| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Protein arginine methyltransferases; PRMT1/6/8
PRMT1 (protein arginine methyltransferase 1), PRMT6 (protein arginine methyltransferase 6), and PRMT8 (protein arginine methyltransferase 8). DCPT1061 exhibits less inhibitory effect on PRMT3, PRMT4 (also known as CARM1), and PRMT5, as well as other epigenetic enzymes. PRMT1 is the major type I PRMT responsible for asymmetric dimethylation of arginine residues on histone H4 (H4R3me2a) and various non-histone proteins, regulating gene expression and protein function. PRMT6 and PRMT8 are also type I PRMTs with distinct substrate specificities and tissue expression patterns. The selective inhibition of these three isoforms, while sparing PRMT3 (which regulates ribosomal processing), PRMT4/CARM1 (which methylates histone H3), and PRMT5 (a type II PRMT that generates symmetric dimethylation), allows researchers to dissect the specific contributions of type I PRMTs to oncogenic signaling without confounding effects from other PRMT family members. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
本研究发现，PRMT1在肿瘤组织中表达显著上调，且与透明细胞肾细胞癌（ccRCC）患者的不良病理特征和预后相关。此外，通过基因敲低和新型强效抑制剂DCPT1061的药理学抑制，可显著诱导G1期细胞周期阻滞并抑制ccRCC细胞生长。机制上，RNA测序和进一步验证发现，脂质运载蛋白2（LCN2）——一种参与肿瘤发生的糖蛋白——是ccRCC生长的关键调控因子，也是PRMT1的下游功能效应分子。PRMT1缺陷导致LCN2自分泌的表观遗传沉默，进而降低下游磷酸化AKT（p-AKT）水平，最终通过中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白受体（NGALR）降低磷酸化RB（p-RB）水平，并导致细胞生长阻滞。 [2]
在这项研究中，研究人员发现蛋白质精氨酸甲基转移酶1 (PRMT1) 的表达与黑色素瘤标本中CD8+ T细胞的数量和活性呈负相关[1]。 DCPT1061在体外能有效抑制PRMT1、PRMT6和PRMT8，而对PRMT3、PRMT4和PRMT5或其他表观遗传酶的抑制作用较弱。虽然现有文献中尚未公布每种亚型的确切IC50值，但该化合物表现出显著的生物活性，其选择性特征使其区别于泛PRMT抑制剂。在酶活性测定中，DCPT1061降低了其靶标PRMT的甲基转移酶活性，从而降低了组蛋白和非组蛋白底物上不对称精氨酸二甲基化的水平。这种活性有望调节由PRMT介导的甲基化驱动的下游基因表达程序和信号通路，从而发挥其抗肿瘤作用。该化合物对 PRMT1、PRMT6 和 PRMT8 的选择性优于其他 PRMT 同工酶和表观遗传酶，表明其对 I 型 PRMT 生物学的机制研究具有有利的特性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
PRMT1 缺陷或使用 DCPT1061 抑制 PRMT1 可显著抑制难治性黑色素瘤的生长，并增加体内肿瘤内 CD8+ T 细胞的数量。此外，黑色素瘤细胞中 PRMT1 的缺失促进了内源性逆转录病毒元件 (ERV) 衍生的双链 RNA 的形成，并刺激了细胞内干扰素反应。机制上，PRMT1 缺陷通过减弱 Dnmt1 增强子区域的 H4R3me2a 和 H3K27ac 修饰来抑制 DNA 甲基转移酶 1 (DNMT1) 的表达，而 DNMT1 的下调则激活了 ERV 转录和干扰素信号通路。重要的是，使用 DCPT1061 抑制 PRMT1 与 PD-1 阻断剂协同作用，可抑制肿瘤进展，并增加体内 CD8+ T 细胞以及 IFNγ+CD8+ T 细胞的比例。 [1]此外，DCPT1061对PRMT1的抑制不仅抑制了肿瘤生长，而且通过减弱舒尼替尼诱导的LCN2-AKT-RB信号通路的上调，增强了ccRCC对舒尼替尼治疗的敏感性。结论：综上所述，我们的研究揭示了PRMT1依赖的表观遗传机制在ccRCC肿瘤生长和耐药性调控中的作用，表明PRMT1可能成为ccRCC患者治疗干预的一个有前景的靶点[2]。DCPT1061具有抗肿瘤作用，通过调节组蛋白甲基化通路展现出癌症治疗的潜力。在临床前模型中，DCPT1061对PRMT1的抑制有望降低依赖PRMT1活性进行致癌信号传导的癌细胞的增殖和存活。 PRMT1已被证实能够调控包括NF-κB、Wnt/β-catenin和STAT3信号通路在内的关键通路，而这些通路在癌症中常常出现异常。DCPT1061通过抑制PRMT1，可能抑制这些通路，并诱导肿瘤细胞凋亡或细胞周期阻滞。此外，抑制同样与癌症进展相关的PRMT6和PRMT8，可能产生互补的抗肿瘤作用。然而，现有文献中并未提供详细的体内疗效数据（例如异种移植模型中的肿瘤生长抑制情况），因此需要开展进一步的研究，以全面评估该化合物在动物模型中的抗肿瘤潜力。
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| 酶活实验 |
体外酶抑制实验采用重组PRMT酶（PRMT1、PRMT6、PRMT8以及其他用于选择性分析的同工酶），将酶与不同浓度的DCPT1061和甲基供体底物（通常为S-腺苷甲硫氨酸(SAM)或放射性标记的3H-SAM）以及合适的肽或蛋白质底物（可被靶PRMT甲基化）一起孵育。反应在优化的缓冲条件下（例如，Tris-HCl pH 8.0、NaCl、DTT）于30°C下进行，孵育时间根据实验条件而定。反应终止后（例如，加入冷的三氯乙酸或点样于滤纸上），通过闪烁计数、滤膜结合法或荧光检测法（例如，使用甲基转移酶活性检测试剂盒）测定转移的甲基。通过将剂量-反应曲线拟合到抑制数据，计算每种PRMT同工酶的IC50值。通过比较 PRMT1、PRMT6、PRMT8、PRMT3、PRMT4、PRMT5 和其他表观遗传酶的 IC50 值来评估选择性。
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| 细胞实验 |
将培养细胞分别用 DCPT1061 或 shPRMT1 慢病毒在 10cm 培养皿中进行体外处理。48 小时后，收集细胞并提取总 RNA。然后使用双端测序方法在 Illumina HiSeq2000 平台上对构建良好的 cDNA 文库进行测序。对原始测序数据进行严格的质量控制，包括去除接头序列和过滤低质量序列，然后使用常规 RNA 测序分析流程对高质量序列进行分析。首先使用 STAR 2.5（Spliced Transcripts Alignment to a Reference）将测序数据比对到人类 hg19 基因组，然后使用 featureCounts 软件进行基因表达定量。基于这些原始计数，使用 R/Bioconductor 包 DESeq2 进行差异基因表达分析。为了确定每个样本中差异表达的基因，我们设定倍数变化2和校正后的P值0.05为阈值[2]。
将癌细胞系（例如，根据研究重点的不同，包括各种肿瘤类型）用不同浓度（通常为纳摩尔至微摩尔）的DCPT1061处理72-96小时，以评估其抗增殖作用。使用标准比色法（例如MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物）或CCK-8（细胞计数试剂盒-8））检测细胞活力，这些方法可以测量活细胞的代谢活性。在540-570 nm（MTT）或450 nm（CCK-8）处读取吸光度，并根据剂量反应曲线计算IC50值。其他细胞检测可能包括细胞凋亡评估（Annexin V/PI 染色、caspase 激活）、细胞周期分析（流式细胞术）以及通过蛋白质印迹法测量 PRMT 底物甲基化水平（例如，组蛋白 H4R3me2a），以确认细胞水平上的靶标结合。 |
| 动物实验 |
小鼠肿瘤模型[1]
本研究使用6-8周龄的雌性BALB/c裸鼠和6-8周龄的雌性C57BL/6J野生型（WT）小鼠。基因干预方面，将2.5×10⁵个B16-F10细胞（PRMT1 sg1和CTRL）皮下注射到WT小鼠或裸鼠体内。在第0、4、8和12天，向携带CTRL或PRMT1 sg1肿瘤的小鼠腹腔注射抗CD8α抗体（200 μg）。每3天测量一次肿瘤大小和小鼠体重。当肿瘤体积达到1000-1500 mm³时，处死小鼠。药物干预方面，将2.5×10⁵个B16-F10细胞皮下注射到WT小鼠或裸鼠体内。当肿瘤体积达到 50 至 100 mm³ 时，将小鼠随机分组，并每日一次腹腔注射载体（PBS）或 30 mg/kg DCPT1061。在第 8 天和第 12 天，单独或与 DCPT1061 联合腹腔注射抗 PD-1 抗体（150 μg）。每 3 天测量一次肿瘤大小和小鼠体重。当肿瘤体积达到 1,000 至 1,500 mm³ 时，处死小鼠。生存分析中，当肿瘤体积达到 2,000 mm³ 时，判定小鼠死亡。肿瘤体积的计算公式为：1/2 × 长 × 宽²。 异种移植模型和治疗[2] 将约 5 × 10⁶ 个 ccRCC 细胞皮下注射到 6 周龄雌性裸鼠（BALB/c-nu/nu）的侧腹部。使用PDX#1002523691组织，在6周龄雌性SCID小鼠中建立了PDX模型。用游标卡尺测量肿瘤体积，肿瘤体积估计值=长×宽²/2。当肿瘤体积达到约50 mm³时，将小鼠随机分为四组（n=6）。小鼠的治疗方案如下：载体对照组、DCPT1061组（30 mg/kg/天）、舒尼替尼组（25 mg/kg/天）以及DCPT1061（30 mg/kg/天）联合舒尼替尼（25 mg/kg/天）组。每隔一天测量小鼠的体重和肿瘤体积。治疗结束后，处死小鼠，取出肿瘤，称重，并用4%甲醛固定。携带异种移植瘤（例如，来自人癌细胞系的肿瘤）的小鼠通过腹腔注射或口服途径给予不同剂量的DCPT1061（通常采用多个剂量水平以建立剂量-反应关系）。使用游标卡尺（长×宽²/2）定期测量肿瘤体积，并监测体重以评估耐受性。治疗通常持续2-4周，或直至肿瘤达到预定大小。在研究终点，切除肿瘤进行组织病理学分析（例如，H&E染色）和生物标志物评估（例如，PRMT底物甲基化的免疫组织化学染色、Ki-67增殖检测、cleaved caspase-3凋亡检测），以评估体内靶点结合情况和抗肿瘤疗效。测量药效学标志物以确认化合物到达肿瘤组织并在达到的剂量下抑制其靶点。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
预计该化合物具有中等的口服生物利用度和合理的血浆蛋白结合率，与小分子PRMT抑制剂类似。其代谢稳定性可能主要通过肝脏中的CYP450酶介导，尤其是氧化代谢。通常在相关剂量水平下，通过静脉和口服给药，在啮齿动物模型（小鼠或大鼠）中评估标准药代动力学参数（Cmax、Tmax、AUC、t1/2、清除率、分布容积）。该化合物通常配制成合适的载体（例如，DMSO/PEG400/生理盐水混合物）用于肠外给药，或配制成合适的口服制剂用于灌胃研究。已发表的文献中没有关于DCPT1061的详细药代动力学数据，需要通过实验获得。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
预计在临床前动物模型中，该药物在治疗剂量下具有可接受的安全性，但可能存在与靶向PRMT抑制相关的剂量限制性毒性，从而影响正常的细胞甲基化过程。PRMT1对胚胎发育至关重要，并在正常的细胞功能中发挥重要作用，因此长期抑制可能影响正常组织，尤其是那些细胞更新率高的组织（例如骨髓、肠道上皮）。在进入临床开发之前，通常需要对啮齿类动物和非啮齿类动物进行标准毒理学研究（急性及亚慢性），以确定安全范围、识别毒性靶器官并确定最大耐受剂量（MTD）。由于该药物仍处于研究阶段，详细的毒理学数据尚未公开。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
尽管免疫检查点抑制（ICB）在癌症治疗中取得了显著成功，但许多肿瘤，包括黑色素瘤，仍然表现出先天或适应性耐药性。肿瘤固有的T细胞缺陷和T细胞功能障碍被认为是导致ICB耐药的关键因素。本研究发现，蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）的表达与黑色素瘤标本中CD8+ T细胞的数量和活性呈负相关。PRMT1缺失或使用DCPT1061抑制显著抑制难治性黑色素瘤的生长，并增加了体内肿瘤内CD8+ T细胞的数量。此外，黑色素瘤细胞中的PRMT1缺失促进了内源性逆转录病毒元素（ERV）衍生的双链RNA的形成，并刺激了细胞内干扰素反应。从机制上讲，PRMT1缺失通过减弱DNMT1增强子区域的H4R3me2a和H3K27ac修饰，抑制DNA甲基转移酶1（DNMT1）的表达，DNMT1的下调随后激活内源性逆转录病毒（ERV）的转录和干扰素信号通路。重要的是，DCPT1061对PRMT1的抑制与PD-1阻断剂的协同作用抑制了肿瘤进展，并增加了体内CD8+ T细胞和IFNγ+CD8+ T细胞的比例。总之，这些结果揭示了PRMT1在调节抗肿瘤T细胞免疫中的未知作用和机制，表明PRMT1抑制可能是一种有效的策略，以提高免疫检查点抑制（ICB）的疗效。[1]
表观遗传改变在透明细胞肾细胞癌（ccRCC）中是常见事件，蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）是癌症中的重要表观遗传调节因子。然而，PRMT1在透明细胞肾细胞癌（ccRCC）中的作用仍不清楚。方法：我们使用ccRCC组织微阵列（TMA）调查了ccRCC患者中PRMT1的表达水平及其与临床病理因素和预后的相关性。我们采用基因敲除和使用新型PRMT1抑制剂DCPT1061的药理抑制来研究PRMT1在ccRCC增殖中的功能作用。此外，我们在ccRCC细胞衍生的肿瘤异种移植（CDX）和患者衍生的肿瘤异种移植（PDX）模型中验证了PRMT1抑制剂DCPT1061的抗肿瘤效果。结果：我们发现PRMT1在肿瘤组织中显著上调，并与ccRCC患者的不良病理特征和预后相关。此外，基因敲除和使用新型强效抑制剂DCPT1061的药理抑制显著诱导G1期细胞周期停滞，并抑制ccRCC细胞的生长。从机制上讲，RNA测序和进一步验证揭示了脂质载体蛋白2（LCN2）是一种与肿瘤发生相关的分泌糖蛋白，是透明细胞肾细胞癌（ccRCC）生长的关键调节因子，以及PRMT1的功能下游效应分子。PRMT1缺失导致LCN2自分泌的表观遗传沉默，进而降低下游磷酸化AKT（p-AKT）的水平，最终通过中性粒细胞明胶酶相关脂质载体受体（NGALR）降低磷酸化RB（p-RB）的水平，并导致细胞生长停滞。此外，DCPT1061对PRMT1的抑制不仅抑制了肿瘤生长，还通过减弱顺铂诱导的LCN2-AKT-RB信号通路的上调，增强了ccRCC对顺铂治疗的敏感性。结论：总之，我们的研究揭示了PRMT1依赖的表观遗传机制在ccRCC肿瘤生长和药物耐受性调控中的作用，表明PRMT1可能是治疗ccRCC患者的一个有前景的靶点。[2] DCPT1061是一种用于表观遗传学和肿瘤学研究的研究级小分子PRMT抑制剂。它以液体制剂（10 mM DMSO）形式提供，包装规格从1 mL到100 mg或更多，通常在-20°C下储存以保持长期稳定性。它被归类为组蛋白甲基转移酶抑制剂，广泛用于研究精氨酸甲基化在癌症发病机制中的作用，以及针对PRMT进行治疗干预的药物发现项目。该化合物对PRMT1、PRMT6和PRMT8的选择性使其成为剖析这些同种型在致癌信号传导中特定贡献的宝贵工具，区别于针对更广泛PRMT家族成员的全PRMT抑制剂。仅供研究使用，不用于人类治疗。 |
| 分子式 |
C17H20CL2N2O
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|---|---|
| 分子量 |
339.259502410889
|
| 精确质量 |
338.0952
|
| CAS号 |
2289726-31-2
|
| PubChem CID |
169494473
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| 外观&性状 |
Colorless to light yellow liquid
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| LogP |
4.1
|
| tPSA |
24.5Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
| 重原子数目 |
22
|
| 分子复杂度/Complexity |
319
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
ClC1C(=CC=CC=1OC1C=CC=CC=1CN(C)CCNC)Cl
|
| InChi Key |
GCURTAFSSBAXNO-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H20Cl2N2O/c1-20-10-11-21(2)12-13-6-3-4-8-15(13)22-16-9-5-7-14(18)17(16)19/h3-9,20H,10-12H2,1-2H3
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| 化学名 |
N'-[[2-(2,3-dichlorophenoxy)phenyl]methyl]-N,N'-dimethylethane-1,2-diamine
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| 别名 |
DCPT1061; DCPT-1061
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO :≥ 250 mg/mL (~736.90 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9476 mL | 14.7380 mL | 29.4759 mL | |
| 5 mM | 0.5895 mL | 2.9476 mL | 5.8952 mL | |
| 10 mM | 0.2948 mL | 1.4738 mL | 2.9476 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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