| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
β-catenin/BCL9 complex
beta-catenin and BCL9 (protein-protein interaction complex) as an inhibitor of oncogenic Wnt signaling. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
通过高通量筛选（HTS）（表S1）筛选出的具有商业价值的活性化合物被购买，并使用10剂量反应AlphaScreen检测进行验证。该检测中，化合物分别针对全长β-catenin和一种无关蛋白（BRD9）进行滴定，后者作为反向筛选以进一步排除任何非特异性化合物（图1F）。该检测验证了16种化合物能够特异性且竞争性地抑制β-catenin/BCL9复合物，但不抑制BRD9/配体复合物。其中，性能最佳的五种化合物分别为E722-2648 (C-1)、L814-1428 (C-2)、SYN22094413 (C-3)、L859-1770 (C-4)和F838-0143 (C-5)，本文后续将使用其简称（C-1至C-5）指代（图1F）。为了进一步确认特异性并表征前 16 种化合物的结合热力学性质，我们采用了等温滴定量热法 (ITC)。五种表现最佳的化合物的解离常数 (KD) 值介于 0.27 至 2.22 μM 之间，与用作阳性对照的 BCL9 肽 (2.74 μM) 相当（图 1G 和表 S2）。[1]
E722-2648 是一种强效的β-catenin/BCL9复合物抑制剂，它能特异性地阻止β-catenin/BCL9复合物的形成并抑制Wnt信号通路活性。该化合物通过增加胆固醇酯化和脂滴积累来破坏胆固醇稳态。它具有抗肿瘤活性，有望成为治疗Wnt信号通路驱动型癌症的潜在药物。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
E722-2648在临床前研究中显示出抗肿瘤活性，其作用机制可能与抑制β-catenin/BCL9依赖的Wnt靶基因表达以及改变癌细胞胆固醇代谢有关。在结直肠癌模型中，该化合物能够阻断致癌的Wnt信号通路并破坏胆固醇稳态。目前正在进行进一步的体内疗效研究，以充分评估其抗肿瘤潜力。
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| 酶活实验 |
将重组β-catenin和BCL9蛋白与不同浓度的E722-2648（0-500 nM）在结合缓冲液中孵育1-2小时。采用ELISA法（使用β-catenin捕获抗体和BCL9检测抗体）或AlphaScreen技术检测β-catenin/BCL9复合物的形成。结合亲和力（Kd）和抑制效力（IC50）根据剂量反应曲线计算。
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| 细胞实验 |
将Wnt信号通路驱动的癌细胞（例如HCT116结直肠癌细胞）用E722-2648（1-1000 nM）处理24-72小时。采用免疫共沉淀（Co-IP）结合Western blot检测β-catenin/BCL9复合物的形成。采用qPCR检测Wnt靶基因（AXIN2、MYC、CCND1）的表达。采用MTT或CellTiter-Glo法检测细胞增殖和活力。使用荧光染料定量胆固醇酯化和脂滴积累。
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| 动物实验 |
将携带Wnt信号通路驱动的癌细胞系（例如HCT116结直肠癌）皮下异种移植瘤的小鼠，通过灌胃或腹腔注射（10-100 mg/kg，每日或隔日）给予E722-2648治疗2-4周。每2-3天用游标卡尺测量肿瘤体积。终点分析包括肿瘤重量、组织学、免疫共沉淀法（Co-IP）检测β-catenin/BCL9复合物、qPCR检测Wnt靶基因表达以及肿瘤组织胆固醇/脂质分析。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
E722-2648（分子式 C21H30N2OS2，分子量 390.61）通常配制成口服或腹腔注射剂型。在啮齿动物中，其口服生物利用度估计为 30-50%，血浆峰浓度在 1-2 小时内达到。半衰期约为 2-4 小时。该化合物可分布至肿瘤组织、肝脏和其他器官。其代谢和排泄途径尚未完全阐明。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
E722-2648 的毒性研究仅限于初步观察。在小鼠异种移植模型研究中，治疗剂量（10-100 mg/kg）下未报告明显的不良反应或体重减轻。应遵循化学研究化合物的标准安全预防措施。在进行临床开发之前，需要开展长期毒理学研究。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Wnt/β-catenin信号通路的失调与多种人类癌症（包括结直肠癌（CRC））的发病机制密切相关，使其成为极具吸引力的临床靶点。为了抑制致癌的Wnt活性，我们开发了一种高通量筛选方法AlphaScreen，用于鉴定β-catenin与其共激活因子BCL9相互作用的选择性小分子抑制剂。我们筛选出一种能够稳定结合β-catenin并特异性抑制CRC细胞系中天然β-catenin/BCL9复合物形成的化合物。该化合物能够抑制Wnt活性，在基因表达研究中下调Wnt/β-catenin信号通路特征的表达，破坏胆固醇稳态，并显著降低CRC细胞系的增殖以及CRC异种移植小鼠模型中的肿瘤生长。因此，本研究鉴定出一种特异性的小分子致癌Wnt信号通路抑制剂，可作为功能研究的探针，对CRC患者的新疗法开发具有重要意义。[1]
E722-2648 是一种靶向 β-catenin/BCL9 蛋白-蛋白相互作用的研究化合物。Wnt/β-catenin 信号通路的异常激活驱动多种癌症的发生，包括结直肠癌、肝细胞癌和乳腺癌。β-catenin/BCL9 相互作用对于 Wnt 介导的转录激活和肿瘤发生至关重要。E722-2648 为 Wnt 驱动的癌症提供了一种治疗策略，其对胆固醇稳态的额外影响可能有助于其抗肿瘤活性。 |
| 分子式 |
C21H30N2OS2
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|---|---|
| 分子量 |
390.605702877045
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| 精确质量 |
390.179
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| CAS号 |
931963-55-2
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| PubChem CID |
20913345
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| LogP |
4.6
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| tPSA |
85.9
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
538
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
S1C2C=C(C(NCCCN3CCCC(C)C3)=O)SCC=2C2=C1CCCC2
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| InChi Key |
KTLYLDMTGYBKTC-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H30N2OS2/c1-15-6-4-10-23(13-15)11-5-9-22-21(24)20-12-19-17(14-25-20)16-7-2-3-8-18(16)26-19/h12,15H,2-11,13-14H2,1H3,(H,22,24)
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| 化学名 |
N-[3-(3-methylpiperidin-1-yl)propyl]-6,7,8,9-tetrahydro-1H-thiopyrano[4,3-b][1]benzothiole-3-carboxamide
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| 别名 |
E722-2648; CHEMBL5398378; 931963-55-2; N-[3-(3-METHYL-1-PIPERIDINYL)PROPYL]-6,7,8,9-TETRAHYDRO-1H-THIOPYRANO[4,3-B][1]BENZOTHIOPHENE-3-CARBOXAMIDE; N-[3-(3-methylpiperidin-1-yl)propyl]-6,7,8,9-tetrahydro-1H-thiopyrano[4,3-b][1]benzothiole-3-carboxamide;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
Typically soluble in DMSO (e.g. 10 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5601 mL | 12.8005 mL | 25.6010 mL | |
| 5 mM | 0.5120 mL | 2.5601 mL | 5.1202 mL | |
| 10 mM | 0.2560 mL | 1.2800 mL | 2.5601 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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