| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) alpha and beta isoforms. The GSK3 Substrate peptide is a substrate for both GSK-3alpha and GSK-3beta, which are serine/threonine protein kinases involved in diverse cellular processes including glycogen metabolism, cell cycle regulation, apoptosis, neuronal development, and insulin signaling. GSK-3 phosphorylates its substrates on specific serine/threonine residues, and the peptide substrate contains a consensus sequence recognized by GSK-3. When incubated with GSK-3 in the presence of ATP, the peptide becomes phosphorylated, and the incorporation of phosphate can be quantified as a measure of kinase activity. This peptide is not a drug but a research reagent for kinase activity measurement.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在体外，GSK3 α、β 亚基底物被用作测定 GSK-3 活性的标准底物。该肽段在含有 ATP 和适宜缓冲液的激酶反应中，被纯化的重组 GSK-3α 或 GSK-3β 磷酸化。磷酸化效率通常与酶浓度和反应时间呈剂量依赖性。该肽段可用于测定 GSK-3 制剂的比活性，比较 GSK-3α 和 GSK-3β 亚型的活性，或评估 GSK-3 抑制剂在酶活性测定中的抑制效力。该肽段的序列 (RAAVPPSPSLSRHSSPHQSEDEEE) 包含多个丝氨酸残基，这些残基是 GSK-3 的磷酸化位点。与许多蛋白质底物不同，该肽段并非用于评估细胞增殖或分化等生物学功能，而仅作为一种酶学工具。
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| 体内研究 (In Vivo) |
不适用（研究试剂，非药物）。GSK3 底物 α、β 亚基肽不作为治疗剂用于动物，也不用于体内疗效研究。它是一种专门用于体外酶活性测定的生化试剂。因此，本产品不提供或不涉及动物模型中的体内活性数据，例如吸收、分布、疗效或毒性。一些研究人员可能会将该肽用作检测组织裂解液中 GSK-3 活性的标准，但不会将该肽本身注射到动物体内。
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| 酶活实验 |
对于使用肽底物的标准 GSK-3 激酶活性测定，反应混合物 (30-50 uL) 包含重组 GSK-3α 或 GSK-3β (0.1-1 ug)、GSK3 底物肽 (50-200 uM)、ATP (50-200 uM) 和 5-10 uCi 的 [γ-33P]ATP（或 [γ-32P]ATP），溶于激酶测定缓冲液 (20 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl2、1 mM DTT、0.1% NP-40)。在 30℃ 孵育 30-60 分钟后，加入 20 uL 0.5% 磷酸终止反应。将混合物点样至 P81 磷酸纤维素滤纸上。滤膜用0.5%磷酸溶液洗涤3次（每次5分钟），干燥后，通过液体闪烁计数法定量测定掺入的放射性。对于非放射性检测，可使用均相时间分辨荧光（HTRF）或AlphaScreen检测，该方法采用生物素标记的肽底物，并用特异性抗体检测磷酸化产物。对于抑制剂研究，在加入ATP和肽底物之前，将化合物（例如氯化锂、SB-216763、CHIR99021）与GSK-3预孵育10分钟。抑制率相对于DMSO对照组计算，IC50值通过非线性回归从剂量-反应曲线确定。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的 GSK-3 活性检测，细胞在激酶裂解缓冲液（20 mM Tris-HCl pH 7.5、150 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM EGTA、1% Triton X-100、1 mM DTT、蛋白酶和磷酸酶抑制剂）中裂解。离心（15,000 × g，15 分钟，4℃）后，收集上清液并定量蛋白质浓度。对于免疫沉淀实验，将 200-500 ug 细胞裂解液与抗 GSK-3 抗体（1-2 ug）和蛋白 A/G 琼脂糖珠在 4℃ 下孵育过夜。琼脂糖珠用裂解缓冲液洗涤两次，再用激酶缓冲液洗涤两次。将免疫沉淀的 GSK-3 与肽底物 (50-100 uM) 和 ATP (50-200 uM) 在激酶缓冲液 (终体积 30 uL) 中于 30℃ 孵育 30 分钟。终止反应，并按非细胞检测方法进行后续处理。或者，也可直接使用细胞裂解液：将 10-50 ug 裂解液蛋白与肽底物和 ATP 在激酶缓冲液中于 30℃ 孵育 30-60 分钟。使用磷酸化特异性抗体通过 ELISA 或质谱法检测肽的磷酸化水平。以蛋白浓度进行标准化。
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| 动物实验 |
不适用。GSK3 底物α、β亚基肽是一种用于体外激酶活性测定的研究试剂，不用于动物实验。因此，目前尚无使用该肽作为治疗剂的体内动物实验方案。该肽可用于离体实验：在用GSK-3抑制剂处理动物或诱导疾病模型后，收集并匀浆组织（例如脑、肝），然后使用该肽底物测定组织裂解液中的GSK-3活性。在此类离体研究中，典型的步骤包括：在裂解缓冲液中匀浆组织，测定蛋白质浓度，然后将20-100 μg裂解液与肽底物（100 μM）和ATP（100 μM）在激酶缓冲液中于30℃孵育30-60分钟，最后通过ELISA、质谱或放射性测定法定量磷酸化肽。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
不适用（研究试剂，非药物）。GSK3 底物 α、β 亚基肽是一种用于酶活性测定中 GSK-3 活性的生化工具，不适用于体内给药。因此，本产品不涉及吸收、分布、代谢、排泄 (ADME)、半衰期、生物利用度或清除率等药代动力学特性。该肽仅用于试管或细胞裂解液中，不得用于活体生物。在细胞裂解液或纯化酶系统中，该肽在测定条件下稳定，并会被 GSK-3 消耗（磷酸化），但这代表的是酶的周转，而非药代动力学。对于研究 GSK-3 抑制剂药代动力学的研究人员，需要使用候选药物进行单独的研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
不适用。GSK3 底物 α、β 亚基肽是一种用于体外试验的研究试剂，不用于动物或人体。因此，目前尚无毒性数据（例如，急性毒性、遗传毒性、器官毒性、致癌性），且这些数据与本产品无关。该肽由天然氨基酸组成，不含毒性化学基团。按照标准实验室安全操作规程处理时，该肽不会造成显著的健康风险。但是，与所有实验室化学品一样，操作时应佩戴适当的个人防护装备（手套、实验服、护目镜）。肽制剂中存在的三氟乙酸 (TFA) 或乙酸根反离子含量较低，通常被认为无毒。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
糖原合成酶激酶-3 (GSK-3) 是一种广泛表达的丝氨酸/苏氨酸激酶，具有α和β两种亚型，在包括Wnt、胰岛素、PI3K/AKT和Hedgehog在内的多种信号通路中发挥关键作用。GSK-3是糖原代谢（磷酸化并抑制糖原合成酶）、细胞周期进程、细胞凋亡、神经元功能和干细胞维持的关键调节因子。GSK-3的失调与2型糖尿病、阿尔茨海默病、双相情感障碍和癌症密切相关。GSK3底物α、β亚基肽是一种合成肽，来源于糖原合成酶蛋白或其他GSK-3底物的磷酸化位点，包含保守基序S/TXXXS/T（其中丝氨酸/苏氨酸残基被磷酸化）。该肽序列为RAAVPPSPSLSRHSSPHQSEDEEE，可作为激酶活性测定中GSK-3活性的标准化工具。它并非药物，仅供研究使用。该肽通常以冻干粉末形式提供，使用前需用水或缓冲液复溶。本产品未获准用于临床或治疗用途。
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| 分子式 |
C108H169N35O42
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|---|---|
| 分子量 |
2629.90
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.3802 mL | 1.9012 mL | 3.8024 mL | |
| 5 mM | 0.0760 mL | 0.3802 mL | 0.7605 mL | |
| 10 mM | 0.0380 mL | 0.1901 mL | 0.3802 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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