| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Protein arginine methyltransferases; PRMT1/6/8
DCPT1061 hydrochloride targets protein arginine methyltransferases (PRMTs), specifically PRMT1, PRMT6, and PRMT8. These enzymes catalyze the methylation of arginine residues on proteins, a post-translational modification that regulates various cellular processes, including transcription, splicing, and signal transduction. By inhibiting these PRMTs, DCPT1061 modulates epigenetic regulation and gene expression. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
本研究发现，PRMT1在肿瘤组织中表达显著上调，且与透明细胞肾细胞癌（ccRCC）患者的不良病理特征和预后相关。此外，通过基因敲低和新型强效抑制剂DCPT1061的药理学抑制，可显著诱导G1期细胞周期阻滞并抑制ccRCC细胞生长。机制上，RNA测序和进一步验证发现，脂质运载蛋白2（LCN2）——一种参与肿瘤发生的糖蛋白——是ccRCC生长的关键调控因子，也是PRMT1的下游功能效应分子。PRMT1缺陷导致LCN2自分泌的表观遗传沉默，进而降低下游磷酸化AKT（p-AKT）水平，最终通过中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白受体（NGALR）降低磷酸化RB（p-RB）水平，并导致细胞生长阻滞。 [2]
在这项研究中，研究人员发现蛋白质精氨酸甲基转移酶1 (PRMT1) 的表达与黑色素瘤标本中CD8+ T细胞的数量和活性呈负相关[1]。 体外实验表明，DCPT1061盐酸盐对PRMT1、PRMT6和PRMT8具有很强的抑制活性，而对PRMT3、PRMT4和PRMT5的抑制作用较弱。这种选择性使其成为研究PRMT1、PRMT6和PRMT8在细胞过程和疾病中具体作用的宝贵工具。其抗肿瘤作用很可能是通过抑制PRMT介导的。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
PRMT1 缺陷或使用 DCPT1061 抑制 PRMT1 可显著抑制难治性黑色素瘤的生长，并增加体内肿瘤内 CD8+ T 细胞的数量。此外，黑色素瘤细胞中 PRMT1 的缺失促进了内源性逆转录病毒元件 (ERV) 衍生的双链 RNA 的形成，并刺激了细胞内干扰素反应。机制上，PRMT1 缺陷通过减弱 Dnmt1 增强子区域的 H4R3me2a 和 H3K27ac 修饰来抑制 DNA 甲基转移酶 1 (DNMT1) 的表达，而 DNMT1 的下调则激活了 ERV 转录和干扰素信号通路。重要的是，使用 DCPT1061 抑制 PRMT1 与 PD-1 阻断剂协同作用，可抑制肿瘤进展，并增加体内 CD8+ T 细胞以及 IFNγ+CD8+ T 细胞的比例。 [1]
此外，DCPT1061对PRMT1的抑制作用不仅抑制了肿瘤生长，而且通过减弱舒尼替尼诱导的LCN2-AKT-RB信号通路上调，增强了ccRCC对舒尼替尼治疗的敏感性。结论：综上所述，我们的研究揭示了PRMT1依赖的表观遗传机制在ccRCC肿瘤生长和耐药性调控中的作用，表明PRMT1可能成为ccRCC患者治疗干预的一个有前景的靶点[2]。 目前科学文献中尚无DCPT1061盐酸盐的体内活性数据。基于其体外活性和抗肿瘤作用，它可能具有进行体内研究的潜力，但相关数据尚未发表。 |
| 酶活实验 |
DCPT1061盐酸盐的体外酶活性测定方案通常包括测量其对PRMT活性的抑制作用。将重组PRMT酶与底物（例如肽或组蛋白）和甲基供体（S-腺苷甲硫氨酸）在不同浓度的抑制剂存在下进行孵育。采用放射性、荧光或质谱法定量甲基转移。
|
| 细胞实验 |
将培养细胞分别用 DCPT1061 或 shPRMT1 慢病毒在 10cm 培养皿中进行体外处理。48 小时后，收集细胞并提取总 RNA。然后使用双端测序方法在 Illumina HiSeq2000 平台上对构建良好的 cDNA 文库进行测序。对原始测序数据进行严格的质量控制，包括去除接头序列和过滤低质量序列，然后使用常规 RNA 测序分析流程对高质量序列进行分析。首先使用 STAR 2.5（Spliced Transcripts Alignment to a Reference）将测序数据比对到人类 hg19 基因组，然后使用 featureCounts 软件进行基因表达定量。基于这些原始计数，使用 R/Bioconductor 包 DESeq2 进行差异基因表达分析。为了确定每个样本中差异表达的基因，我们设定倍数变化为 2 且校正后的 P 值为 0.05 作为各样本的阈值[2]。
体外细胞实验方案中，DCPT1061 盐酸盐的检测方法包括用该化合物处理癌细胞系，以评估其对细胞增殖、凋亡和靶蛋白甲基化的影响。细胞用不同浓度的化合物处理，并使用特异性抗体通过蛋白质印迹法检测蛋白质精氨酸甲基化水平。 |
| 动物实验 |
小鼠肿瘤模型[1]
本研究使用6-8周龄的雌性BALB/c裸鼠和6-8周龄的雌性C57BL/6J野生型（WT）小鼠。基因干预方面，将2.5×10⁵个B16-F10细胞（PRMT1 sg1和CTRL）皮下注射到WT小鼠或裸鼠体内。在第0、4、8和12天，向携带CTRL或PRMT1 sg1肿瘤的小鼠腹腔注射抗CD8α抗体（200 μg）。每3天测量一次肿瘤大小和小鼠体重。当肿瘤体积达到1000-1500 mm³时，处死小鼠。药物干预方面，将2.5×10⁵个B16-F10细胞皮下注射到WT小鼠或裸鼠体内。当肿瘤体积达到 50 至 100 mm³ 时，将小鼠随机分组，并每日一次腹腔注射载体（PBS）或 30 mg/kg DCPT1061。在第 8 天和第 12 天，单独或与 DCPT1061 联合腹腔注射抗 PD-1 抗体（150 μg）。每 3 天测量一次肿瘤大小和小鼠体重。当肿瘤体积达到 1,000 至 1,500 mm³ 时，处死小鼠。生存分析中，当肿瘤体积达到 2,000 mm³ 时，判定小鼠死亡。肿瘤体积的计算公式为：1/2 × 长 × 宽²。 异种移植模型和治疗[2] 将约 5 × 10⁶ 个 ccRCC 细胞皮下注射到 6 周龄雌性裸鼠（BALB/c-nu/nu）的侧腹部。使用PDX#1002523691组织，在6周龄雌性SCID小鼠中建立了PDX模型。用游标卡尺测量肿瘤体积，肿瘤体积估计值=长×宽²/2。当肿瘤体积达到约50 mm³时，将小鼠随机分为四组（n=6）。小鼠治疗方案如下：载体对照组、DCPT1061组（30 mg/kg/天）、舒尼替尼组（25 mg/kg/天）以及DCPT1061（30 mg/kg/天）联合舒尼替尼（25 mg/kg/天）组。每隔一天测量小鼠体重和肿瘤体积。治疗结束后，处死小鼠，取出肿瘤，称重，并用4%甲醛固定。目前尚未报道DCPT1061盐酸盐的体内动物实验方案。基于其抗肿瘤作用，可考虑使用异种移植模型来评估其疗效。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
DCPT1061盐酸盐的药代动力学特性以其溶解度为特征：它在DMSO中的溶解度为50 mg/mL。半衰期和口服生物利用度等具体参数尚未报道。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前文献中尚无关于DCPT1061盐酸盐的毒理学数据。作为一种研究用化学品，应按照标准实验室安全防护措施进行操作。本品不适用于人体。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
尽管免疫检查点抑制（ICB）在癌症治疗中取得了显著成功，但许多肿瘤，包括黑色素瘤，仍然表现出先天或适应性抗性。肿瘤固有的T细胞缺陷和T细胞功能障碍被确定为导致ICB抗性的关键因素。本研究发现，蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）的表达与黑色素瘤标本中CD8+ T细胞的数量和活性呈负相关。PRMT1缺失或使用DCPT1061抑制显著抑制了难治性黑色素瘤的生长，并在体内增加了肿瘤内CD8+ T细胞的数量。此外，黑色素瘤细胞中的PRMT1缺失促进了内源性逆转录病毒元素（ERV）衍生的双链RNA的形成，并刺激了细胞内干扰素反应。在机制上，PRMT1缺失通过减弱DNMT1增强子区域的H4R3me2a和H3K27ac修饰来抑制DNA甲基转移酶1（DNMT1）的表达，DNMT1的下调随后激活了内源性逆转录病毒（ERV）的转录和干扰素信号通路。重要的是，DCPT1061对PRMT1的抑制与PD-1阻断剂的协同作用抑制了肿瘤进展，并增加了体内CD8+ T细胞和IFNγ+CD8+ T细胞的比例。总之，这些结果揭示了PRMT1在调节抗肿瘤T细胞免疫中的未知作用和机制，表明抑制PRMT1可能是提高免疫检查点阻断（ICB）疗效的有效策略。[1]
\n表观遗传改变是透明细胞肾细胞癌（ccRCC）中的常见事件，而蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）是癌症中的一个重要表观遗传调节因子。然而，PRMT1在透明细胞肾细胞癌（ccRCC）中的作用仍不清楚。方法：我们使用ccRCC组织微阵列（TMA）研究了ccRCC患者中PRMT1的表达水平及其与临床病理因素和预后的相关性。我们采用基因敲除和新型PRMT1抑制剂DCPT1061的药理抑制来研究PRMT1在ccRCC增殖中的功能作用。此外，我们在ccRCC细胞来源的肿瘤异种移植（CDX）和患者来源的肿瘤异种移植（PDX）模型中验证了PRMT1抑制剂DCPT1061的抗肿瘤效果。结果：我们发现PRMT1在肿瘤组织中显著上调，并与ccRCC患者的不良病理特征和预后相关。此外，基因敲除和使用新型强效抑制剂DCPT1061的药理抑制显著诱导了G1期细胞周期停滞，并抑制了ccRCC细胞的生长。在机制上，RNA测序和进一步验证揭示了脂质载体蛋白2（LCN2）是一种与肿瘤发生相关的分泌糖蛋白，是透明细胞肾细胞癌（ccRCC）生长的关键调节因子，也是PRMT1的功能性下游效应分子。PRMT1缺失导致LCN2自分泌的表观遗传沉默，进而降低下游磷酸化AKT（p-AKT）的水平，最终通过中性粒细胞明胶酶相关脂质载体受体（NGALR）降低磷酸化RB（p-RB）的水平，从而导致细胞生长停滞。此外，DCPT1061对PRMT1的抑制不仅抑制了肿瘤生长，还通过减弱顺铂诱导的LCN2-AKT-RB信号通路的上调，增强了ccRCC对顺铂治疗的敏感性。结论：总之，我们的研究揭示了PRMT1依赖的表观遗传机制在ccRCC肿瘤生长和药物耐受性调控中的作用，表明PRMT1可能是治疗ccRCC患者的一个有前景的靶点。[2] DCPT1061盐酸盐是一种研究级化合物，用作PRMT1、PRMT6和PRMT8的强效选择性抑制剂。它在体外显示出抗肿瘤效果。尚未进入临床试验，也未获得任何治疗适应症的批准。其作用机制涉及抑制蛋白精氨酸甲基化。该化合物仅供研究用途。 |
| 分子式 |
C17H21CL3N2O
|
|---|---|
| 分子量 |
375.72
|
| 精确质量 |
375.72
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
4.1
|
| tPSA |
24.5Ų
|
| 化学名 |
N'-[[2-(2,3-dichlorophenoxy)phenyl]methyl]-N,N'-dimethylethane-1,2-diamine hydrochloride
|
| 别名 |
DCPT1061 HCl; DCPT-1061 hydrochloride
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :~50 mg/mL (~133.08 mM; with sonication (<60°C))
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6616 mL | 13.3078 mL | 26.6156 mL | |
| 5 mM | 0.5323 mL | 2.6616 mL | 5.3231 mL | |
| 10 mM | 0.2662 mL | 1.3308 mL | 2.6616 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
