| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 500mg | ||
| 1g | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
Lipid membrane
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| 体外研究 (In Vitro) |
Claramine（2-20 μM；20 小时）浓度低于 10 μM 时，不会影响人类神经母细胞瘤细胞 (SH-SY5Y) 的细胞活力。Claramine（2-20 μM；20 小时）不会影响 HEK293 细胞的细胞活力[1]。Claramine（2.5-10 μM；20 小时）通过抑制成孔剂蜂毒肽 (HY-P0233)（4 μM；20 小时）和 α-溶血素 (50 μg/mL；20 小时）与细胞膜的结合，保护人类神经母细胞瘤 (SH-SY5Y) 细胞免受其侵害[1]。
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| 酶活实验 |
蜂毒素结合细胞膜[1]
为了标记蜂毒，将300 μM Alexa Fluor 488 n -羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯（琥珀酰亚胺酯）与900 μM蜂毒在0.1 mM碳酸氢钠缓冲液（pH 8.0）中轻摇培养2小时。将SH-SY5Y细胞接种于玻璃罩上，在0.1、1.0和10 μM 的claramine不存在或存在的情况下，用0.2 μM标记的melittin处理5min。孵育后，用磷酸缓冲盐水（PBS）洗涤细胞，并用5 μg/mL Alexa Fluor 633结合的小麦胚芽凝集素反染。用PBS洗涤后，将细胞固定在2%多聚甲醛中。采用60倍油浸物镜扫描共聚焦显微镜系统，在488和633 nm处双激发后检测荧光发射。获取一系列1.0 μm厚的光学切片（1024 × 1024），并将所有切片叠加投影为单幅合成图像。ImageJ用于计算细胞膜与蜂毒素共定位的百分比。 α-溶血素结合细胞膜[1] 将SH-SY5Y细胞接种于玻璃罩上，在0.1 μM和10 μM 的claramine不存在或不存在的情况下，用5 μg/mL（如单体当量约0.15 μM） α-溶血素处理15 min。孵育后，用PBS洗涤细胞，用10 μg/ml Alexa Fluor 633结合的小麦胚芽凝集素反染，用2%多聚甲醛固定。PBS洗涤后，用1:7 0稀释的兔抗葡萄球菌α-毒素一抗和1:100稀释的Alexa Fluor 488偶联抗兔二抗检测α-溶血素的存在。采用上述扫描共聚焦显微镜系统，使用20倍物镜，在488和633 nm处双激发后检测荧光发射。获取一系列1.0 μm厚的光学切片（1024 × 1024），并将所有切片叠加投影为单幅合成图像。ImageJ计算细胞膜与α-溶血素共定位的百分比。[1] < br > 浊度测量[1] 从ANS制备中获得的相同样品使用光谱扫描板阅读器进行吸光度分析。在CD， ANS和浊度测量中，我们选择仅探测30 μM，因为在没有蜂毒的情况下，40和50 μM浓度的claramine在没有蓝移的情况下会引起ANS荧光强度的增加，这表明在如此高浓度的claramine与ANS之间可能存在亲和效应。而 浓度在30 μM及以下时，对游离ANS的信号及其吸光度没有明显的改变（图S10）。我们注意到，与组织培养实验相比，有必要在这些体外测量中使用比组织培养实验高5倍的蜂毒素浓度，以解决肽单独产生的充分且可重复的信号。 |
| 细胞实验 |
MTT还原试验[1]
将蜂毒素（2 μM，单体当量）或α-溶血素（50 μg/mL，约1.5 μM，单体当量）加入细胞培养液中，在37°C的静态条件下，添加或不添加CL浓度孵育1 h。孵育后，将96孔板中细胞的培养基替换为上述含有蜂毒素和claramine的溶液，孵育20小时或30分钟，如文中所示。细胞处理后，按照前面描述的方法进行3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基溴化四唑还原试验。 细胞内ROS 的测定[1] SH-SY5Y细胞接种于玻璃罩上，在0.01 ~ 10 μM claramine存在或不存在的情况下，分别加入蜂毒素（0.1 μM，单体当量）或α-溶血素（50 μg/mL，单体当量）5 min或1 min。为了检测细胞内ROS的产生，在上述处理期间，细胞被加载10 μM的6-氯甲基-2 ',7 ' -二氯二氢荧光素（CM-H2DCFDA）。用尼康C2扫描激光共聚焦显微镜系统分析所得荧光。采用60×油浸物镜的Nikon Eclipse Ti倒置显微镜，取1024 × 1024或2048 × 2048厚度的光学切片，通过叠加投影形成单幅合成图像。将共聚焦显微镜设置在最佳采集条件下，如针孔直径、探测器增益和激光功率。所有图像采集的设置保持不变。在图1C和3B中，同样的图像在亮度和对比度增强的情况下显示出来，这样所有的细胞都可以被可视化（图S9），包括那些荧光信号较低的细胞。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
细胞膜的分子组成在介导细胞对毒性分子诱导的扰动的敏感性方面起着关键作用。因此，通过药理学方法调控细胞膜的特性，有望增强细胞对多种化学和生物化合物的抵抗力。本研究探讨了克拉明（一种可透过血脑屏障的氨基甾醇类小分子）中和急性生物威胁因子毒性的能力，这些因子包括蜜蜂毒液中的蜂毒肽和金黄色葡萄球菌的α-溶血素。结果表明，克拉明通过阻止这些成孔剂与细胞膜的相互作用来中和其毒性，且不会以可检测的方式扰乱细胞膜的结构。因此，我们证明外源性施用氨基甾醇可以调节脂质膜的特性，并保护细胞免受多种生物毒素的侵害，这些毒素不仅包括先前报道的错误折叠蛋白寡聚体，还包括生物蛋白毒素。我们的研究结果表明，对细胞膜理化性质调节因子的研究为开发对抗与细胞膜破坏相关的多种细胞毒性效应的对策提供了新的契机。[1]
总之，这些发现共同表明，克拉明是一种能够有效保护细胞免受膜破坏性毒素侵害的分子。由于氨基甾醇已被证实能够与细胞膜结合，降低其负电荷，从而诱导胆固醇和神经节苷脂GM1分子的重新分布，并增强其对压痕或寡聚体嵌入的抵抗力，因此，这种氨基甾醇以及其他氨基甾醇可能为保护细胞质膜免受多种与多种人类疾病相关的毒性生物分子侵害提供一种独特的治疗方法。 |
| 分子式 |
C37H72N4O
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|---|---|
| 分子量 |
588.99
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| CAS号 |
1430194-56-1
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| 相关CAS号 |
3030428-57-7 (TFA)
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6978 mL | 8.4891 mL | 16.9782 mL | |
| 5 mM | 0.3396 mL | 1.6978 mL | 3.3956 mL | |
| 10 mM | 0.1698 mL | 0.8489 mL | 1.6978 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
3,3,3-三氟乳酸
PROTAC(H-PGDS)-8
CCNC1%3dC2C%3dC3C(%3dCC2%3dNC%3dC1)OCO3)
1,2-Ethanediamine, N2-1,3-dioxolo[4,5-g]quinolin-8-yl-N1,N1-dimethyl-
N%3dC(Cl)S1)
2,4-二氯噻唑-5-甲醛
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