| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
The primary molecular target of Trecovirsen sodium is the gag gene mRNA of HIV-1. Specifically, it binds to a 25-nucleotide sequence within the gag coding region through Watson-Crick base pairing. This binding is highly sequence-specific, with the antisense oligonucleotide hybridizing to the complementary RNA sequence. Once bound, the heteroduplex serves as a substrate for RNase H, an endogenous cellular enzyme that cleaves the RNA strand of DNA-RNA hybrids. This results in degradation of the gag mRNA, preventing translation of gag polyprotein precursors (p55, p41, p24). The compound does not directly target viral enzymes (reverse transcriptase, protease, integrase) but rather blocks viral protein synthesis. It is not a receptor ligand but a nucleic acid-based therapeutic .
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外研究表明，Trecovirsen钠能够抑制感染细胞培养物中的HIV-1复制。使用人T淋巴细胞系（例如MT-2、MT-4、H9）或感染实验室适应性HIV-1毒株（例如IIIB、RF）的外周血单核细胞（PBMC），该化合物可降低p24抗原的产生和合胞体的形成。IC50值范围为0.1至1 uM，具体数值取决于细胞类型和病毒毒株。在浓度高达10 uM时，MTT法和台盼蓝排除法检测未感染细胞，未观察到明显的细胞毒性。该化合物具有序列特异性活性，错配的寡核苷酸不会抑制病毒复制。它对多种HIV-1分离株有效，但由于gag基因序列差异，对HIV-2的活性较低。该化合物在无细胞实验中也能抑制HIV-1逆转录酶，但这并非其主要作用机制。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在HIV-1感染的人外周血单核细胞（PBMC）重建小鼠模型（SCID-hu或hu-PBL-SCID小鼠）中评估了Trecovirsen钠的体内抗病毒活性。在这些模型中，静脉注射剂量为5-25 mg/kg/天，持续2-4周，可降低血浆病毒载量，该病毒载量通过HIV-1 RNA（RT-PCR）和p24抗原水平测定。与载体对照组相比，脾脏和淋巴结中的病毒滴度也降低。治疗组动物的CD4+ T细胞计数部分得以保留。然而，由于HIV无法在小鼠细胞中复制，因此该化合物在标准小鼠模型中的活性有限，需要使用人源化小鼠模型。目前尚无除这些模型系统之外的动物研究的临床疗效数据。在离体研究中，来自治疗组动物的PBMC在受到刺激后HIV病毒的恢复率降低。
|
| 酶活实验 |
对于 RNase H 依赖性反义活性测定，采用无细胞体系。首先，通过体外转录合成 5' 或 3' 端放射性标记 (32P) 的 HIV-1 gag RNA 转录本（靶标）。将 Trecovirsen (1-100 nM) 与标记的 RNA (10-50 pM) 混合于杂交缓冲液（10 mM Tris-HCl pH 7.5、100 mM KCl、5 mM MgCl2、1 mM DTT）中，加热至 65℃ 5 分钟，然后在 30 分钟内冷却至 37℃。加入 RNase H (0.1-1 U)，并在 37℃ 下孵育 15-60 分钟。反应用甲酰胺上样缓冲液终止，加热至 95℃，并在 6-15% 变性聚丙烯酰胺凝胶上进行电泳分离。裂解产物可通过放射自显影或磷光成像进行可视化。RNA 裂解模式表明其具有特异性靶标识别能力。此外，也可使用荧光标记的 RNA（FAM 或 Cy5）进行凝胶扫描。
|
| 细胞实验 |
体外抗病毒活性评估采用HIV-1感染的人类T细胞系或外周血单核细胞(PBMC)。MT-2或MT-4细胞在含10%胎牛血清(FBS)、2 mM L-谷氨酰胺、100 U/mL青霉素和100 ug/mL链霉素的RPMI-1640培养基中，于37℃、5% CO2条件下培养。细胞以0.01-0.1的感染复数(MOI)感染HIV-1 2小时，洗涤后，加入不同浓度的Trecovirsen（0.01-10 uM）培养5-7天。对照组包括乱序寡核苷酸和未处理组。每2-3天收集上清液，用于p24抗原ELISA检测（HIV-1 p24试剂盒）。使用 MTT 或 CellTiter-Glo 检测法，以未感染细胞为对照，平行评估细胞毒性。计算 50% 抑制浓度 (IC₅0) 和 50% 细胞毒性浓度 (CC₅0)。选择性指数 (CC₅0/IC₅0) 通常大于 10。
|
| 动物实验 |
在hu-PBL-SCID小鼠模型中评估体内疗效。将人外周血单核细胞（PBMC）（20-30 × 10⁶ 个细胞/只，腹腔注射）移植到SCID（重症联合免疫缺陷）小鼠体内，以重建人免疫系统。2-4周后，腹腔注射HIV-1（例如，IIIB或JR-CSF毒株，1,000 TCID₅₀）感染小鼠。通过尾静脉注射给予Trecovirsen钠，剂量为5-25 mg/kg/天，持续14-28天，可每日推注或持续输注（使用渗透泵）。对照组接受生理盐水或乱序寡核苷酸。采用RT-PCR定量血浆HIV-1 RNA。处死动物后，收集腹腔灌洗液细胞和脾脏，用于 p24 抗原测定和前病毒 DNA 检测（Alu-gag PCR）。通过流式细胞术测定人细胞 (hCD45+/hCD3+) 的 CD4/CD8 比值。终点：病毒载量降低 ≥1 log。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
在HIV感染者和健康志愿者中进行的药代动力学研究表明，静脉输注Trecovirsen钠后，其消除呈双相性。初始分布半衰期（t1/2α）约为0.5-1小时，末端消除半衰期（t1/2β）为10-20小时。血浆峰浓度（Cmax）在0.1-2 mg/kg剂量范围内呈剂量比例关系。由于其硫代磷酸酯骨架，血浆蛋白结合率高（>90%）。该化合物广泛分布于组织，尤其是肝脏、肾脏和淋巴结。它主要通过核酸外切酶代谢，释放出较短的寡核苷酸片段。肾脏排泄约占剂量的30-50%，包括完整药物和降解产物。不发生细胞色素P450介导的代谢。药代动力学变异性中等（CV 20-40%）。每日给药不会导致该化合物显著蓄积。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
已对大鼠和猴子进行了毒理学研究。在大鼠中，连续28天静脉注射10 mg/kg/天的剂量通常耐受性良好，仅出现轻微的肝转氨酶（ALT、AST）升高和轻度血小板减少症（血小板计数降低）。在较高剂量（≥30 mg/kg/天）下，观察到更明显的血小板减少症、活化部分凝血酶原时间（aPTT）延长和补体激活（CH50、Bb、SC5b-9升高）。高剂量时会出现肾脏损害（蛋白尿、BUN升高）。在猴子中，剂量限制性毒性也是血小板减少症（剂量依赖性，可逆）。Ames试验和微核试验均未观察到遗传毒性。尚未有致癌性研究报告。该化合物已在 HIV 阳性受试者中进行了 I/II 期试验，不良反应包括轻度注射部位反应、血小板减少症（剂量限制性）和疲劳。剂量 ≤2 mg/kg/天时未出现需要临床干预的器官毒性。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
20世纪90年代，Trecovirsen钠（GEM 91）曾进行临床试验，用于治疗HIV感染，但未获得FDA或其他监管机构的批准。在HIV阳性患者中进行的I/II期研究显示，该药物具有一定的抗病毒活性（p24抗原和病毒RNA水平降低），但存在剂量限制性毒性（血小板减少症）。最大耐受剂量（MTD）确定为约2 mg/kg/天，需持续静脉输注。由于口服生物利用度极低，因此必须采用肠外给药。由于更有效的抗逆转录病毒疗法（蛋白酶抑制剂，HAART）的出现以及第一代反义寡核苷酸的毒性，该药物的进一步研发被终止。目前，该化合物仍作为研究反义机制和硫代磷酸酯化学的工具。目前没有正在进行的临床试验。它代表了寡核苷酸疗法发展史上的一个历史性候选药物，是最早进入人体试验治疗传染病的反义化合物之一。
|
| 外观&性状 |
Solid powder
|
|---|---|
| 别名 |
GEM91 sodium
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
AGS-009
EFdA-TP 三乙胺盐
soVIRIP
HIV-1-IN-84
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
