| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 100mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
METTL16 (Methyltransferase-like protein 16). METTL16 is an RNA methyltransferase that methylates adenosine residues in RNA molecules, particularly U6 snRNA at position 47. METTL16-IN-1 inhibits the activity of METTL16.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在无细胞实验中，METTL16-IN-1 能抑制 METTL16 甲基转移酶活性，IC₅0 为 1.7 uM，Kd 为 1.35 uM。它还能抑制 U6 snRNA 缺失与 METTL16 甲基转移酶结构域 (MTD) 的结合，IC₅0 为 2.5 uM。METTL16-IN-1 具有抗肿瘤活性，表明其有望成为研究 METTL16 在癌症中作用的研究工具。
|
| 酶活实验 |
一种用于评估 METTL16 甲基转移酶活性的通用无细胞方案：采用放射性或荧光法进行甲基转移酶活性测定。将重组 METTL16 蛋白 (100 nM) 与 3′-生物素标记的 U6 snRNA 底物 (1 uM) 在含有 1 uM S-腺苷-L-蛋氨酸 (SAM) 的测定缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 8.0，150 mM NaCl，1 mM DTT，0.01% Tween-20）中孵育。加入不同浓度的 METTL16-IN-1 (0.01 nM 至 100 uM)。反应在 30℃ 下孵育 60 分钟。通过加热至 65℃ 5 分钟终止反应。将生物素标记的 RNA 底物捕获到链霉亲和素包被的微孔板上。使用与辣根过氧化物酶 (HRP) 偶联的抗甲基化腺苷 (m⁶A) 抗体检测甲基化 RNA，随后加入化学发光或比色底物。IC₅0 由抑制曲线计算得出。Kd 的测定采用表面等离子共振 (SPR) 法。将 METTL16 蛋白固定在传感器芯片上，并将不同浓度的 METTL16-IN-1 溶液流过芯片。测量结合和解离速率以计算 Kd 值。U6 snRNA 结合抑制实验采用荧光偏振 (FP) 法。将 METTL16 MTD（甲基转移酶结构域）蛋白与荧光标记的 U6 snRNA 探针（U6 snRNA 缺失突变体）孵育。测量结合后 FP 信号的增加。加入不同浓度的 METTL16-IN-1 以竞争结合，并计算 IC₅0 值。
|
| 细胞实验 |
评估 METTL16 抑制和 m⁶A 水平的通用细胞实验方案：将癌细胞（例如 HeLa、HEK293T 或其他表达 METTL16 的癌细胞系）以 2×10⁵ 个细胞/孔的密度接种于 6 孔板中。24 小时后，用不同浓度的 METTL16-IN-1（0.1、0.5、1、2.5、5、10、25、50 uM）处理细胞 48 小时。使用 TRIzol 试剂从处理后的细胞中提取总 RNA。为了定量 m⁶A，将 RNA 变性后加入 m⁶A ELISA 试剂盒的孔中。根据制造商的说明测量 RNA 样品中的 m⁶A 水平。对于 METTL16 靶基因的 qRT-PCR 分析，首先将 RNA 反转录为 cDNA，然后使用 TaqMan 或 SYBR Green qPCR 检测 METTL16 靶基因（例如 MAT2A）的表达。GAPDH 或 β-actin 用作上样对照。对于细胞活力检测，将细胞接种于 96 孔板中，并用 METTL16-IN-1 处理 72 小时。使用 MTT 或 CellTiter-Glo 法评估细胞活力。使用 Annexin V-FITC/PI 双染法通过流式细胞术评估细胞凋亡。
|
| 动物实验 |
评估METTL16-IN-1在异种移植模型中抗肿瘤活性的通用动物实验方案：将5×10⁶个表达METTL16的癌细胞（例如HeLa、HCT116或A549细胞）悬浮于0.1 mL PBS与Matrigel（1:1）的混合液中，皮下注射至雌性BALB/c裸鼠体内。当平均肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为治疗组（每组n=8-10）。将METTL16-IN-1配制成合适的溶剂（例如10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80、45%生理盐水），并通过灌胃或腹腔注射给药，剂量分别为10、30和100 mg/kg，每日一次，连续给药14-21天。实验设置溶剂对照组。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积，并记录体重。研究结束时，处死小鼠，切除肿瘤并称重。从肿瘤组织中提取总RNA，并通过ELISA检测m⁶A水平。采用qRT-PCR检测METTL16靶基因的表达。同时，对肿瘤组织进行免疫组织化学染色（Ki-67和cleaved caspase-3）。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
METTL16-IN-1 的一般药代动力学方案：雄性 Sprague-Dawley 大鼠分别通过灌胃（PO，10 mg/kg）和静脉注射（IV，2 mg/kg）给药 METTL16-IN-1。该化合物配制于赋形剂中，例如 10% DMSO、40% PEG300、5% Tween-80 和 45% 生理盐水。分别于给药后 0.083、0.25、0.5、1、2、4、8、12 和 24 小时采集血样。采用 LC-MS/MS 法定量测定血浆中 METTL16-IN-1 的浓度。使用非房室模型分析计算药代动力学参数（Cmax、Tmax、AUC、t½、清除率、Vd 和口服生物利用度）。 METTL16-IN-1 的分子式为 C1₉H12BrN3O₆S2，其分子量可由该分子式计算得出。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
METTL16-IN-1 的一般毒性试验方案：在 ICR 小鼠中进行为期 14 天的重复给药口服毒性研究。METTL16-IN-1 通过灌胃法给药，剂量分别为 30、100 和 300 mg/kg/天，连续 14 天。每日监测临床症状、体重和食物消耗量。研究结束时，采集血液样本进行血液学检查（全血细胞计数及分类）和血清生化检查（ALT、AST、ALP、BUN、肌酐、总蛋白、白蛋白、葡萄糖）。进行大体解剖，并记录主要器官（肝脏、肾脏、脾脏、心脏、肺脏、脑、睾丸）的重量。对这些器官进行组织病理学检查。由于 METTL16 参与 RNA 甲基化，因此对增殖活性高的组织（如骨髓和胃肠道）给予特别关注，以防出现骨髓抑制或胃肠道毒性。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
METTL16-IN-1（化合物45）是一种强效的RNA甲基转移酶METTL16抑制剂。其分子式为C1₉H12BrN3O₆S2，包含一个溴原子。该化合物对METTL16的抑制IC₅₀值为1.7 μM，Kd值为1.35 μM，并且对U6 snRNA-METTL16相互作用的抑制IC₅₀值为2.5 μM。METTL16-IN-1具有抗肿瘤活性，是研究METTL16和RNA甲基化（m⁶A）在癌症生物学中作用的重要研究工具。METTL16正逐渐成为多种恶性肿瘤（包括急性髓系白血病（AML）和肝细胞癌（HCC））的潜在治疗靶点。
|
| 分子式 |
C19H12BRN3O6S2
|
|---|---|
| 分子量 |
522.35
|
| 外观&性状 |
Brown to reddish brown solid powder
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9144 mL | 9.5721 mL | 19.1443 mL | |
| 5 mM | 0.3829 mL | 1.9144 mL | 3.8289 mL | |
| 10 mM | 0.1914 mL | 0.9572 mL | 1.9144 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
DNMT2-IN-2
DNMT1 aptamer sodium
MH44
METTL1-WDR4-IN-1 TFA
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
