| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MMP-2 MMP-9
CTTHWGFTLC, CYCLIC TFA targets matrix metalloproteinase-2 (MMP-2, gelatinase A) and MMP-9 (gelatinase B). These enzymes degrade type IV collagen, a major component of the basement membrane, and are involved in extracellular matrix remodeling, tumor invasion, and metastasis. The cyclic peptide inhibits MMP-9 with an IC₅0 value of approximately 8 microM. The binding stabilizes the enzyme-inhibitor complex, preventing substrate access and subsequent catalytic action. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，CTTHWGFTLC、CYCLIC TFA 可抑制肿瘤细胞和内皮细胞的迁移[1]。
体外实验表明，环状TFA（CTTHWGFTLC）能够抑制内皮细胞和肿瘤细胞的迁移。该环状肽通过阻断MMP-2和MMP-9的活性，降低肿瘤细胞的侵袭能力，从而阻止细胞外基质和基底膜的降解。在浓度约为10-50 uM时，该肽能够抑制Boyden小室实验中的细胞迁移。在此浓度下，该肽不表现出直接的细胞毒性；相反，它能够抑制细胞的侵袭和迁移。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
CTTHWGFTLC、CYCLIC TFA 在小鼠模型中抑制体内肿瘤进展[1]。
在体内，环状肽CTTHWGFTLC（环状TFA）被用于研究模型，以探究MMP-2/9在肿瘤血管生成、侵袭和转移中的作用。该环状肽已被整合到脂质体中，用于靶向肿瘤细胞。肽介导的MMP-2和MMP-9抑制剂靶向治疗已在动物模型中进行了抗血管生成和抗转移作用的研究，但详细的疗效数据有限。与线性肽相比，环状结构提高了稳定性和抗蛋白水解降解能力，使其更适用于体内应用。与磷脂膜的结合使其可用于体外和潜在的体内肿瘤细胞脂质体靶向治疗。 |
| 酶活实验 |
对于体外酶抑制试验（非细胞法），将重组人MMP-2或MMP-9酶（催化结构域）在活化缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.5，10 mM CaCl2，150 mM NaCl，0.05% Brij-35）中，于37℃用1 mM APMA（对氨基苯基乙酸汞）活化1-2小时。活化后，将酶（2-10 nM）与不同浓度的CTTHWGFTLC、CYCLIC TFA（0-100 uM）在测定缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.5，10 mM CaCl2，150 mM NaCl，0.05% Brij-35）中于25℃孵育30分钟。将荧光底物（例如，Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2，可被MMP-2和MMP-9裂解）加入至终浓度为5-10 uM。使用荧光酶标仪在37℃下连续监测反应30-60分钟，激发波长为320-340 nm，发射波长为390-420 nm。通过拟合初始反应速率的抑制率，从剂量-反应曲线计算IC₅0值。据报道，MMP-9的IC₅0值约为8 uM。或者，也可以使用淬灭荧光底物（DQ-明胶），该底物裂解后会产生荧光片段。酶谱分析可用于MMP活性的半定量分析：将细胞培养上清液或组织裂解液在含有明胶（1 mg/mL）的SDS-PAGE凝胶上进行电泳，电泳条件为非还原性。凝胶用2.5% Triton X-100洗涤（以去除SDS），然后在活化缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.5，10 mM CaCl2，150 mM NaCl，0.05% Brij-35）中，加入或不加入CTTHWGFTLC（0-50 uM），于37℃孵育24-48小时，最后用考马斯亮蓝染色。透明带（明胶消化）指示MMP活性；抑制作用通过肽存在下透明带的减少来评估。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的实验，通常使用人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) 或肿瘤细胞系（例如，HT1080 纤维肉瘤细胞，由于 MMP-9 高表达而具有高度侵袭性）。对于迁移/侵袭实验：Transwell 小室（孔径 8 um）用 Matrigel（50 ug/小室）包被，用于侵袭实验。将细胞（1-5×10⁵ 个细胞/小室）重悬于含 CTTHWGFTLC 和环状 TFA（0-100 uM）的无血清培养基中，并置于上室。下室含有含 10% 胎牛血清 (FBS) 的培养基作为趋化因子。细胞在 37℃ 下孵育 16-24 小时。用棉签擦去膜上侧未迁移的细胞。下侧迁移/侵袭的细胞用4%多聚甲醛固定，用0.1%结晶紫或吉姆萨染色，并在显微镜下随机选取5-10个视野进行计数。迁移/侵袭抑制率以载体对照组为基准进行计算。为进行细胞活力对照，将细胞接种于96孔板中，用相同浓度范围的肽处理24-48小时，并使用MTT或CellTiter-Glo法检测细胞活力，以确保观察到的迁移减少并非由细胞毒性引起。其他功能性检测：（1）细胞培养上清液的明胶酶谱分析以评估MMP-2/9活性：将细胞用肽处理24小时，收集条件培养基，必要时进行浓缩，并按上述方法进行明胶酶谱分析； （2）通过蛋白质印迹法检测 MMP-2/9 蛋白表达，以区分活性抑制和表达下调（该肽是活性抑制剂，而不是蛋白质合成抑制剂）。
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| 动物实验 |
在体内动物研究中，通常将环状TFA（CTTHWGFTLC）注射到携带皮下肿瘤异种移植瘤（例如HT1080纤维肉瘤、MDA-MB-231乳腺癌或B16-F10黑色素瘤）的免疫缺陷小鼠体内，以研究其抗转移或抗血管生成作用。静脉给药时，将环状肽（10-50 mg/kg）溶解于无菌PBS（必要时可添加0.1-0.5% DMSO）中，每日或隔日经尾静脉注射，持续2-4周。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积。研究结束时，切除原发肿瘤并称重。对于转移模型（例如，静脉注射肿瘤细胞进行肺部定植），在安乐死后计数肺部转移结节的数量。肿瘤和组织经处理后进行免疫组织化学 (IHC) 检测，使用抗 MMP-2 和抗 MMP-9 抗体，并进行明胶酶谱分析以评估 MMP 活性。其他给药途径包括：肿瘤部位附近的皮下注射或腹腔注射。由于其环状结构和二硫键的存在，CTTHWGFTLC 与线性肽相比具有更高的稳定性，但其体内半衰期仍然有限；为了获得更持久的疗效，该肽可与聚乙二醇 (PEG) 偶联或封装于纳米颗粒/脂质体中。文献中已有关于使用该肽进行脂质体靶向肿瘤细胞的报道。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
CTTHWGFTLC，环状TFA肽的分子量约为1166.33 Da（游离碱；TFA盐会使分子量略有增加）。肽序列：CTTHWGFTLC，Cys1和Cys10之间有二硫键（环状结构）。CAS号：244082-19-7（环状肽游离碱）。该肽以冻干粉末（白色至类白色）形式提供。TFA盐形式可提高水溶性。储存：储存于-20℃或-80℃，避光保存。避免反复冻融。配制储备液时，用无菌DMSO（10-20 mM）或水（如果溶解度允许）溶解。进行细胞实验时，用培养基稀释DMSO储备液；最终DMSO浓度应≤0.5%，以避免细胞毒性。体内给药时，请用PBS或生理盐水（pH 7.4）溶解；可能需要超声处理以达到完全溶解。肽的纯度通常经HPLC测定≥95%。环状结构使其能够抵抗外肽酶的降解，但仍可能易受内肽酶的降解；对于长期体内研究，可考虑使用微型泵或重复给药。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
CTTHWGFTLC，环状TFA，是一种MMP-2和MMP-9环状肽抑制剂，仅供研究使用，不可用于人体诊断或治疗。在典型的研究浓度（10-50 μM）下，该肽被认为无毒；然而，由于非特异性作用，在较高浓度（>100 μM）下可能会出现细胞毒性。MMP-2和MMP-9在正常的生理过程中发挥重要作用（例如，伤口愈合、血管生成），因此长期抑制可能会产生不良影响。应遵循肽类药物处理的标准安全操作规程：佩戴手套、实验服和护目镜；避免吸入粉尘。对于体内研究，应进行标准安全监测（体重、行为、炎症迹象）。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CTTHWGFTLC，环状TFA（也称为CTT环状肽或明胶酶抑制肽）是一种环状肽，可抑制IV型胶原酶MMP-2和MMP-9。主要特点：(1) 通过二硫键（Cys1-Cys10）形成的环状结构赋予其稳定性和抗蛋白酶活性；(2) 对MMP-9的IC₅₀值约为8 μM；(3) 可抑制体外内皮细胞和肿瘤细胞的迁移；(4) 与脂质体或纳米颗粒偶联后，可用于靶向MMP过表达的肿瘤；(5) TFA盐可提高其溶解度。常见应用：抗转移研究、抗血管生成研究、细胞外基质(ECM)重塑、肿瘤侵袭实验以及MMP靶向药物递送系统的开发。该肽已在文献中描述：Koivunen E等人。 Nat Biotechnol. 1999;17(8):768-774，Medina OP 等人 (2001) 进一步表征了其与磷脂膜的结合。该产品尚未获准用于临床。
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| 分子式 |
C54H72F3N13O16S2
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|---|---|
| 分子量 |
1280.35
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| 相关CAS号 |
CTTHWGFTLC, CYCLIC;244082-19-7
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :≥ 50 mg/mL (~39.05 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.7810 mL | 3.9052 mL | 7.8104 mL | |
| 5 mM | 0.1562 mL | 0.7810 mL | 1.5621 mL | |
| 10 mM | 0.0781 mL | 0.3905 mL | 0.7810 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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