| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PRMT5 (IC50 = 1 nM)
PRT-543 targets protein arginine methyltransferase 5 (PRMT5), an enzyme that symmetrically dimethylates arginine residues (SDMA) on various protein substrates essential for spliceosome assembly and RNA processing. The compound binds the SAM-binding pocket of the PRMT5/MEP50 complex with high affinity, confirmed by co-crystal structure at 2.5 Angstrom resolution. A key structural feature is the dichloride phenyl ring that displaces F327 and forms a unique pi-pi interaction with Y324 in the alpha1 helix, conferring selectivity. PRT543 is highly selective against 37 other methyltransferases. The primary pharmacodynamic effect is reduction of symmetrically dimethylated SmD3, a core splicing factor and PRMT5 substrate. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
PRT543 是一种高效、选择性的口服 PRMT5 抑制剂，具有显著的临床前疗效。作为一种口服小分子蛋白精氨酸甲基转移酶 5 (PRMT5) 抑制剂，PRT543 显示出强大的抗增殖和抗肿瘤活性。尽管其确切的作用机制尚未完全阐明，但据报道，PRMT5 抑制剂 PRT543 可选择性地结合 PRMT5 的底物识别位点并抑制其甲基转移酶活性。这会降低组蛋白 H2A、H3 和 H4 中单甲基化和二甲基化精氨酸残基的水平，并调节参与多种细胞过程（包括细胞增殖）的基因表达。因此，PRT543 可能增加抗增殖基因的表达和/或降低促进细胞增殖基因的表达，从而导致包括癌细胞在内的快速增殖细胞的生长减缓。 PRTM5 是一种精氨酸甲基转移酶，可催化组蛋白和多种其他蛋白质底物上 ω-N 单甲基精氨酸 (MMA) 和对称二甲基精氨酸 (sDMA) 的形成，在多种肿瘤中过度表达[2]。
PRT-543 在无细胞酶活性测定中能有效降低 PRMT5/MEP50 复合物的甲基转移酶活性。它能显著抑制多种癌细胞系的增殖，尤其对剪接因子突变型白血病模型具有显著的抑制作用。该化合物与携带剪接因子突变（SF3B1、U2AF1、SRSF2）的细胞表现出合成致死性，这些细胞对 PRMT5 抑制剂的敏感性高于野生型细胞。PRT-543 处理可导致 SDMA 标记呈剂量依赖性降低，并诱导 RNA 剪接发生广泛的全局性改变，包括内含子保留和外显子跳跃。受影响的基因包括参与干扰素-α 反应、MYC 靶基因和 DNA 修复通路的基因。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
截至2021年6月18日，共有49例未经筛选且对既往疗法无效的可测量病灶患者入组（17例接受每周两次给药，11例接受每周5次给药，21例接受每日一次给药）。既往接受系统性治疗的中位数为3线。21例接受25-50 mg每日一次给药的患者中有6例出现剂量限制性毒性（DLT）——血小板减少症；6例接受45 mg每周5次给药的患者中有1例出现DLT——疲乏。45 mg每周5次给药方案被选为扩展剂量。外周血单核细胞中观察到内含子滞留增加。一名同源重组缺陷阳性（HRD+）卵巢癌患者在接受研究治疗后，完全缓解（CR）已维持超过1年。另有5例患者病情稳定≥6个月。观察到PRMT5靶点结合和功能活性呈剂量依赖性抑制。PRT543在HRD阳性卵巢癌中显示出令人鼓舞的临床活性，达到完全缓解，并在多例患者中实现了长期病情稳定。目前正在进行一项基于生物标志物筛选的实体瘤队列的扩展研究[1]。
在体内，PRT-543 可抑制 AML 异种移植模型中的肿瘤生长。一项 I 期剂量递增/扩展试验纳入了 40 例复发/难治性髓系恶性肿瘤患者（18 例低危 MDS、11 例高危 MDS、7 例 AML、4 例 MDS/MPN）。推荐的 II 期剂量 (RP2D) 为每日 35 mg，每周 5 次。临床疗效包括低危 MDS 患者的血液学改善（红系造血功能改善）、高危 MDS 患者的骨髓完全缓解 (mCR) 以及 AML 患者的伴血小板输注独立的伴血小板输注的完全缓解。有疗效的患者包括携带 SRSF2 突变的患者。药效学分析显示血清 SDMA 平均降低 41.9%，证实了靶点结合。疗效有限部分归因于其峰浓度 (1.48 uM) 低于临床前模型。 |
| 酶活实验 |
PRMT5酶抑制活性测定采用时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）或放射性甲基转移酶测定法。将重组PRMT5/MEP50复合物（1-10 nM）与PRT-543（0.1-1000 nM）在测定缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.5、10 mM NaCl、0.01% Tween-20、1 mM DTT、0.1% BSA）中孵育，该缓冲液含有0.6 uM S-腺苷甲硫氨酸（SAM）和200 nM生物素标记的组蛋白H4肽段（氨基酸残基1-21）作为底物。室温孵育2小时后，加入铕标记的抗SDMA抗体和链霉亲和素-XL665。测定TR-FRET信号（激发波长340 nm，发射波长620/665 nm）。 IC50 由 665/620 比值确定。该测定表明 PRT543 具有 SAM 竞争性，但对底物无竞争性。
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| 细胞实验 |
对于基于细胞的检测，白血病细胞系（例如 K562、MV4-11 或患者来源的剪接因子突变细胞）在含 10% FBS 的 RPMI-1640 培养基中，于 37℃、5% CO2 条件下培养。对于增殖检测，将细胞接种于 96 孔板（10,000 个细胞/孔），并用 PRT-543（0.001-10 uM）处理 72-120 小时。使用 CellTiter-Glo 检测细胞活力，并计算 IC50 值。对于药效学评估，将细胞用 1-10 uM 的化合物处理 24-48 小时，然后裂解细胞，进行 SDMA（对称二甲基化蛋白）和 SmD3 甲基化的 Western blot 分析。提取 RNA，通过 RT-PCR 或 RNA-seq 进行剪接分析，以评估内含子保留和外显子跳跃事件。
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| 动物实验 |
本研究评估了PRT543在不同给药方案下的安全性、药代动力学、药效学和初步肿瘤反应（REClST v1.1），给药方案从每周两次（BIW）开始，逐渐增加至每日一次（QD），剂量范围为5-50 mg，以28天为一个周期。剂量递增采用3+3设计。血清对称性二甲基精氨酸（sDMA）和内含子滞留（PRMT5介导的mRNA剪接保真度的标志物）分别作为PRMT5靶点结合和功能的指标。[1]
采用剪接因子突变型急性髓系白血病（AML）细胞系，在小鼠异种移植模型中评估体内疗效。将5 × 10⁶个白血病细胞静脉注射或皮下注射至雌性NSG小鼠或裸鼠体内。对于皮下模型，当肿瘤体积达到约150-200 mm³时，将小鼠随机分组，并给予PRT-543口服治疗，剂量为35-100 mg/kg/天或每周5次。每2-3天测量一次肿瘤体积。对于播散性模型，监测生存期。药效学评估包括血浆SDMA水平、免疫组化法检测肿瘤组织SDMA以及RNA测序法进行剪接分析。基于临床前毒理学和I期临床试验数据，确定了人体推荐II期剂量（RP2D，每日35 mg，每周5次）。患者血浆峰浓度达到1.48 μM。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
PRT543 的 Cmax (nM) 和 AUC (nM·hr) 均呈剂量依赖性增加。在延长给药剂量下，T½ 为 15 小时，血浆药物暴露量（Cmax 为 2142 nM；AUC 为 26,293 nM·hr）超过了临床前疗效模型。血清 sDMA 水平呈剂量依赖性降低，每日一次 50 mg 剂量下降低 77%，延长给药剂量下降低 69%。[1]
PRT-543 的药代动力学已在临床前动物和人体中得到表征。在小鼠和大鼠中，口服生物利用度中等，给药后 1-3 小时达到峰浓度 (Cmax)。该化合物在啮齿动物中的末端半衰期 (t1/2) 为 4-8 小时，支持每日一次给药。在髓系恶性肿瘤患者中，推荐的 II 期剂量为每周口服 5 天，每次 35 mg。患者的血浆峰浓度达到 1.48 μM，低于临床前细胞系研究中使用的浓度 (10 μM)，这可能解释了其临床疗效有限。蛋白结合率高 (>90%)。主要通过 CYP450 酶代谢，经粪便和尿液排泄。重复给药未观察到明显的蓄积。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
PRT543耐受性良好，安全性高。所有治疗方案中最常见的治疗相关不良事件（TRAE）（任何级别）为疲乏（n=20，41%）、恶心（n=14，29%）、血小板减少症（n=13，27%）和贫血（n=12，24%）。所有治疗方案中发生率≥5例的≥3级TRAE包括血小板减少症（n=10，20%）和贫血（n=6，12%）。血小板减少症可逆，可通过调整剂量进行控制。44例患者因疾病进展而停止治疗，另有2例患者因不良事件（3级血小板减少症和4级胆管炎）而停止治疗。[1]
在 I 期临床试验 (NCT03886831) 中，40 例复发/难治性髓系恶性肿瘤患者接受了 PRT-543 单药治疗。最常见的治疗期间出现的不良事件（任何级别）为贫血 (50.0%)、血小板减少症 (30.0%)、恶心 (27.5%) 和腹泻 (27.5%)。85.0% 的患者发生了 ≥3 级不良事件。导致治疗中断、剂量减少和停药的不良事件分别发生在 40.0%、12.5% 和 20.0% 的患者中。32.5% 的患者记录到严重不良事件，但均与 PRT-543 无关。在临床前毒理学研究中，治疗剂量下未报告明显的器官毒性。血小板减少症是 PRMT5 抑制剂的类效应，这是由于 PRMT5 在巨核细胞分化中发挥作用所致。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
PRMT5 催化蛋白质底物中精氨酸残基的对称二甲基化，这些底物在癌细胞的生长和存活中起着至关重要的作用。PRT543 是一种强效且选择性的口服 PRMT5 抑制剂，具有显著的临床前疗效（Bhagwat AACR 2020）。一项针对未经筛选的晚期实体瘤和血液系统恶性肿瘤患者的 PRT543 开放标签 I 期研究（NCT03886831）正在进行中。本文将介绍 PRT543 在实体瘤和淋巴瘤患者中的剂量递增结果。
PRT-543 是一种研究性药物，已完成针对剪接因子突变型髓系恶性肿瘤的 I 期临床试验，但尚未获得监管部门批准。该 I 期研究 (NCT03886831) 证实了其安全性、靶点结合（SDMA 水平降低）以及初步疗效，包括血液学改善、骨髓完全缓解 (CR) 和伴不完全血小板浸润的完全缓解 (CRi)，尤其是在部分接受过大量预处理的患者中。然而，临床疗效有限，部分原因是患者体内药物峰浓度低于临床前模型。目前，新一代 MTA 协同 PRMT5 抑制剂正在进行 I 期临床试验。PRT-543 也已在实体瘤中进行过研究。该化合物证实 PRMT5 抑制会破坏 RNA 剪接，从而验证了 PRMT5 作为剪接因子突变型癌症治疗靶点的有效性。PRT-543 仅供研究使用。 |
| 分子式 |
C17H17CLN4O4
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|---|---|
| 分子量 |
376.79
|
| 精确质量 |
376.09383
|
| 元素分析 |
C, 54.19; H, 4.55; Cl, 9.41; N, 14.87; O, 16.98
|
| CAS号 |
1989620-03-2
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| PubChem CID |
122497020
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| 密度 |
1.73±0.1 g/cm3(Temp: 20 °C; Press: 760 Torr)(Predicted)
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| 沸点 |
713.3±60.0 °C(Predicted)
|
| LogP |
0.8
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| tPSA |
127Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
495
|
| 定义原子立体中心数目 |
5
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| SMILES |
O[C@@H]1[C@@H]([C@@]([H])([C@@H](C2C=CC(Cl)=CC=2)O)O[C@H]1N1C=CC2=C(N=CN=C12)N)O
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| InChi Key |
ITEKIFMGFZAFPM-QFRSUPTLSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C17H17ClN4O4/c18-9-3-1-8(2-4-9)11(23)14-12(24)13(25)17(26-14)22-6-5-10-15(19)20-7-21-16(10)22/h1-7,11-14,17,23-25H,(H2,19,20,21)/t11-,12+,13-,14-,17-/m1/s1
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| 化学名 |
(2R,3R,4S,5R)-2-(4-aminopyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl)-5-[(R)-(4-chlorophenyl)-hydroxymethyl]oxolane-3,4-diol
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| 别名 |
PRT543; CHEMBL4585781; SCHEMBL18026293; SCHEMBL22508993; PRT-543; BDBM415556;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6540 mL | 13.2700 mL | 26.5400 mL | |
| 5 mM | 0.5308 mL | 2.6540 mL | 5.3080 mL | |
| 10 mM | 0.2654 mL | 1.3270 mL | 2.6540 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Link: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03886831
Conditions:Relapsed/Refractory Advanced Solid Tumors|Relapsed/Refractory Diffuse Large B-cell Lymphoma|Relapsed/Refractory Myelodysplasia|Relapsed/Refractory Myelofibrosis|Adenoid Cystic Carcinoma|Relapsed/Refractory Mantle Cell Lymphoma|Relapsed/Refractory Acute Myeloid Leukemia|Refractory Chronic Myelomonocytic LeukemiaInvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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