. By binding to the active site of these demethylases and chelating the iron (Fe2+) cofactor, GSK-J1 inhibits their demethylase activity. This leads to an increase in H3K27me3 levels and thus enhanced repression of Polycomb target genes and other genes regulated by these demethylases. GSK-J1 is selective for the KDM6 family (KDM6A/B) over other JmjC demethylases (e.g., KDM4, KDM5). It is a valuable chemical probe for studying the role of H3K27 methylation in epigenetic regulation. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
GSK-J1 特异性结合内源性 JMJD3，并对 KDM6 亚家族的 H3K27 去甲基化酶具有选择性。GSK-J1 以 H3K27 依赖的方式抑制人原代巨噬细胞产生 TNF-α 的能力[1]。在 1 mM α-酮戊二酸浓度下，GSK-J1 对 KDM5C 去甲基化酶活性的抑制效力是 KDM5B 的 8.5 倍，IC50 值分别为 11 μM 和 94 μM[3]。
体外实验表明，GSK-J1锂盐是KDM6B (JMJD3)的强效抑制剂，其IC50值为60 nM，该值通过肽底物生化去甲基化酶活性测定和质谱检测法测得。它对KDM6A (UTX)的抑制效力也与之相似（IC50值在低nM范围内）。在细胞实验中，用GSK-J1（0.1-10 uM）处理人或小鼠细胞24-72小时后，细胞内H3K27me3的整体水平呈剂量依赖性升高，该结果通过Western blot（抗H3K27me3抗体）和免疫荧光法测定。这种效应具有H3K27me3选择性；其他组蛋白修饰（H3K4me3、H3K9me3、H3K36me3）未受到显著影响。 GSK-J1还能降低LPS刺激的巨噬细胞中JMJD3靶基因（如炎症细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α）的表达，这一结果通过qPCR和ELISA检测得到证实。在癌细胞系中，GSK-J1（1-10 uM）可抑制细胞增殖、诱导细胞周期阻滞并促进细胞凋亡。在原代小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）中，GSK-J1可通过增强多能性基因的表达来促进其重编程为诱导多能干细胞（iPSC）。MTT实验表明，在大多数细胞系中，浓度高达10 uM的GSK-J1不具有细胞毒性。锂盐比游离酸更易溶于水，这有利于细胞培养研究。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，GSK-J1锂盐已被用于炎症、癌症和其他疾病的小鼠模型中。在脂多糖（LPS）诱导的脓毒性休克小鼠模型中，腹腔注射GSK-J1（10-50 mg/kg）可降低血清中促炎细胞因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）的水平并提高生存率，表明其抗炎作用是通过增加H3K27me3和抑制炎症基因表达实现的。在结肠炎（DSS诱导）小鼠模型中，腹腔注射GSK-J1（10-30 mg/kg）可降低疾病活动指数、减轻结肠炎症和中性粒细胞浸润。在癌症模型中，腹腔注射GSK-J1（30-50 mg/kg，每日或隔日）可抑制胶质母细胞瘤、乳腺癌和卵巢癌异种移植模型中的肿瘤生长。该化合物在剂量高达 50 mg/kg 时通常耐受性良好，未见明显的体重减轻或器官毒性报道。锂盐用于配制生理盐水或 PBS 溶液。由于锂本身具有生物活性（例如，用于治疗双相情感障碍），对照实验应单独使用氯化锂，以排除锂离子的影响。通常，GSK-J1 锂盐中的锂浓度较低（例如，细胞培养中为 0.1-1 mM，体内为 0.01-0.1 mmol/kg），低于治疗用锂浓度，但仍需进行控制。GSK-J1 是一种研究工具，并非获批药物。
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| 酶活实验 |
对于非细胞结合实验，使用合成的 H3K27me3 肽和重组 KDM6B 蛋白的生化去甲基化酶活性测定是标准方法。将 KDM6B (0.1-1 uM) 与 H3K27me3 肽 (1-10 uM) 在反应缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5、50 uM (NH4)2Fe(SO4)2、100 uM α-酮戊二酸、2 mM 抗坏血酸、1 mM DTT）中于 37℃ 孵育 30-60 分钟。将 GSK-J1 锂盐溶解于 DMSO 或水中，并在反应过程中以不同浓度 (0.01-10000 nM) 加入。最后加入 0.5% TFA 终止反应。对样品进行脱盐处理，并使用 MALDI-TOF 质谱分析检测去甲基化产物（H3K27me2 或 H3K27me1）。定量分析三甲基化峰与二甲基化/单甲基化峰的比例。通过拟合剂量反应曲线确定 IC50 值。对于基于荧光的检测方法，可使用甲醛脱氢酶偶联检测或甲醛检测试剂盒（因为去甲基化会产生甲醛）。这种方法不太常用。对于氚释放检测，使用 H3K27me3 肽上的 3H 标记甲基，与酶孵育，并测量释放到上清液中的 3H 量。计算 IC50 值。为了进行选择性分析，使用类似的检测方法测试化合物对其他 KDM 家族成员（KDM4A、KDM5A 等）的选择性。GSK-J1 对 KDM6A/B 具有选择性。对于结合分析（SPR），将KDM6B固定在传感器芯片上，流式加入GSK-J1（0.1-1000 nM），并测定KD值。锂盐可溶于水；如有必要，将pH值调节至7.4。
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| 细胞实验 |
细胞实验中，使用 RAW 264.7 小鼠巨噬细胞或原代骨髓来源巨噬细胞 (BMDM)。将细胞接种于 6 孔板中（5-10 × 10⁵ 个细胞/孔），培养基为含 10% FBS 的 DMEM。用 GSK-J1 锂盐 (0.1-10 uM) 处理细胞 24-72 小时。H3K27me3 的测定方法如下：用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的 RIPA 裂解缓冲液裂解细胞，进行 SDS-PAGE 电泳（每泳道 10-20 ug 蛋白），然后用抗 H3K27me3 抗体 (CST #9733) 和抗 H3（总 H3）抗体（作为上样对照）进行免疫印迹分析。GSK-J1 可提高 H3K27me3 的水平。基因表达分析中，用 GSK-J1 (1-10 uM) 处理细胞 6-24 小时，然后提取 RNA，进行逆转录，并进行 qPCR 检测炎症基因（IL-6、TNF-α、CXCL10）和 H3K27me3 调控基因（例如 HOXA 簇）的表达。LPS 刺激实验中，用 GSK-J1 预处理细胞 2-4 小时，然后加入 LPS (100 ng/mL) 处理 4-6 小时，并通过 ELISA 检测细胞因子 mRNA 和蛋白水平。细胞增殖实验中，将 HeLa 或 U87 细胞接种于 96 孔板（5 × 10^3 个细胞/孔），用 GSK-J1 (0.1-100 uM) 处理 48-72 小时，并通过 MTT 或 CellTiter-Glo 检测细胞活力。IC50 值通常在 1-20 uM 范围内。进行细胞凋亡检测时，将细胞处理48小时，然后用Annexin V-FITC/PI染色，并通过流式细胞术进行分析。所有实验均应设置三个复孔，且至少进行三次独立实验。对照组：DMSO或溶剂（水）。阳性对照：一种已知的EZH2抑制剂（例如GSK126，1 uM），该抑制剂也能通过抑制H3K27me3的甲基化来增加H3K27me3的水平，但其机制与EZH2抑制剂相反。锂盐比游离酸更易溶于水；配制10-50 mM的储备液（溶于水或DMSO），储存于-20℃，并避免反复冻融。用于细胞培养时，用培养基稀释；如果使用DMSO储备液，则最终DMSO浓度≤0.1%。锂离子浓度为0.1-1 mM，对大多数细胞无毒性。设置氯化锂对照（0.1-1 mM）以排除锂的影响。
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| 动物实验 |
体内研究采用雌性或雄性C57BL/6J小鼠（8-12周龄）。对于LPS诱导的脓毒性休克模型，腹腔注射LPS（10-30 mg/kg）以诱导全身炎症。在注射LPS前1小时、同时或注射LPS后1小时，腹腔注射GSK-J1锂盐（10-50 mg/kg）。将GSK-J1溶解于无菌PBS或生理盐水（pH 7.4，必要时用NaOH调节pH）。典型给药体积为10 mL/kg。对照组包括：溶剂（PBS）、氯化锂（LiCl，锂浓度与高剂量GSK-J1相同）以及已知的抗炎药物（例如，地塞米松，5 mg/kg，腹腔注射）。监测48-72小时的存活情况。在LPS注射后2-6小时采集血液样本，采用ELISA法检测细胞因子（IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-10）。对于DSS诱导的结肠炎模型，在饮用水中添加2-3%的DSS，持续5-7天。从第0天开始，每日腹腔注射GSK-J1（20-50 mg/kg）。每日监测小鼠体重、粪便性状和粪便血样。第7天处死小鼠，测量结肠长度，并固定结肠组织进行H&E染色和评分。提取结肠RNA用于炎症基因表达分析。对于癌症模型，将癌细胞（例如U87胶质母细胞瘤、MDA-MB-231乳腺癌细胞）移植到裸鼠体内形成异种移植瘤。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，每日腹腔注射GSK-J1（30-50 mg/kg）治疗小鼠2-4周。用游标卡尺测量肿瘤体积。处死动物后，切除肿瘤，称重，并通过蛋白质印迹法分析H3K27me3水平，并通过免疫组织化学法检测增殖（Ki67）和凋亡（cleaved caspase-3）。对于药效学研究，在末次给药后4-6小时收集组织（脾脏、肿瘤），并通过蛋白质印迹法定量H3K27me3。所有动物实验均需获得IACUC批准。锂盐形式含有锂离子；需设置LiCl对照组以区分GSK-J1和锂的作用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
与游离酸形式相比，GSK-J1锂盐的溶解度有所提高。小鼠腹腔注射（ip）GSK-J1（游离酸或锂盐）后，血浆中GSK-J1的浓度（Tmax）预计在30-60分钟内达到峰值，半衰期（t1/2）为2-6小时。该化合物经肝细胞色素P450酶（可能是CYP3A4）代谢，并经粪便和尿液排出。锂盐中的锂离子含量较低（摩尔比1:1）。50 mg/kg剂量的GSK-J1锂盐（分子量约为400-500）对应的锂剂量约为2-5 mg/kg，低于人类双相情感障碍的治疗剂量（10-20 mg/kg）。然而，它仍可能产生轻微的生物学效应；因此，建议设置氯化锂对照。在药代动力学研究中，向小鼠腹腔注射GSK-J1（10-50 mg/kg），分别于0、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12和24小时采集血液样本，并使用LC-MS/MS（采用氘代内标）定量分析GSK-J1的浓度。本研究不使用TFA盐，而是使用锂盐。目前尚无GSK-J1锂盐的详细药代动力学数据公开。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在临床前毒理学研究中，GSK-J1（以游离酸或锂盐形式）在急性研究中，腹腔注射剂量高达 50 mg/kg 时通常耐受性良好。未报告死亡或严重体重减轻。在较高剂量（100 mg/kg）下，可能会出现轻度镇静和活动减少。在亚慢性研究（每日给药，持续 2 周）中，未观察到明显的器官毒性（肝脏、肾脏、脾脏）。锂盐形式会增加少量锂离子 (Li+)，高剂量时可能导致锂中毒（肾性尿崩症、震颤、体重增加）。然而，在所达到的锂剂量（0.1-0.5 mmol/kg）下，这种情况不太可能发生。尚未进行遗传毒性或致癌性研究。应采取标准的实验室安全防护措施（手套、实验服、护目镜）。该化合物仅供研究使用，未经批准用于人体治疗。 GSK-J1 锂盐是一种表观遗传学研究工具。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
H3K27me3 是一种抑制性组蛋白修饰，由 PRC2 复合物 (EZH2) 沉积，并由去甲基化酶 JMJD3 (KDM6B) 和 UTX (KDM6A) 去除。PRC2 和 KDM6A/B 之间的平衡决定了 H3K27me3 的水平，而 H3K27me3 在发育、分化、炎症和癌症过程中调控基因表达。KDM6 去甲基化酶在多种癌症和炎症性疾病中过度表达，使其成为极具吸引力的药物靶点。葛兰素史克公司发现 GSK-J1 是一种强效且选择性的 KDM6A/B 抑制剂（对 KDM6B 的 IC50 为 60 nM）。其锂盐形式提高了溶解度，更适用于生物学实验。GSK-J1 被广泛用作表观遗传学工具，以提高 H3K27me3 水平，并用于研究 KDM6A/B 在细胞命运决定、癌症、炎症和神经生物学中的作用。它并非获批药物，仅供研究使用。本产品以锂盐形式供应（CAS 2309668-29-7）。
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| 分子式 |
C22H22LIN5O2
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|---|---|
| 分子量 |
395.38
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| 精确质量 |
395.193
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| CAS号 |
2309668-29-7
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| 相关CAS号 |
GSK-J1;1373422-53-7;GSK-J2;1394854-52-4;GSK-J4;1373423-53-0;GSK-J5;1394854-51-3
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| PubChem CID |
78357797
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
94.1
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
524
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
[Li+].C1CN(CCC2=CC=CC=C21)C3=NC(=NC(=C3)NCCC(=O)[O-])C4=CC=CC=N4
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| InChi Key |
WTBLFQHAMMUILY-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H23N5O2.Li/c28-21(29)8-12-24-19-15-20(26-22(25-19)18-7-3-4-11-23-18)27-13-9-16-5-1-2-6-17(16)10-14-27;/h1-7,11,15H,8-10,12-14H2,(H,28,29)(H,24,25,26);/q;+1/p-1
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| 化学名 |
lithium 3-[[2-pyridin-2-yl-6-(1,2,4,5-tetrahydro-3-benzazepin-3-yl)pyrimidin-4-yl]amino]propanoate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5292 mL | 12.6461 mL | 25.2921 mL | |
| 5 mM | 0.5058 mL | 2.5292 mL | 5.0584 mL | |
| 10 mM | 0.2529 mL | 1.2646 mL | 2.5292 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Eicosapentaenoic acid-d10
LD-110 triTFA
Pulrodemstat hydrochloride
EED-IN-4
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