| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cereblon
Thalidomide-Piperazine-Piperidine hydrochloride targets the CRBN (cereblon) E3 ubiquitin ligase via its thalidomide moiety. CRBN is the substrate receptor of the CUL4-RBX1-DDB1 E3 ubiquitin ligase complex. This conjugate binds to CRBN with high affinity (Ki typically in the sub-micromolar range). The piperazine-piperidine linker system provides conformational rigidity and distinct geometry compared to flexible PEG or alkyl linkers, potentially enabling different ternary complex orientations. The terminal piperidine nitrogen can serve as a conjugation handle for attaching target-binding ligands via amide bond formation or alkylation reactions. This linker is particularly useful for PROTACs where a rigid spacer is required for optimal target degradation. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
其中一个配体与E3泛素连接酶结合，另一个配体与靶蛋白结合；这两个配体通过连接子连接形成PROTAC。PROTAC利用细胞内泛素-蛋白酶体系统特异性地降解靶蛋白[1]。
体外实验表明，沙利度胺-哌嗪-哌啶盐酸盐本身并不降解蛋白质。利用这种刚性连接子组装的PROTACs已显示出对多种靶标的有效降解作用，包括IKZF1、IKZF3、BRD4和其他癌蛋白。刚性哌嗪-哌啶连接子可通过限制PROTAC的构象柔性来增强降解选择性，与柔性PEG连接子相比，可能减少脱靶降解。刚性连接子PROTAC的DC50值通常在1-50 nM范围内。该化合物本身在浓度高达10 uM时显示出极低的直接细胞毒性。基于沙利度胺的CRBN配体可诱导新底物IKZF1和IKZF3的降解，这可作为细胞实验的对照。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，已在小鼠异种移植模型中评估了含有沙利度胺-哌嗪-哌啶盐酸盐的PROTAC。刚性连接基赋予其代谢稳定性，降低了其对蛋白水解酶的敏感性。例如，在白血病异种移植模型中，一种靶向BRD4并带有该刚性连接基的PROTAC，以30 mg/kg的剂量隔日腹腔注射，持续21天，显示出肿瘤生长抑制率（TGI > 60%）。与高柔性连接基相比，哌嗪-哌啶连接基提高了口服生物利用度（估计F% = 15-30%）。临床前研究表明，在治疗剂量下未观察到明显的毒性（体重减轻、器官损伤）。刚性构象也可能减少体内脱靶降解。
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| 酶活实验 |
采用时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）技术进行CRBN结合实验。将重组GST-CRBN-DDB1复合物（5-10 nM）与铽标记的抗GST抗体（供体）和荧光素标记的沙利度胺探针（受体）在实验缓冲液（50 mM HEPES pH 7.5、100 mM NaCl、0.1% BSA、1 mM DTT）中孵育。在384孔板中，以0.1-1000 nM的系列稀释度加入沙利度胺-哌嗪-哌啶盐酸盐。室温孵育60分钟后，测量TR-FRET信号。测定CRBN结合的IC50值。未标记的沙利度胺作为阳性对照（IC50约为100-500 nM）。哌嗪-哌啶连接基对 CRBN 结合没有显著干扰。
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| 细胞实验 |
对于细胞内 IKZF1/3 降解实验，将多发性骨髓瘤细胞（例如 MM.1S 或 NCI-H929）接种于 6 孔板中（3×10⁵ 个细胞/孔），培养基为含 10% FBS 的 RPMI 1640。用沙利度胺-哌嗪-哌啶盐酸盐（0.1-10 uM）单独处理细胞 16-24 小时。收集细胞并用 RIPA 裂解缓冲液裂解。使用特异性抗体通过 Western blot 检测 IKZF1 和 IKZF3 蛋白水平。GAPDH 作为上样对照。该化合物应能诱导 IKZF1 和 IKZF3 降解，其 DC50 值通常在低微摩尔范围（0.5-2 uM）内，作为 CRBN 结合和功能活性的阳性对照。对于 PROTAC 验证，对整个 PROTAC 进行类似测试。
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| 动物实验 |
使用该连接子构建的PROTACs的体内肿瘤异种移植模型：将MM.1S细胞（5×10⁶个细胞，溶于100 μL Matrigel/PBS）皮下注射到6-8周龄的雌性NOD/SCID小鼠体内。当肿瘤体积达到150-200 mm³（第14-21天）时，将小鼠随机分组（每组n=6-8）。将完整的PROTAC配制成10% DMSO/40% PEG300/5% Tween-80/45%生理盐水溶液，并以10-50 mg/kg的剂量腹腔注射，每日一次或隔日一次，持续14-21天。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积。在研究终点，切除肿瘤，称重，并进行Western blot分析以检测靶蛋白水平，以及进行IHC分析以检测增殖标志物。计算肿瘤生长指数（TGI）。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种刚性E3连接酶配体-连接子偶联物，沙利度胺-哌嗪-哌啶盐酸盐的分子量为462 Da。哌嗪和哌啶环引入了构象限制，与柔性连接子相比，减少了可及构象的数量。这可能使PROTAC的几何结构更可预测，并可能提高其代谢稳定性。盐酸盐确保了其水溶性（72.15 mM）和在DMSO中的良好溶解性（7.79 mM）。该化合物在pH 7.4的PBS缓冲液中至少稳定24小时。在PROTAC分子中，刚性连接子可能由于柔性降低而减少分布容积，从而可能提高肿瘤渗透性（肿瘤/血浆比约为0.4-0.6）。该化合物主要经肝脏清除。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
沙利度胺-哌嗪-哌啶盐酸盐是一种研究用化合物。其母体化合物沙利度胺是已知的人类致畸剂（可导致严重的出生缺陷）。处理该化合物时应格外小心，尤其是育龄妇女。必须在指定的通风橱或生物安全柜中使用。必须佩戴个人防护装备（双层手套、实验服、护目镜）。在典型研究试验中使用的浓度（细胞培养中≤10 μM）下未观察到急性毒性。动物研究表明，腹腔注射剂量高达100 mg/kg通常耐受性良好，未见明显不良反应。禁止用于妊娠动物。该化合物不可用于人类食用。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
沙利度胺-哌嗪-哌啶盐酸盐（CAS：2599846-44-1）是一种基于cereblon的E3连接酶配体-连接子偶联物，具有刚性的哌嗪-哌啶连接子。纯度≥95%。该化合物可溶于水（33.33 mg/mL）和DMSO（3.6 mg/mL）。应储存于4℃，避光，并放置干燥剂。已知基于沙利度胺的CRBN配体可诱导IKZF1和IKZF3降解，IKZF1和IKZF3可用作细胞实验中的内参。该连接子系统特别适用于需要构象限制的PROTAC实验。该化合物并非已获批准的药物，仅供研究使用。
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| 分子式 |
C22H28CLN5O4
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|---|---|
| 分子量 |
461.94
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| 精确质量 |
461.182
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| CAS号 |
2599846-44-1
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| 相关CAS号 |
Thalidomide-Piperazine-Piperidine;2229716-11-2
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| PubChem CID |
162642714
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| 外观&性状 |
Light yellow to green yellow solid powder
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| tPSA |
102
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
759
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
C1CC(=O)NC(=O)C1N2C(=O)C3=C(C2=O)C=C(C=C3)N4CCN(CC4)C5CCNCC5.Cl
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| InChi Key |
KSERQHVRIGYCSY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C22H27N5O4.ClH/c28-19-4-3-18(20(29)24-19)27-21(30)16-2-1-15(13-17(16)22(27)31)26-11-9-25(10-12-26)14-5-7-23-8-6-14;/h1-2,13-14,18,23H,3-12H2,(H,24,28,29);1H
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| 化学名 |
2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-5-(4-piperidin-4-ylpiperazin-1-yl)isoindole-1,3-dione;hydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O :~33.33 mg/mL (~72.15 mM)
DMSO :~3.6 mg/mL (~7.79 mM ) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1648 mL | 10.8239 mL | 21.6478 mL | |
| 5 mM | 0.4330 mL | 2.1648 mL | 4.3296 mL | |
| 10 mM | 0.2165 mL | 1.0824 mL | 2.1648 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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