| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cathepsin D and E FRET Substrate acetate is a substrate for cathepsin D and cathepsin E, both aspartic proteases. It is not cleaved by cathepsins B, H, or I. Cleavage occurs at the Phe-Phe amide bond within the peptide sequence. This substrate is used as a tool to measure the enzymatic activity of cathepsin D and E in various biological samples.
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| 体外研究 (In Vitro) |
这种FRET底物本身对细胞没有抑制或毒性作用。它可用作探针，用于检测生物体液、细胞裂解液或组织匀浆中的组织蛋白酶D和E活性。当活性组织蛋白酶D或E切割该底物时，荧光团（MOCAc）与淬灭剂[Lys(Dnp)]分离，导致荧光强度呈剂量依赖性增加，且与酶活性成正比。
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| 体内研究 (In Vivo) |
组织蛋白酶D和E FRET底物乙酸盐不用于直接体内给药。它主要是一种用于体外酶活性测定的生化工具。然而，它可用于离体实验，分析从动物模型中采集的组织匀浆或生物体液，以评估与疾病（例如癌症、神经退行性疾病）相关的组织蛋白酶活性变化。
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| 酶活实验 |
对于体外酶活性测定，将FRET底物溶解于测定缓冲液（例如，0.1 M乙酸钠，pH 4.0-5.5，用于组织蛋白酶D/E的最佳活性）中，使其最终浓度为1-10 uM。加入重组或纯化的组织蛋白酶启动反应，并在37℃下连续测量30-60分钟的荧光强度（激发波长328 nm，发射波长393 nm）。抑制实验通过预先将酶与抑制剂孵育来进行。
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| 细胞实验 |
在细胞分析中，细胞在含有0.1% Triton X-100的0.1 M乙酸钠缓冲液（pH 4.0）中裂解，以激活溶酶体组织蛋白酶。裂解液经离心澄清后，与FRET底物（1-10 uM）在37℃下孵育30-120分钟。使用酶标仪测量荧光强度。特异性组织蛋白酶活性通过使用选择性抑制剂（例如，胃蛋白酶抑制剂A用于抑制组织蛋白酶D/E）来测定。
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| 动物实验 |
对于离体分析，将动物模型组织在裂解缓冲液中匀浆。匀浆液经离心后收集上清液。测定蛋白质浓度，并将等量的蛋白质与FRET底物（1-10 μM）在活性缓冲液（pH 4.0）中于37℃孵育60分钟。测量荧光强度，并将活性值标准化至蛋白质浓度。使用胃蛋白酶抑制剂A（1 μM）作为特异性对照。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种生化底物，乙酸盐形式具有很高的水溶性，便于在水性测定缓冲液中使用。由于它不用于体内给药，因此不具有独立的药代动力学特性。对于体外测定，该底物在4℃溶液中短期使用（数小时）稳定，长期使用应以粉末形式储存于-20℃。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
根据标准安全指南，乙酸盐形式被认为可安全用于实验室。该底物不适用于人类或动物食用，应作为潜在危险化学品处理（避免摄入、吸入和皮肤接触）。仅供研究使用。在酶活性测定中使用的低浓度（通常为 1-10 μM）下，预计不会产生明显的毒性。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
组织蛋白酶D和E FRET底物乙酸盐是一种荧光底物，其序列为MOCAc-Gly-Lys-Pro-Ile-Leu-Phe-Phe-Arg-Leu-Lys(Dnp)-D-Arg-NH2。经组织蛋白酶D或E切割后，MOCAc荧光团（激发波长328 nm/发射波长393 nm）与Dnp淬灭剂分离。它是研究这些蛋白酶在癌症、神经退行性疾病和炎症中作用的重要工具。HPLC纯度≥98%。
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| 分子式 |
C87H126N22O21
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| 分子量 |
1816.15
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| 相关CAS号 |
Cathepsin D and E FRET Substrate;839730-93-7
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| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~10 mg/mL (~5.51 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.5506 mL | 2.7531 mL | 5.5062 mL | |
| 5 mM | 0.1101 mL | 0.5506 mL | 1.1012 mL | |
| 10 mM | 0.0551 mL | 0.2753 mL | 0.5506 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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