PNC-27 acetate

目录号: V88518 纯度: ≥98%
PNC-27 醋酸盐是一种嵌合 p53 穿透肽,可与 p53 肽样结构的 HDM-2 结合,诱导选择性膜孔形成并导致癌细胞裂解。
PNC-27 acetate 产品类别: p53
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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产品描述
PNC-27 乙酸酯是一种嵌合型 p53 穿透肽,它以类似 p53 肽的结构与 HDM-2 结合,诱导选择性膜孔形成,最终导致癌细胞裂解。PNC-27 乙酸酯是一种用于急性髓系白血病研究的抗癌肽。
PNC-27 乙酸酯是一种具有膜穿透特性的嵌合 p53 肽。它由一个 HDM-2 结合的 p53 肽和一个膜穿透肽(p28,一种蓝铜蛋白片段)连接而成。PNC-27 是一种抗癌肽,它能与细胞膜上的 HDM-2 结合,诱导选择性膜孔形成,从而导致癌细胞快速溶解和坏死。它被用于急性髓系白血病 (AML) 和其他癌症的研究。
生物活性&实验参考方法
靶点
HDM‑2 (human double minute 2 protein), specifically the membrane‑bound form on cancer cells. PNC-27 binds to HDM‑2, forming pores in the cancer cell membrane, which leads to osmotic lysis and cell death.
体外研究 (In Vitro)
PNC-27 醋酸盐(50 μg/mL;0-3 小时)可诱导癌细胞死亡[1]。PNC-27 醋酸盐(50 μg/mL;15 分钟)可与 A2058 和 MCF-7 细胞中的细胞膜结合的 HDM-2 结合[1]。
体外实验表明,PNC-27 醋酸酯(50 ug/mL,0-3 小时)可迅速诱导癌细胞死亡。它能在 15 分钟内与 A2058 黑色素瘤细胞和 MCF-7 乳腺癌细胞膜上的 HDM-2 结合。该肽已被证实能以时间和浓度依赖的方式诱导多种人类癌细胞的裂解,且对正常人体细胞无明显毒性。它对白血病细胞系也有效。
体内研究 (In Vivo)
PNC-27(腹腔注射;40 mg/kg;每日;2-3 周)醋酸盐在小鼠中显示出抗白血病活性[2]。
在体内实验中,PNC-27醋酸酯已在包括黑色素瘤和胰腺癌在内的多种人类癌症的小鼠异种移植模型中展现出抗肿瘤活性。它能抑制肿瘤生长并诱导肿瘤坏死,且全身毒性极低。目前,PNC-27醋酸酯正被研究用于治疗急性髓系白血病(AML)和其他恶性肿瘤,并有望杀死耐药癌细胞。
酶活实验
目前尚无通用的无细胞膜孔形成评估方法。可使用荧光偏振法评估HDM-2的结合。将重组HDM-2蛋白与荧光标记的p53肽(FAM-p53)在结合缓冲液中孵育。加入不同浓度的PNC-27乙酸盐以竞争性抑制HDM-2的结合,并通过测量荧光偏振的降低来计算IC50值。
细胞实验
细胞毒性试验[1]
细胞类型: MIA-PaCa-2
测试浓度: 50 μg/mL
孵育时间: 0-3 小时
实验结果: 90 分钟内诱导 100% 细胞死亡。
PNC-27醋酸酯的一般细胞实验方案:将癌细胞(例如A2058黑色素瘤细胞、MCF-7乳腺癌细胞或AML细胞系)接种于96孔板中。用浓度分别为10、25、50、100和200 ug/mL的PNC-27醋酸酯处理细胞1、2、3、4和6小时。采用MTT法或台盼蓝染色排除法评估细胞活力。在机制研究中,用50 ug/mL的PNC-27醋酸酯处理细胞15、30、60和120分钟,并使用抗HDM-2抗体通过流式细胞术评估HDM-2结合情况。通过测量乳酸脱氢酶(LDH)释放量来评估膜孔形成情况。
动物实验
动物/疾病模型:MllPTD/WT/Flt3ITD/ITD AML 小鼠[2]
剂量: 40 mg/kg
给药途径: 腹腔注射;40 mg/kg;每日一次;2 或 3 周
实验结果: AML 植入减少,生存期延长。
PNC-27醋酸盐的通用动物实验方案:将5×10⁶个A2058黑色素瘤细胞或其他癌细胞皮下植入雌性NOD/SCID小鼠体内。当肿瘤体积达到约150 mm³时,将小鼠随机分组(每组n=8)。将PNC-27醋酸盐配制于无菌生理盐水或PBS中,通过腹腔注射(IP)或瘤内注射(IT)给药,剂量分别为10、20和40 mg/kg/天或隔日一次,持续14-21天。每周测量两次肿瘤体积。实验结束时,收集肿瘤组织进行组织病理学(H&E染色、坏死染色)、免疫组化(HDM-2、Ki-67)和TUNEL染色。采集血液样本进行血清生化(LDH)和血液学分析。
药代性质 (ADME/PK)
PNC-27 醋酸酯的通用药代动力学方案:将该肽通过腹腔注射 (IP) (10 mg/kg) 和静脉注射 (IV) (2 mg/kg) 的方式给药于小鼠。分别于 0.083、0.25、0.5、1、2、4、8 和 24 小时采集血样。采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 定量分析血浆浓度。计算药代动力学参数(Cmax、Tmax、AUC、t1/2、清除率、Vd 和腹腔注射生物利用度)。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
PNC-27醋酸盐的一般毒性试验方案:在ICR小鼠中进行为期14天的重复给药腹腔注射毒性研究。PNC-27醋酸盐的给药剂量分别为10、30和60 mg/kg/天。试验参数包括临床症状、体重、食物消耗量、血液学(血常规、分类计数)、血清生化(LDH、ALT、AST、BUN、肌酐)以及主要器官(肝、肾、脾、心、肺、胰腺)的组织病理学检查。
参考文献

[1]. Anticancer peptide PNC-27 adopts an HDM-2-binding conformation and kills cancer cells by binding to HDM-2 in their membranes. Proc Natl Acad Sci U S A. 2010 Feb 2;107(5):1918-23.

[2]. Targeting cell membrane HDM2: A novel therapeutic approach for acute myeloid leukemia. Leukemia. 2020 Jan;34(1):75-86.

[3]. PNC-27, a Chimeric p53-Penetratin Peptide Binds to HDM-2 in a p53 Peptide-like Structure, Induces Selective Membrane-Pore Formation and Leads to Cancer Cell Lysis. Biomedicines. 2022 Apr 20;10(5):945.

其他信息
PNC-27 乙酸酯的分子式为 C188H293N53O44S·xC2H2O2,分子量约为 4031.73 g/mol(游离碱)。该化合物以固体形式储存于 -80℃。PNC-27 可选择性地靶向并杀死表达膜结合型 HDM-2 的癌细胞。研究表明,它能有效杀死多种实体瘤和血液系统恶性肿瘤(包括急性髓系白血病 (AML) 和耐药性肿瘤)的癌细胞。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C188H293N53O44S.XC2H2O2
分子量
4031.73 (free base)
外观&性状
Solid powder
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : 25 mg/mL
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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