| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PKA RII peptide TFA targets protein kinase A (PKA) as a substrate, but it is not an inhibitor; rather, it is used to measure PKA activity or as a substrate for subsequent detection of calcineurin. For calcineurin assays, the phosphorylated peptide serves as a substrate for the phosphatase, allowing quantification of calcineurin activity.
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| 体外研究 (In Vitro) |
PKA RII肽TFA本身没有直接的生物活性。它是一种底物肽,当与PKA在ATP存在下孵育时,其丝氨酸残基(通常是序列中的Ser15或Ser16)会被磷酸化。磷酸化后的肽随后可用于检测钙调磷酸酶的活性,方法是通过测量游离磷酸盐的释放或使用偶联酶法。该肽不具有细胞毒性或药理活性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
目前尚未报道PKA RII肽TFA具有直接的体内活性,因为它是一种用于体外检测的生化工具。该肽用于无细胞体系或细胞裂解液中,以测定内源性PKA或钙调磷酸酶的活性,但并不作为治疗或研究药物进行全身给药。其用途在于定量组织或细胞提取物中的酶活性。
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| 酶活实验 |
PKA RII 肽 TFA 的活性评估采用钙调磷酸酶法,使用肽的磷酸化形式。典型的实验中,首先在 ATP 存在下用 PKA 对肽进行磷酸化。纯化磷酸化肽后,将其与纯化的钙调磷酸酶或含有钙调磷酸酶的细胞裂解液在磷酸酶缓冲液中孵育。游离磷酸盐的释放可通过孔雀石绿或 Biomol Green 法测定,或使用产生比色或荧光信号的偶联酶系统进行测定。
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| 细胞实验 |
PKA RII 肽 TFA 不直接用于基于细胞的活性测定。相反,使用含有 PKA 或钙调磷酸酶的细胞裂解液作为酶源。细胞(例如 HEK293、Neuro2a)在提取缓冲液中裂解,裂解液经离心澄清。测定 PKA 活性时,将裂解液与肽、ATP 和 PKA 特异性缓冲液孵育,并测定磷酸盐的掺入量。测定钙调磷酸酶活性时,将裂解液与预磷酸化的肽在钙和钙调蛋白存在下孵育。
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| 动物实验 |
PKA RII 肽 TFA 不直接用于动物实验。然而,可以制备动物组织(例如小鼠脑、心脏、肝脏)的裂解液,并如上所述用于体外 PKA 或钙调磷酸酶活性测定。例如,可以用药物处理小鼠以调节 PKA 或钙调磷酸酶活性,然后收集组织,裂解,并用该肽来测定裂解液中这些酶的活性。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
PKA RII 肽 TFA (C₉4H1₅1F3N2₈O31,分子量 = 2226.37) 是一种由 19 个氨基酸组成的肽,序列为 DLDVPIPGRFDRRVSVAAE。它在水中的溶解度为 25 mg/mL (11.23 mM)。粉末应密封保存,避光,在 -80℃ 下可保存长达 2 年,或在 -20℃ 下可保存长达 1 年。储备液在 -80℃ 下可稳定保存 6 个月,或在 -20℃ 下可稳定保存 1 个月。目前尚无体内药代动力学数据。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
目前尚无PKA RII肽TFA的毒性数据报告。作为一种用作生化工具的合成肽,它不适用于人类或兽医用途。处理肽类时应遵循标准的实验室安全预防措施,包括避免吸入、摄入和皮肤接触。在酶活性测定中使用的浓度(微摩尔范围)下,肽类通常被认为毒性较低。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
PKA RII 肽 TFA 是一种成熟的生化工具,用于研究 PKA 和钙调磷酸酶信号通路。它来源于蛋白激酶 A 的调节亚基 II,并含有典型的 PKA 磷酸化位点 (Arg-Arg-X-Ser)。磷酸化后,它可作为钙调磷酸酶(蛋白磷酸酶 2B)的特异性底物。该肽仅供研究使用,不具有任何临床或治疗用途,也未获得任何适应症的监管批准。
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| 分子式 |
C94H151F3N28O31
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|---|---|
| 分子量 |
2226.37
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : 25 mg/mL (11.23 mM; with sonication)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 0.4492 mL | 2.2458 mL | 4.4916 mL | |
| 5 mM | 0.0898 mL | 0.4492 mL | 0.8983 mL | |
| 10 mM | 0.0449 mL | 0.2246 mL | 0.4492 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。