(R)-(+)-O-Demethylbuchenavianine

目录号: V87892 纯度: ≥98%
(R)-(+)-O-脱甲基布陈维氨酸是一种细胞周期依赖性激酶 (CDK) 抑制剂。
(R)-(+)-O-Demethylbuchenavianine CAS号: 1364123-68-1
产品类别: CDK
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
(R)-(+)-O-去甲基布氏腺嘌呤是一种细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK) 抑制剂。(R)-(+)-O-去甲基布氏腺嘌呤分别以 1.1、0.95、>10、>10 和 >10 μM 的 IC50 值抑制 CDK1、CDK5、糖原合成酶激酶 3 (GSK3)、cdc2 样激酶 (CLK1) 和双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶 1A (DYRK1A)。
(R)-(+)-O-去甲基布切纳维宁是一种手性黄酮生物碱,属于哌啶类黄酮,其特征在于5,7-二羟基黄酮核心在C-8位与1-甲基哌啶-2-基部分连接。它是一种细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂,对CDK1的IC50值为1.1 microM,对CDK5的IC50值为0.95 microM,对GSK3、CLK1和DYRK1A的活性较低(>10 microM)。CAS号:1364123-68-1。
生物活性&实验参考方法
靶点
CDK5 0.95 μM (IC50) CDK1 1.1 μM (IC50) CLK1 DYRK1A GSK-3
(R)-(+)-O-Demethylbuchenavianine targets cyclin-dependent kinases (CDKs), specifically CDK1 and CDK5. CDK1 is a master regulator of the cell cycle, controlling G2/M transition. CDK5 is primarily active in post-mitotic neurons, regulating neuronal migration, synaptic plasticity, and cytoskeletal dynamics. The compound inhibits CDK1 with an IC50 of 1.1 microM and CDK5 with an IC50 of 0.95 microM. It also shows weak inhibitory activity against glycogen synthase kinase 3 (GSK3), cdc2-like kinase (CLK1), and dual specificity tyrosine-phosphorylation-regulated kinase 1A (DYRK1A) with IC50 values >10 microM. This selectivity suggests it may be useful for studying CDK5-related neurological pathways.
体外研究 (In Vitro)
体外实验表明,(R)-(+)-O-去甲基布切纳维宁对 CDK1 和 CDK5 激酶活性具有抑制作用,IC50 值分别为 1.1 uM 和 0.95 uM。该化合物对 CDK1 和 CDK5 的选择性高于 GSK3、CLK1 和 DYRK1A(对它们的 IC50 值均大于 10 uM)。搜索结果中未报道具体的细胞活性数据(例如,CDK1 依赖性癌细胞的细胞周期阻滞,以及 CDK5 抑制神经元的神经突生长)。该化合物可用于研究 CDK1 在细胞周期调控中的作用以及 CDK5 在神经元功能和神经退行性疾病中的作用。目前尚未报道 CDK2、CDK4 或 CDK6 的 IC50 值。该化合物可能还会抑制其他激酶;因此需要进行更广泛的激酶谱分析。
体内研究 (In Vivo)
搜索结果中未报告(R)-(+)-O-去甲基布切纳维宁的体内活性数据。作为一种CDK1和CDK5抑制剂,该化合物可能在癌症模型(CDK1抑制可导致G2/M期阻滞和细胞凋亡)或神经系统疾病模型(CDK5失调与阿尔茨海默病、帕金森病和肌萎缩侧索硬化症相关)中进行体内评估。该化合物可用于CDK1依赖性癌症(例如某些乳腺癌、卵巢癌或结直肠癌)的小鼠异种移植模型,或tau蛋白病转基因小鼠模型(CDK5磷酸化tau蛋白,促进神经原纤维缠结的形成)。然而,搜索结果中未提供此类体内数据。
酶活实验
使用纯化的重组人 CDK1/cyclin B 或 CDK5/p25(或 p35)复合物,通过标准体外激酶活性测定法测定化合物与 CDK1 和 CDK5 的结合亲和力。将化合物与激酶、底物(例如,CDK1 的底物为组蛋白 H1,CDK5 的底物为肽)和 ATP(放射性测定法使用 γ-32P-ATP,非放射性测定法使用 ADP-Glo™)孵育。孵育后,通过闪烁计数法测定放射性掺入量,或通过发光法测定 ADP 生成量。IC50 值(CDK1 为 1.1 uM,CDK5 为 0.95 uM)根据剂量-反应曲线(0.001-100 uM)计算得出。使用各自的重组酶和特异性底物进行平行测定,以验证化合物对 GSK3、CLK1 和 DYRK1A 的选择性。
细胞实验
检索结果中未提及(R)-(+)-O-去甲基布氏腺嘌呤的细胞检测方法。对于细胞CDK抑制研究,可将癌细胞系(例如HeLa、MCF-7、A549、HCT116)接种于6孔或96孔板中,并用不同浓度(0.1-100 uM)的(R)-(+)-O-去甲基布氏腺嘌呤处理24-72小时。采用碘化丙啶染色和流式细胞术进行细胞周期分析,以检测G2/M期阻滞(CDK1抑制的标志)。采用MTT或CellTiter-Glo法评估细胞活力,并计算IC50值。对于 CDK5 特异性检测,将神经元细胞系(例如 SH-SY5Y、Neuro2a 或原代皮层神经元)用该化合物处理,并通过蛋白质印迹法,使用磷酸化特异性抗体(例如 AT8、PHF1、pSer396)评估 tau 蛋白在 CDK5 特异性位点(例如 Ser202、Thr205、Ser396、Ser404)的磷酸化水平。目前尚无相关数据报道。
动物实验
检索结果中未提及(R)-(+)-O-去甲基布切纳维宁的动物实验。为进行CDK1抑制的体内评估,将携带CDK1依赖性癌细胞系皮下肿瘤异种移植瘤的6-8周龄雌性BALB/c裸鼠,以10-100 mg/kg/天的剂量,每日口服或腹腔注射该化合物,持续2-4周。测量肿瘤体积,并通过流式细胞术分析肿瘤细胞周期阻滞和凋亡(通过caspase-3激活)。为进行CDK5相关神经系统研究,可使用该化合物治疗转基因tau蛋白病小鼠(例如P301S、rTg4510)或阿尔茨海默病模型小鼠,并评估tau蛋白磷酸化、神经炎症和认知功能(莫里斯水迷宫)。但未提供此类数据。
药代性质 (ADME/PK)
(R)-(+)-O-去甲基布氏腺嘌呤 (C21H21NO4,分子量 = 351.40) 为固体粉末。储存时,应密封保存于 -20℃,避光防潮。体外实验中,DMSO 储备液(10-50 mM)可在 -80℃ 保存长达 6 个月,或在 -20℃ 保存 1 个月。由于其亲脂性黄酮结构,该化合物的水溶性可能较低。体内实验中,可配制于 10% DMSO / 40% PEG300 / 5% Tween-80 / 45% 生理盐水或 0.5% 甲基纤维素 / 0.1% Tween-80 溶液中。纯度 ≥98% (HPLC)。未报道详细的药代动力学参数(口服生物利用度、Cmax、Tmax、半衰期、脑渗透率)。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
检索结果中未报告(R)-(+)-O-去甲基布切纳维宁的具体毒性数据。作为一种研究级化合物,它不适用于人体。处理激酶抑制剂时应遵循标准的实验室安全预防措施。由于其对CDK1(一种对正常细胞分裂至关重要的细胞周期调节因子)的抑制作用,全身性抑制CDK1可能导致显著毒性,包括骨髓抑制、胃肠道毒性和脱发,与其他CDK1抑制剂类似。然而,目前尚未有此类毒性研究的报道。也没有LD50或正式的毒理学数据。
参考文献

[1]. Synthesis, biological evaluation, and molecular modeling of natural and unnatural flavonoidal alkaloids, inhibitors of kinases. J Med Chem. 2012 Mar 22;55(6):2811-9.

其他信息
(R)-(+)-O-去甲基布切纳维宁是一种研究级天然产物衍生物(手性黄酮生物碱),分离或合成后被用作研究细胞周期蛋白依赖性激酶的工具。其结构特征为5,7-二羟基黄酮核心与C-8位的1-甲基哌啶-2-基部分相连。该化合物是布切纳维宁的O-去甲基化衍生物,布切纳维宁是一种存在于某些植物(可能是布切纳维亚属植物)中的生物碱。它对CDK1和CDK5具有选择性(IC50约为1 μM),而对GSK3、CLK1和DYRK1A的选择性则高于10 μM。CDK5是阿尔茨海默病的一个极具吸引力的靶点,因为CDK5过度激活会导致tau蛋白过度磷酸化、神经原纤维缠结形成和神经退行性变。该化合物有望成为开发更强效、更具选择性的 CDK5 抑制剂的先导化合物,用于治疗阿尔茨海默病和其他 tau 蛋白病。该化合物仅供研究使用,尚未进入临床试验或获得监管部门批准。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C21H21NO4
分子量
351.40
精确质量
351.147
CAS号
1364123-68-1
PubChem CID
57342709
外观&性状
Solid powder
tPSA
70
氢键供体(HBD)数目
2
可旋转键数目(RBC)
2
重原子数目
26
分子复杂度/Complexity
556
定义原子立体中心数目
1
SMILES
CN1CCCC[C@@H]1C2=C(C=C(C3=C2OC(=CC3=O)C4=CC=CC=C4)O)O
InChi Key
BBZGOLNDVQZCIH-CQSZACIVSA-N
InChi Code
InChI=1S/C21H21NO4/c1-22-10-6-5-9-14(22)19-15(23)11-16(24)20-17(25)12-18(26-21(19)20)13-7-3-2-4-8-13/h2-4,7-8,11-12,14,23-24H,5-6,9-10H2,1H3/t14-/m1/s1
化学名
5,7-dihydroxy-8-[(2R)-1-methylpiperidin-2-yl]-2-phenylchromen-4-one
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.8458 mL 14.2288 mL 28.4576 mL
5 mM 0.5692 mL 2.8458 mL 5.6915 mL
10 mM 0.2846 mL 1.4229 mL 2.8458 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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