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Collagenase, Type I

目录号: V83271 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
胶原酶，I型是一种微生物衍生的基质金属蛋白酶（MMPs）和锌肽酶。
Collagenase, Type I CAS号: 9001-12-1
产品类别: MMP
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
100mg
250mg
500mg
1g
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产品描述
I型胶原酶（EC 3.4.24.3）是微生物来源的基质金属蛋白酶（MMPs）和锌肽酶之一。它可以分解I、3、7、8、10型胶原蛋白、明胶、蛋白聚糖和聚集蛋白聚糖。
I型胶原酶（CAS 9001-12-1）是一种源自溶组织梭菌的蛋白水解酶，能够破坏胶原蛋白的肽键。它是负责胶原蛋白降解的七种胶原酶之一。I型胶原酶是一种胶原蛋白特异性酶，是结缔组织正常降解所必需的，并用于组织消化和解离。
生物活性&实验参考方法
靶点
Collagenase Type I targets collagen, the major fibrous component of animal extracellular connective tissue. It is a member of the matrix metalloproteinase (MMP) family and a zinc peptidase. The enzyme specifically cleaves the peptide bonds in collagen, breaking down the triple-helix structure of native collagen.
体外研究 (In Vitro)
I型胶原酶可用于制备上皮细胞、肝脏、肺脏、脂肪和肾上腺组织细胞。
储备液的制备
1. 将1 mL HBSS（含Ca2+和Mg2+的Hank平衡盐溶液）加入100 mg胶原酶中，摇匀至完全溶解，配制成100 mg/mL（即100倍浓缩）的储备液；
2. 使用低蛋白吸附的0.22 μM滤膜进行过滤除菌，立即使用或分装成小份，避光冷冻于-20℃至-5℃；
3. 使用前置于冰上解冻，避免反复冻融。组织和细胞分散的常用浓度为0.5-2.5 mg/mL，软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL。所需的最佳工作浓度需根据具体的实验条件或参考相关文献确定。
器官/组织的分离
1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成 3-4 mm 大小的组织块；
2. 用含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 HBSS 溶液多次洗涤组织块；
3. 加入足量的含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 HBSS 溶液浸没组织块，并加入胶原酶至所需工作浓度；
4. 在 37 °C 下孵育 4-18 小时。使用水平摇床并在消化过程中补充 3 mM CaCl2 可以提高消化效率；
5. 可用不锈钢网或尼龙网筛分分散的细胞，并收集以备后用。向部分解离的组织中加入适量的新鲜胶原酶工作液，并在 37°C 下继续孵育以进一步消化；
6. 用不含胶原酶的 HBSS 缓冲液洗涤收集的细胞数次；
7. 将上述细胞重悬于细胞培养基中，并使用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度；
8. 将细胞接种于细胞培养皿中，并使用合适的细胞培养基进行培养。
器官灌注
1. 在预热至 37°C 的含 Ca2+ 和 Mg2+ 的 HBSS 缓冲液中加入胶原酶，并加入 3 mM CaCl2 有助于提高分离效率；
2. 以优化的速率将胶原酶工作液注入相应的器官；
3. 将上述过程中回收的灌注液通过不锈钢或尼龙网筛过滤，以将解离的细胞或小的组织碎片与较大的组织块分离。未完全分解的组织需要用新鲜的胶原酶工作液在 37°C 下继续孵育。
4. 与上述“器官/组织分离”部分中的步骤 6-8 相同。
在体外，I 型胶原酶用于从多种动物组织中分离细胞。它具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的平衡，使其适用于上皮细胞、肝细胞、肺细胞和肾上腺原代细胞的分离。该酶被认为在组织修复过程中对细胞迁移和胶原重塑至关重要。
体内研究 (In Vivo)
体内研究表明，胶原酶在伤口愈合、烧伤以及包括椎间盘突出、瘢痕疙瘩和蜂窝织炎在内的多种疾病中具有治疗作用。它用于降解过量产生或在不适当部位产生的胶原蛋白。该酶的活性在组织修复和再生过程中至关重要。
酶活实验
体外胶原酶I型活性测定通常测量其蛋白水解活性。一个酶活性单位定义为在37°C、pH 7.5条件下，5小时内水解胶原蛋白生成1 μmol L-亮氨酸所需的酶量。该酶的活性可使用诸如呋喃丙烯酰-亮氨酸-甘氨酸-脯氨酸-丙氨酸等底物进行评估，活性测定在pH 7.5、25°C且存在钙离子的条件下进行。
细胞实验
体外细胞分析中，I型胶原酶的活性测定包括将其用于组织解离，以制备原代细胞培养物。将组织与酶在合适的缓冲液（例如，含Ca²⁺和Mg²⁺的HBSS）中于37°C孵育4-18小时。然后将所得细胞悬液过滤、洗涤，用于细胞培养。
动物实验
I型胶原酶的体内动物研究通常将其应用于组织修复、伤口愈合或疾病模型中。该酶以局部给药的方式给药，以评估其对胶原蛋白降解和组织重塑的影响。研究已评估了其在治疗烧伤和椎间盘突出等疾病方面的疗效。
药代性质 (ADME/PK)
由于胶原酶通常用作局部用药或研究试剂，而非全身给药药物，因此其药代动力学数据一般不予报道。局部应用或注射后，酶在给药部位发挥作用，并易受蛋白水解酶降解。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
胶原酶通常被认为全身毒性较低。然而，作为一种蛋白水解酶，如果使用不当，它也可能造成局部组织损伤。该酶的活性需要Ca²⁺和Zn²⁺，并会被EDTA和EGTA等螯合剂抑制。
参考文献
Therapeutic applications of collagenase (metalloproteases): A review. Asian Pac J Trop Biomed. 2016, 6, 11.
其他信息
胶原酶 I 型是一种用于组织解离和细胞分离的研究试剂。它也用于治疗某些涉及过量胶原沉积的医疗条件。该酶特异性降解胶原的能力使其成为研究和临床环境中的宝贵工具。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
精确质量
812.418
CAS号
9001-12-1
外观&性状
Light yellow to light brown solid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O: ≥ 50 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
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计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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