CJ-13,610 hydrochloride

别名: CJ-13,610 hydrochloride; 179420-27-0; SCHEMBL8173877;
目录号: V98148
CJ-13,610(盐酸盐)是一种口服活性、强效、非还原型 5-脂氧合酶抑制剂,IC50 为 0.07 μM。
CJ-13,610 hydrochloride CAS号: 179420-27-0
产品类别: Lipoxygenase
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格
500mg
1g
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产品描述
CJ-13,610(盐酸盐)是一种口服活性、强效、非还原型 5-脂氧合酶抑制剂,IC50 为 0.07 μM。CJ-13,610(盐酸盐)与受调控的 LOOH 结合位点上的活化 LOOH 竞争,具有高亲和力,从而阻止 5-脂氧合酶催化。CJ-13,610(盐酸盐)有潜力用于研究与 5-脂氧合酶水平升高相关的疾病,例如炎症反应、过敏性哮喘、各种类型的癌症和动脉粥样硬化。
生物活性&实验参考方法
靶点
5-LO
体外研究 (In Vitro)
5-脂氧合酶(5-LO)是花生四烯酸(AA)合成生物活性白三烯(LTs)的关键酶,5-LO的抑制剂被认为可以防止LTs的不良病理生理效应。在这项研究中,我们介绍了新型非氧化还原型5-LO抑制剂cj - 13610的分子药理学特征,并在各种体外试验中进行了评估。在完整的人多形核白细胞(PMNL)中,Ca(2+)-离子载体A23187激发,cj - 13610有效抑制5-LO产物的形成,IC(50)=0.07微米。外源AA的补充削弱了cj - 13610的效力,表明其作用方式是竞争性的。与ZM230487和L-739.010相似,两种密切相关的非氧化还原型5-LO抑制剂cj - 13610在非还原条件下,在无细胞检测系统中,当浓度达到30微米时,不能抑制5-LO,但加入过氧化物酶活性后,cj - 13610恢复了其抑制效果(IC(50)=0.3微米)。与ZM230487和L-739.010相比,cj - 13610的效力不依赖于细胞刺激或5-LO的激活途径。因此,与Ca(2+)介导的5-LO激活相比,cj - 13610同样抑制了磷酸化事件诱导PMNL中5-LO产物的形成。在转染的HeLa细胞中,cj - 13610仅能轻微区分可磷酸化的野生型5-LO和缺乏磷酸化位点的5-LO突变体。综上所述,cj - 13610可能具有相当大的潜力,作为一种有效的口服活性非氧化还原型5-LO抑制剂,它缺乏这类5-LO抑制剂以前代表的某些缺点。[1]
酶活实验
无细胞体系中5-LO产物形成的测定[1] 为了测定细胞匀浆中5-LO的活性,将7.5 × 106新鲜分离的PMNL重悬在含有1 mM EDTA的PBS中,在4°C下超声(3 × 10 s),并加入1 mM ATP。为了测定重组分离的5- lo的活性,将部分纯化的5- lo (0.5 μg / 5 μl)加入到1 ml的5- lo反应混合物(PBS, pH 7.4, 1 mM EDTA, 25 μg ml−1磷脂酰胆碱,1 mM ATP和20 μg ml−1 γ-球蛋白)中。在细胞匀浆或部分纯化的5-LO样品中添加DTT (1 mM)、GSH (1 mM)、GPx-1 (30 mU)和cj - 13610。在4℃下5-10 min后,样品在37℃下预热30 s,加入2 mM CaCl2和指定浓度的AA,开始5-LO产物的形成。在37°C下,加入1 ml冰冷的甲醇,反应10分钟后停止,形成的代谢物用HPLC分析完整细胞。
细胞实验
完整细胞中5-LO产物形成的测定[1]
对于完整细胞的检测,7.5 × 106。最后将新分离的PMNL或2 × 106 HeLa细胞重悬于1ml PGC缓冲液中。在37°C下用指定的化合物预孵育后,通过添加指定的刺激物和外源AA开始形成5-LO产物。37℃下加甲醇1 ml, 1 N HCl 30 μl,前列腺素B1 200 ng, PBS 500 μl停止反应。形成的5-LO代谢物按照描述(Werz & Steinhilber, 1996)用高效液相色谱法提取和分析。5- lo产物的形成以每106个细胞中5- lo产物的ng表示,包括LTB4及其全反式异构体,5(S),12(S)-二羟基-6,10-反式8,14-顺式二十碳四烯酸(5(S),12(S)-二hete)和5(S)-氢(pero) -6-反式8,11,14-顺式二十碳四烯酸(5- h (p)ETE)。未检测到半胱氨酸ltts (LTC4、D4和E4),也未检测到LTB4的氧化产物。
5-LO的亚细胞定位[1]
如前所述,研究了5-LO的亚细胞定位(Werz et al., 2002a)。简而言之,将新鲜分离的PMNL (3 × 107)放入1ml PGC缓冲液中,在37°C下用指定的刺激孵育10分钟,并在冰上冷藏。细胞经0.1% NP-40裂解后得到核和非核组分。用SDS-PAGE和抗5-LO抗血清(AK7, 1551;亲和关系在5-LO柱上纯化)。以硝基蓝四氮唑和5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸为底物,用碱性磷酸酶偶联igg可视化蛋白。
参考文献

[1]. Fischer L, et al. Molecular pharmacological profile of the nonredox-type 5-lipoxygenase inhibitor CJ-13,610. Br J Pharmacol. 2004 Jul;142(5):861-8.

其他信息
细胞内5-脂氧合酶(5-LO)响应外部刺激而被激活,其过程包括5-LO从可溶性区域转位至核膜,并在核膜上与FLAP共定位(Peters-Golden & Brock, 2001)。这一过程由细胞内Ca2+水平升高和/或丝裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶(MAPKAP)激酶在Ser-271位点以及ERK1/2在Ser-663位点对5-LO进行磷酸化介导(Werz et al., 2000; 2002a, 2002b)。研究表明,在某些细胞类型中,诱导5-LO磷酸化的刺激所激活的5-LO并不依赖于Ca2+(Werz et al., 2002a; Burkert et al., 2003)。非氧化还原型5-脂氧合酶(5-LO)抑制剂ZM230487和L-739.010的效力取决于诱导5-LO产物合成的刺激和激活途径(Fischer等,2003)。ZM230487和L-739.010能有效抑制多形核白细胞(PMNL)中Ca2+介导的5-LO激活,但抑制磷酸化诱导的5-LO产物合成则需要高10至100倍的抑制剂浓度(Fischer等,2003)。相反,在完整的PMNL中,当5-LO被磷酸化激活时,CJ-13,610的效力并未降低。此外,CJ-13,610 对 HeLa 细胞中可磷酸化的野生型或不可磷酸化的突变型 S217A/S663A-5-LO 的效力没有显著差异。值得注意的是,一些与 5-LO 产物水平升高相关的疾病,例如炎症反应、过敏性哮喘、多种癌症和动脉粥样硬化,都与细胞磷酸化状态的升高有关(Hajjar & Pomerantz, 1992; Johnson & Lapadat, 2002),而磷酸化状态决定了 5-LO 对非氧化还原抑制剂的敏感性。由于 CJ-13,610 的疗效并不依赖于 5-LO 的磷酸化状态,因此,使用这种药物靶向 5-LO 可能确实有利于这些疾病的治疗。尽管 CJ-13,610 的治疗潜力可能因过氧化物水平升高而降低,从而受到疗效的一定限制,但该化合物显然比此类 5-LO 抑制剂的先前代表具有优势,这些代表由于临床疗效差而未能获得常规批准。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C22H24CLN3O2S
分子量
429.96
精确质量
429.12777
CAS号
179420-27-0
相关CAS号
179420-17-8
PubChem CID
11247416
外观&性状
Typically exists as solids at room temperature
tPSA
95.4 Ų
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
29
分子复杂度/Complexity
532
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C(C1(C2C=CC=C(SC3C=CC(N4C=CN=C4C)=CC=3)C=2)CCOCC1)(=O)N.Cl
InChi Key
BYIYZITWHPGRRV-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C22H23N3O2S.ClH/c1-16-24-11-12-25(16)18-5-7-19(8-6-18)28-20-4-2-3-17(15-20)22(21(23)26)9-13-27-14-10-22;/h2-8,11-12,15H,9-10,13-14H2,1H3,(H2,23,26);1H
化学名
4-[3-[4-(2-methylimidazol-1-yl)phenyl]sulfanylphenyl]oxane-4-carboxamide;hydrochloride
别名
CJ-13,610 hydrochloride; 179420-27-0; SCHEMBL8173877;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.3258 mL 11.6290 mL 23.2580 mL
5 mM 0.4652 mL 2.3258 mL 4.6516 mL
10 mM 0.2326 mL 1.1629 mL 2.3258 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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