| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Aryl hydrocarbon receptor (AHR) - binds to AHR and displaces ligands. IC50 (AHR radioligand binding competition assay) = 0.5 nM. [2]
IC50 (HepG2 DRE-luciferase reporter assay with VAF347 agonist) = 91 nM. IC50 with kynurenine = 89 nM; with kynurenic acid = 30 nM; with ITE = 68 nM. Basal activity IC50 = 14 nM. [2] IC50 (Hepa1.6 mouse cell line Cyp1a1 luciferase assay with VAF347) = 36 nM. [2] IC50 (H411E rat cell line Cyp1a1 activity assay with kynurenine) = 151 nM. [2] IC50 (cynomolgus monkey PBMC CYP1B1 qRT-PCR) = 6.2 nM. [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
统计显示，单独使用AHR拮抗剂5时，肿瘤生长抑制作用显着减弱。与单独使用抗 PD-1 相比，AHR 拮抗剂 5（10 mg/kg；口服；每日一次，持续 3 周）与抗 PD-1 的组合可显着降低肿瘤生长抑制作用[1]。
- 在表达AHR依赖性DRE-荧光素酶报告基因的人HepG2细胞中，IK-175抑制AHR激动剂VAF347（80 nM）刺激的荧光素酶表达，IC50为91 nM。对其他AHR激动剂也观察到类似抑制作用：犬尿氨酸（200 μM，IC50 = 89 nM）、犬尿烯酸（200 μM，IC50 = 30 nM）和ITE（20 nM，IC50 = 68 nM）。IK-175还抑制基础AHR活性，IC50为14 nM，且无激动剂活性。[2] - 在使用人源化AHR小鼠肝细胞质的光亲和配体竞争实验中，IK-175从AHR上置换放射性标记的二噁英类似物，IC50为0.5 nM，而工具抑制剂CH-223191的IC50为9.0 nM。[2] - 在小鼠Hepa1.6细胞中，IK-175抑制VAF347（2 μmol/L）刺激的Cyp1a1介导的荧光素酶活性，IC50为36 nM。[2] - 在大鼠H411E细胞中，IK-175抑制犬尿氨酸（100 μmol/L）刺激的Cyp1a1活性，IC50为151 nM。[2] - 在食蟹猴PBMC中，IK-175抑制AHR依赖性CYP1B1基因表达，IC50为6.2 nM。[2] - 在选择性筛选中，IK-175（1 μmol/L）对87种受体、转运蛋白和酶的活性有限。在371种激酶的筛选中（10 μmol/L），仅6种激酶显示>65%的抑制；这些激酶的IC50值约为2至9 μmol/L。IK-175对PXR无激动活性，仅在3 μmol/L以上浓度有轻微抑制活性。[2] - IK-175对100种人癌细胞系以及小鼠CT26和B16-IDO1癌细胞系无直接生长抑制作用。[2] - 在活化的人CD3+/CD28+ T细胞中，IK-175抑制CYP1A1和IL22基因表达，IC50分别为11和30 nM，并抑制IL22细胞因子产生（IC50 = 7 nM），同时增加IL2产生约2倍。[2] - 在人Th17分化实验中，IK-175（3 μM）导致IL17A+IL22-表达细胞增加，IL17A+IL22+表达细胞减少。AHR激动剂ITE（3 μM）显示相反效果。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
- 小鼠药效学研究： 在雌性Balb/c小鼠中，口服给予IK-175（5、10或25 mg/kg）联合AHR激动剂VAG539（30 mg/kg，VAF347的前药）在4和10小时后剂量依赖性地抑制肝脏和脾脏中AHR依赖性的Cyp1a1基因表达。在4小时，5、10和25 mg/kg对肝脏的抑制率分别为78%、93%和98%。在脾脏中，抑制率分别为35%、76%和97%。25 mg/kg剂量在10小时维持>94%的抑制。[2]
- B16-IDO1同基因黑色素瘤模型： 携带B16-IDO1肿瘤的C57BL/6小鼠接受IK-175治疗（25 mg/kg，口服，每日一次）。IK-175单药的肿瘤生长抑制作用中等但无统计学显著性。与抗PD-1抗体联合治疗显著增强了抗肿瘤效果，包括1例完全缓解。未观察到体重下降。[2] - CT26同基因结肠癌模型： 携带CT26肿瘤（内源性高表达IDO1）的Balb/c小鼠接受IK-175治疗（25 mg/kg，口服，每日一次）。IK-175单药显著抑制肿瘤生长（P = 0.0015）。与抗PD-1联合治疗产生了7例完全缓解并延长了生存期。完全缓解的小鼠在再次接种肿瘤后拒绝生长，表明产生了免疫记忆。未观察到体重下降。[2] - 与脂质体多柔比星联合用药： 在CT26荷瘤小鼠中，脂质体多柔比星治疗增加了AHR通路激活（Cyp1b1和Ido1表达）。IK-175（25 mg/kg，口服，每日一次）与脂质体多柔比星（1 mg/kg，静脉注射，每周一次）联合使用相比单用脂质体多柔比星显著抑制了肿瘤生长，出现1例完全缓解并延长了生存期。在MC38同基因结肠癌模型中也观察到类似的联合活性。[2] - 肿瘤免疫微环境变化： 在IK-175治疗（25 mg/kg，口服，每日一次，共7天）的CT26荷瘤小鼠中，肿瘤引流淋巴结分析显示产生IL-2、TNFα和IFNγ的CD8+ T细胞水平升高。CD8+:Treg比率显著增加。肿瘤免疫浸润分析显示促炎性M1巨噬细胞增加，使总体M1:M2比率发生转变。[2] - I期临床试验： 在首次人体研究中，IK-175作为单药和与nivolumab联合，在晚期实体瘤和尿路上皮癌患者中口服给药，剂量范围为200 mg至1,600 mg每日（1,200 mg以上剂量每12小时给药一次）。确定了推荐的2期剂量。通过离体AHR活化实验和血液中CYP1B1表达的剂量依赖性调节（1,200 mg时>85%降低）证实了靶点结合。在单药组中，1/13例尿路上皮癌患者达到确认的部分缓解（ORR 7.7%），持续22.6个月。在联合组中，2/33例患者达到确认的部分缓解（ORR 6.1%），缓解持续时间分别为4.4和7.3个月。在多例患者中观察到临床获益（疾病稳定>16周）。[3] |
| 酶活实验 |
- HepG2 DRE-荧光素酶报告基因实验： 用DRE-Luc报告基因瞬时转染HepG2细胞。加入IK-175稀释液和80 nmol/L VAF347（AHR激动剂），三重复，孵育6小时。移除培养基，加入Bright Glo试剂，在酶标仪上读取发光值。计算IC50值。[2]
- AHR放射性配体结合竞争实验： 从人源化AHR小鼠肝脏制备细胞质。使用光亲和配体（2-叠氮，3-碘125I，7,8-二溴-二苯并-p-二噁英）。将IK-175和CH223191溶液与肝细胞质及光亲和配体一起加入，室温孵育30分钟，冰上放置，然后加入活性炭/葡聚糖。样品离心，暴露于紫外光，进行SDS-PAGE，通过放射自显影可视化。切下放射性条带并在γ计数器中计数。测定IC50值。[2] - 小鼠Hepa1.6和大鼠H411E Cyp1a1荧光素酶报告基因实验： 将H411E或Hepa1.6细胞铺板过夜培养。加入IK-175稀释液和激动剂（H411E用100 μmol/L犬尿氨酸，Hepa1.6用2 μmol/L VAF347），孵育24小时。使用p450-Glo实验测定Cyp1a1酶活性；定量发光值。[2] - 食蟹猴PBMC CYP1B1 Quantigene Plex实验： 将冷冻保存的食蟹猴PBMC在含10% FBS的RPMI培养基中培养。细胞用IK-175（4.5 nmol/L至10 μmol/L）处理，二重复，0.1% DMSO，37°C孵育24小时。裂解细胞并保存直至使用自定义探针组（包括灵长类CYP1B1、AHRR及内参基因PPIB和B2M）进行Quantigene Plex分析。在Luminex FlexMap3D仪器上定量平均荧光活性。[2] |
| 细胞实验 |
- HepG2 DRE-荧光素酶报告基因实验： 用DRE-Luc报告基因瞬时转染HepG2细胞。细胞用IK-175稀释液和80 nmol/L VAF347处理6小时。加入Bright Glo试剂后读取发光值。[2]
- AHR结合实验： 使用人源化AHR小鼠肝脏的细胞质。测试IK-175从AHR上置换放射性标记的光亲和配体的能力。样品进行SDS-PAGE，放射自显影可视化，计数放射性条带。[2] - 人泛T细胞活化实验： 用CD3/CD28 T细胞活化剂活化冷冻保存的泛T细胞，在T细胞培养基中以50,000细胞/孔培养。细胞用DMSO和不同浓度的IK-175处理（二重复）。24小时后，使用Cells-to-CT试剂盒收集cDNA。使用Taqman快速高级预混液和人CYP1A1、IL22及B2M引物进行RT-PCR。48小时后，使用MSD V-plex板分析上清液中的IL22和IL2。[2] - 人Th17分化实验： 通过磁珠分选从冷冻保存的CD4+ T细胞中分离初始人CD4+/CD62L+ T细胞。细胞用CD3/CD28 T细胞活化剂活化和人Th17细胞因子（50 ng/mL IL6、20 ng/mL IL1β、10 ng/mL IL23、1 ng/mL TGFβ、12 μg/mL抗IFNγ抗体、10 μg/mL抗IL4抗体）分化11天。细胞用DMSO、3 μmol/L IK-175或3 μmol/L ITE处理。每2-3天更换一次含细胞因子混合物的培养基。第11天，用细胞刺激混合物刺激细胞5小时，然后对细胞内细胞因子进行染色。样品在BD LSR Fortessa流式细胞仪上运行，用FlowJo软件分析。[2] - 细胞增殖实验： 人癌细胞系（100种）用九个浓度的IK-175（1 nmol/L至10 μmol/L）处理3天。小鼠CT26和B16-IDO1细胞用六个浓度的IK-175（33 nmol/L至10 μmol/L）处理3天。使用CellTiter-Glo测量细胞活力。[2] - 免疫细胞分析的流式细胞术： 从用IK-175治疗的小鼠中收获CT26肿瘤和肿瘤引流淋巴结。用表面和细胞内抗体以及Fixable Live/Dead染色。样品在BD LSR Fortessa流式细胞仪上运行，用FlowJo软件分析。[2] |
| 动物实验 |
- 小鼠PK研究： 雌性Balb/c小鼠静脉注射（5% DMSO、75% PEG400、20%水）或口服（30% PEG400、10% Solutol、60%水）IK-175 3 mg/kg。在时间过程中收集血液，用LC/MS测量血浆浓度。[2]
- 小鼠药效学研究： 雌性Balb/c小鼠口服给予VAG539（30 mg/kg，AHR激动剂前药）联合IK-175（5、10或25 mg/kg，溶于0.5%甲基纤维素）。给药后4和10小时收获肝脏和脾脏。通过qRT-PCR测量Cyp1a1 RNA表达。[2] - B16-IDO1药效研究： 雌性C57BL/6小鼠皮内接种B16-IDO1细胞（2 × 10⁵）。接种后7天，根据肿瘤体积和体重随机分组。IK-175（25 mg/kg，溶于0.5%甲基纤维素）每日一次口服给药。抗PD-1抗体（10 mg/kg）或大鼠IgG每3天腹腔注射一次，共5次。每周测量三次肿瘤。[2] - CT26药效研究： 雌性Balb/c小鼠右侧 flank 皮下接种CT26细胞（5 × 10⁵）。接种后4天，根据肿瘤体积和体重随机分组。IK-175（25 mg/kg，溶于0.5%甲基纤维素）每日一次口服给药。抗PD-1抗体（10 mg/kg）从第4天开始每周两次腹腔注射，共5次。[2] - 脂质体多柔比星联合研究（CT26）： CT26荷瘤小鼠接受脂质体多柔比星（1 mg/kg，静脉注射，每周一次）和/或IK-175（25 mg/kg，口服，每日一次）治疗。治疗在接种后7天开始。每周测量三次肿瘤。[2] - I期临床试验： 这是一项首次人体、开放标签、多中心、剂量递增和扩展研究（NCT04200963）。IK-175在进食状态下口服给药，剂量从200 mg至1,600 mg每日一次（1,200 mg以上剂量每12小时给药一次）。在联合组中，nivolumab 480 mg每4周静脉注射一次。研究共纳入78例晚期实体瘤患者（单药组：n=14；联合组：n=43）。主要终点是安全性、耐受性和推荐2期剂量的确定。次要终点包括药代动力学、药效学和初步抗肿瘤活性。[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
- 小鼠PK： 在Balb/c小鼠中，IK-175（3 mg/kg）的口服生物利用度约为50%，消除半衰期约为7小时。[2]
- 大鼠PK： 在Sprague-Dawley大鼠中，IK-175在24小时内显示出良好的口服暴露量。[2] - 食蟹猴PK： 在食蟹猴中，IK-175在24小时内显示出良好的口服暴露量。[2] - 人体PK（I期）： 在200-1,200 mg范围内单次和多次给药后，IK-175的中位tmax为4至8小时，变异性中等至高（几何CV% >30%）。所有剂量水平的半衰期为4至6小时。Cmax和AUC呈现非线性药代动力学（低于剂量比例），在800 mg开始出现平台期。检测到两种活性代谢物；在稳态下，最高剂量水平时一种代谢物的暴露量接近IK-175。与nivolumab联合给药时，IK-175的暴露量通常低于单独给药时。每日两次给药方案（800 mg BID）的Cmax和AUC与每日一次方案相似。[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
- 在小鼠PD研究中，IK-175剂量高达25 mg/kg时未观察到体重下降。[2]
- 在B16-IDO1和CT26药效研究中，IK-175单药或与抗PD-1或脂质体多柔比星联合用药均未观察到体重下降。[2] - 在I期临床试验中，IK-175耐受性良好。未观察到剂量限制性毒性。未报告以死亡为结局的治疗相关不良事件。免疫相关不良事件不常见（总体9%的患者）且可控。治疗终止的最常见原因是疾病进展（48.7%）和临床进展（29.5%）；仅9%因不良事件终止治疗。[3] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
- IK-175是首个口服AHR抑制剂，可逆转肿瘤微环境中AHR介导的免疫抑制。与靶向上游IDO1/TDO2不同（肿瘤可通过适应性抵抗绕过），AHR抑制可阻断下游汇聚受体，可能提供更广泛的活性。[2][3]
- 在临床前模型中，IK-175治疗增加了CD8+ T细胞浸润和活性，减少了Treg抑制功能，并将髓系细胞向促炎性M1表型转变。[2] - 根据泛癌种AHR表达分析，尿路上皮癌被选为临床开发的主要适应症。膀胱癌中AHR蛋白表达和核定位水平最高。头颈部鳞状细胞癌和非小细胞肺癌也排名较高。[3] - 在I期试验中，1例AHR状态未知的晚期尿路上皮癌患者在接受IK-175单药（1,200 mg）治疗后获得了持续22.6个月的部分缓解，尽管因3级无症状蛋白尿在4周后停止治疗。[3] - 本研究中肿瘤细胞中AHR蛋白的核定位不是临床获益的预测因素，表明可能需要替代的生物标志物策略。[3] - 评估IK-175单药及与nivolumab联合治疗晚期实体瘤和尿路上皮癌患者的I期临床试验（NCT04200963）已完成。[3] |
| 分子式 |
C27H26O2FN7
|
|---|---|
| 分子量 |
499.55
|
| 相关CAS号 |
AHR antagonist 5;2247953-39-3;AHR antagonist 5 free base;2247950-42-9
|
| PubChem CID |
164575839
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| tPSA |
158 Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
10
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
41
|
| 分子复杂度/Complexity |
798
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
CC(C)C1=C2N=C(N=C(N2N=C1)N[C@@H]3CCC4=C(C3)C5=CC=CC=C5N4)C6=CC(=CN=C6)F.C(=C\\C(=O)O)\\C(=O)O
|
| InChi Key |
TVIZDKILPUOLEI-XLOMBBFOSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C25H24FN7.C4H4O4/c1-14(2)20-13-28-33-24(20)31-23(15-9-16(26)12-27-11-15)32-25(33)29-17-7-8-22-19(10-17)18-5-3-4-6-21(18)30-22;5-3(6)1-2-4(7)8/h3-6,9,11-14,17,30H,7-8,10H2,1-2H3,(H,29,31,32);1-2H,(H,5,6)(H,7,8)/b;2-1-/t17-;/m1./s1
|
| 化学名 |
(Z)-but-2-enedioic acid;(3R)-N-[2-(5-fluoro-3-pyridinyl)-8-propan-2-ylpyrazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-yl]-2,3,4,9-tetrahydro-1H-carbazol-3-amine
|
| 别名 |
AHR antagonist 5 hemimaleate; IK-175 hemimaleate; IK175 hemimaleate; SCHEMBL30252347
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0018 mL | 10.0090 mL | 20.0180 mL | |
| 5 mM | 0.4004 mL | 2.0018 mL | 4.0036 mL | |
| 10 mM | 0.2002 mL | 1.0009 mL | 2.0018 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AHR agonist 10
AhR modulator-2
PY109
Picoberin
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463611831
