| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Arg‑Arg‑AMC acetate is a specific fluorescent substrate for cathepsin B (CTSB), a lysosomal cysteine protease. Cathepsin B functions as both an endopeptidase and a dipeptidyl peptidase, capable of cleaving dipeptide substrates such as Arg‑Arg‑AMC. The dipeptide sequence is specifically recognized by the active site of cathepsin B. Upon cleavage of the amide bond between the arginine residue and the AMC group, the free AMC fluorophore is released, producing a strong fluorescent signal. The substrate is not cleaved by other cathepsins such as cathepsin L under the same conditions, making it relatively selective for cathepsin B.
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| 体外研究 (In Vitro) |
Arg-Arg-AMC乙酸酯是组织蛋白酶B的荧光底物。在完整的肽链中，AMC基团的荧光被猝灭。经组织蛋白酶B酶切后，AMC基团被释放，其荧光强度显著增强。荧光强度的增加（激发波长λex=360-380 nm，发射波长λem=440-460 nm）与组织蛋白酶B的活性成正比。该底物可用于生化分析、细胞裂解液中组织蛋白酶B活性的测定，以及组织蛋白酶B抑制剂的筛选。由于该底物是底物而非抑制剂，因此未报道其自身的IC50值。
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| 体内研究 (In Vivo) |
目前尚无该底物的体内活性数据报道。该化合物是一种体外荧光底物，不作为体内药物使用。它可用于离体检测，以测定癌症、关节炎和神经退行性疾病动物模型组织匀浆或体液中的组织蛋白酶B活性。该底物不进行全身给药。
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| 酶活实验 |
采用标准体外荧光法测定组织蛋白酶B对Arg-Arg-AMC乙酸酯的结合和切割活性。将纯化的组织蛋白酶B（0.1-10 nM）在活化缓冲液（例如，50 mM乙酸钠，pH 5.5，2.5 mM DTT，2 mM EDTA）中于37℃活化5-15分钟。将活化的酶加入含有Arg-Arg-AMC乙酸酯（1-500 uM）的96孔板中，孔板内含有测定缓冲液（例如，50 mM乙酸钠，pH 5.5，2.5 mM DTT）。使用荧光酶标仪在37℃下监测荧光强度（激发波长λex=360-380 nm，发射波长λem=440-460 nm）随时间的变化。初始反应速率由荧光强度线性增长部分计算得出。动力学参数（Km、kcat）通过改变底物浓度来确定。最适pH值通常在5.5-6.0左右。
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| 细胞实验 |
对于细胞实验，将表达组织蛋白酶B的细胞（例如癌细胞系、巨噬细胞）接种于96孔板中。为测定细胞内组织蛋白酶B活性，将细胞在裂解缓冲液（例如50 mM乙酸钠，pH 5.5，0.1% Triton X-100，2.5 mM DTT）中裂解，然后离心。将上清液与Arg-Arg-AMC乙酸酯（50-200 uM）在测定缓冲液中于37℃孵育15-60分钟。荧光强度按上述方法测定。为测定分泌型组织蛋白酶B活性，收集条件培养基并与底物孵育。对于抑制剂研究，在裂解前用组织蛋白酶B抑制剂（例如CA-074）预处理细胞。如果使用细胞渗透性底物，也可用于活细胞成像。
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| 动物实验 |
本研究未直接在底物上进行动物实验。为进行离体组织蛋白酶B活性测定，从小鼠或大鼠中采集组织（例如，肿瘤异种移植瘤、关节炎关节、脑组织），在裂解缓冲液中匀浆，并离心。将澄清的上清液与Arg-Arg-AMC乙酸酯（50-200 μM）在组织蛋白酶B测定缓冲液（pH 5.5，2.5 mM DTT）中于37℃孵育15-60分钟。测定荧光强度（激发波长λex=360-380 nm，发射波长λem=440-460 nm）。组织蛋白酶B活性以相对荧光单位（RFU）/min/mg蛋白表示。该测定方法用于评估组织蛋白酶B抑制剂的体内疗效，并研究疾病模型中组织蛋白酶B的表达。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
精氨酸-精氨酸-AMC乙酸酯（C22H33N9O4·xC2H4O2，分子量：游离碱约487.55，乙酸盐约547.6，纯度≥69%肽含量）为固体粉末。储存时，粉末应密封避光，于-80℃保存长达2年，或于-20℃保存长达1年。体外实验时，可配制浓度≥100 mg/mL的水溶液，于-80℃保存长达6个月，或于-20℃保存1个月。乙酸盐形式可提高水溶性。暂无药代动力学数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
未报告该底物的具体毒性数据。作为一种研究级荧光底物，它不适用于人类或兽医用途。应遵循标准的实验室化学品安全操作规程。AMC荧光团在检测所用浓度（微摩尔级）下毒性较低。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Arg-Arg-AMC乙酸酯是一种荧光底物，可用于检测组织蛋白酶B。组织蛋白酶B是一种溶酶体半胱氨酸蛋白酶，参与蛋白质降解、抗原加工和肿瘤细胞侵袭。组织蛋白酶B在多种人类癌症中过度表达，包括胶质母细胞瘤、乳腺癌、前列腺癌、肺癌和结直肠癌，其活性与不良预后相关。Arg-Arg-AMC底物是生化和细胞实验中测定组织蛋白酶B活性最常用的底物之一。它可用于高通量筛选组织蛋白酶B抑制剂，以期发现潜在的抗癌和抗关节炎药物。该化合物仅供研究使用，不具有临床应用价值。
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| 分子式 |
C22H33N9O4.XC2H4O2
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|---|---|
| 分子量 |
487.56 (free base)
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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