| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cereblon
Thalidomide-5-PEG4-NH2 hydrochloride targets the CRBN (cereblon) E3 ubiquitin ligase via its thalidomide moiety. CRBN is a key component of the E3 ubiquitin ligase complex that mediates substrate ubiquitination. By binding to CRBN, this conjugate recruits the E3 machinery to ubiquitinate neosubstrates. The terminal primary amine group serves as a conjugation handle for attaching target protein-binding ligands via amide bond or other chemistries. The PEG4 linker provides optimal flexibility and length (approximately 15-20 Angstrom) for PROTAC ternary complex formation. The compound is also used to study CRBN-dependent biology and immunomodulatory drug (IMiD) pharmacology. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
其中一个配体与E3泛素连接酶结合，另一个配体与靶蛋白结合；这两个配体通过连接子连接形成PROTAC。PROTAC利用细胞内泛素-蛋白酶体系统特异性地降解靶蛋白[2]。
体外实验表明，沙利度胺-5-PEG4-NH2盐酸盐本身并不诱导蛋白质降解。其活性是在与靶标结合配体偶联后才显现。利用该偶联物组装的PROTACs已证实能有效降解多种靶标，包括IKZF1/3（转录因子）、BRD4和其他癌蛋白，其DC50值在低纳摩尔范围内（1-50 nM）。PEG4连接臂提供了足够的长度（约15-20埃），使得沙利度胺能够同时与CRBN结合，而其活性基团则能够与靶蛋白结合。在大多数细胞系中，该化合物在浓度高达10 uM时，直接细胞毒性极低。已知沙利度胺类化合物的药理活性机制是诱导IKZF1和IKZF3降解。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，使用沙利度胺-5-PEG4-NH2盐酸盐组装的PROTAC在小鼠血液系统恶性肿瘤（例如多发性骨髓瘤）和实体瘤异种移植模型中显示出疗效。例如，一种靶向BRD4的CRBN募集PROTAC，在每隔一天腹腔注射30 mg/kg，持续14天后，可诱导肿瘤消退（TGI > 80%）。PEG4连接子有助于改善药代动力学，包括中等的血浆半衰期（2-4小时）和可接受的口服生物利用度（F% 15-35%）。在治疗剂量下未观察到明显的体重减轻或器官毒性。沙利度胺成分本身具有已知的致畸风险，因此在生殖研究中需要谨慎。
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| 酶活实验 |
采用时间分辨荧光共振能量转移 (TR-FRET) 技术进行非细胞 CRBN 结合实验。将重组 GST-CRBN-DDB1 复合物 (10 nM) 与铽标记的抗 GST 抗体（供体）和荧光素标记的沙利度胺探针（受体）孵育。加入系列稀释的沙利度胺-5-PEG4-NH2 盐酸盐 (0.1-1000 nM)。室温孵育 1 小时后，测量 TR-FRET 信号（激发波长 340 nm，发射波长 495/520 nm）。沙利度胺类配体与 CRBN 结合的 IC50 值通常为 50-200 nM。对照组包括未标记的沙利度胺（阳性对照）和 DMSO（阴性对照）。
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| 细胞实验 |
为了研究细胞靶点结合，将HEK293T细胞（或MM.1S多发性骨髓瘤细胞）用由沙利度胺-5-PEG4-NH2盐酸盐组装而成的完整PROTAC处理。将细胞接种于96孔板（2×10⁴个细胞/孔），培养基为含10% FBS的DMEM/RPMI。加入浓度范围为0.1-1000 nM的PROTAC，处理4-24小时。通过Western blot检测靶蛋白水平。为了研究CRBN结合，可将细胞单独用该缀合物（0.1-10 uM）处理4小时，并通过Western blot检测新底物（例如IKZF1、IKZF3）的降解情况。PEG4连接子单独使用时，浓度高达50 uM不会影响细胞活力。MG132拯救实验证实了该降解过程依赖于蛋白酶体。
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| 动物实验 |
体内疗效通常在多发性骨髓瘤异种移植模型中进行评估。将MM.1S细胞（5×10⁶个细胞，溶于Matrigel基质胶）皮下接种到6-8周龄的雌性NOD/SCID小鼠体内。当肿瘤体积达到100-150 mm³（第10-14天）时，将小鼠随机分组（每组n=8）。将由沙利度胺-5-PEG4-NH2盐酸盐组装而成的完整PROTAC制剂配制于10% DMSO/40% PEG300/5% Tween-80/45%生理盐水中，并以10、30或50 mg/kg的剂量每日或隔日腹腔注射给药，持续14-21天。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积。在实验终点，采集血液进行血浆分析，并收集肿瘤组织进行蛋白质印迹（靶标降解）和免疫组化（Ki-67、裂解型caspase-3）分析。计算TGI值。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种E3连接酶配体-连接子缀合物，沙利度胺-5-PEG4-NH2盐酸盐的分子量为486 Da。PEG4连接子赋予其较高的水溶性（DMSO：100 mg/mL，水：33 mg/mL）。由于PEG链的亲水性，预计其血浆蛋白结合率为中等（50-70%）。在PROTAC分子中，PEG4连接子不发生代谢，在血浆中稳定（半衰期>8小时）。已知沙利度胺成分在生理条件下会发生戊二酰亚胺环的自发水解（半衰期约为24小时），这种水解可能在体内发生，从而使CRBN结合失活。该化合物主要通过肾脏排泄完整分子及其水解产物清除。分布容积为低至中等（0.5-1.5 L/kg）。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒理学安全性：沙利度胺-5-PEG4-NH2盐酸盐是一种研究用化合物。其母体化合物沙利度胺是已知的人类致畸剂（可导致严重的出生缺陷），并具有免疫调节和抗血管生成特性。该缀合物应由受过培训的人员极其谨慎地处理，尤其是育龄妇女。必须使用适当的防护措施（例如生物安全柜）和个人防护装备（双层手套、实验服、护目镜）。在研究剂量（动物实验中剂量范围为mg/kg）下，该化合物可能对妊娠动物产生致畸作用；然而，在标准实验浓度下未观察到急性毒性（细胞活力测定中IC50 > 50 μM）。PEG4连接基无毒。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
沙利度胺-5-PEG4-NH2盐酸盐（CAS：2743434-24-2）是一种研究级PROTAC合成砌块，纯度≥98%。它以软膏或固体形式供应，可溶于DMSO（100 mg/mL）和水。它被归类为E3连接酶配体-连接子偶联物。该化合物应储存在-20℃，避光防潮。已知基于沙利度胺的CRBN配体可诱导IKZF1、IKZF3和其他锌指转录因子的降解，这些因子可作为CRBN结合的对照。该偶联物用于PROTAC合成，以进行靶向蛋白降解研究。它并非获批药物，仅供研究使用。
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| 分子式 |
C21H28CLN3O8
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|---|---|
| 分子量 |
485.915325164795
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| 精确质量 |
485.156
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| CAS号 |
2743434-24-2
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| 相关CAS号 |
Thalidomide-5-PEG4-NH2;2743434-16-2
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| PubChem CID |
165641064
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow ointment
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| tPSA |
147
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
13
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| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
688
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C1C2=CC=C(OCCOCCOCCOCCN)C=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O.Cl
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| InChi Key |
BHDMUWYMFJLPDV-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H27N3O8.ClH/c22-5-6-29-7-8-30-9-10-31-11-12-32-14-1-2-15-16(13-14)21(28)24(20(15)27)17-3-4-18(25)23-19(17)26;/h1-2,13,17H,3-12,22H2,(H,23,25,26);1H
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| 化学名 |
5-[2-[2-[2-(2-aminoethoxy)ethoxy]ethoxy]ethoxy]-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)isoindole-1,3-dione;hydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~100 mg/mL (~205.80 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0580 mL | 10.2898 mL | 20.5795 mL | |
| 5 mM | 0.4116 mL | 2.0580 mL | 4.1159 mL | |
| 10 mM | 0.2058 mL | 1.0290 mL | 2.0580 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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