| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Its primary target is the intestinal guanylate cyclase-C (GC-C), a receptor expressed on the apical membrane of intestinal epithelial cells. Upon activation, it increases intracellular cyclic GMP (cGMP) levels. This leads to the activation of the CFTR chloride channel and inhibition of the NHE3 sodium-hydrogen exchanger, resulting in net secretion of Cl-, HCO3-, and water, thereby regulating intestinal fluid and electrolyte homeostasis. It acts as a natriuretic and diuretic hormone.
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，鸟苷素（小鼠、大鼠来源）三氟乙酸（TFA，0.1-10 uM）可激活T84人结肠癌细胞中的鸟苷酸环化酶C（GC-C），导致cGMP生成增加（EC₅0为3.4 ng/ml）。cGMP水平可通过酶联免疫吸附试验（ELISA）或放射免疫分析（RIA）进行测定。鸟苷素还能增加Ussing室实验中的短路电流（Isc），表明Cl-分泌增加，并抑制Na⁺通过NHE3的吸收。这些作用是GC-C特异性的，并可被GC-C拮抗剂HS-142-1阻断。研究还表明，鸟苷素可通过cGMP/PKG和MAPK信号通路之间的相互作用诱导结肠癌细胞凋亡，并可能在肿瘤发生过程中发挥作用。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，鸟苷素作为一种肠道旁分泌激素，调节体液和电解质的分泌。在小鼠模型中，它参与感染性腹泻（例如，由产肠毒素大肠杆菌耐热毒素STa引起）的病理生理过程。鸟苷素敲除小鼠表现出肠道cGMP水平降低、体液分泌受损和便秘，这支持了其在刺激体液分泌中的作用。腹腔注射（IP）或静脉注射（IV）鸟苷素（0.1-10 mg/kg）的小鼠，尿钠和尿钾排泄量在30-60分钟内迅速短暂增加，证实了其利钠活性。鸟苷素也在肾脏中表达，并可能在肾脏中发挥利钠激素的作用。
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| 酶活实验 |
为了激活鸟苷酸环化酶C (GC-C)，将T84人结肠癌细胞接种于24孔板（5 × 10⁵个细胞/孔），培养至细胞汇合。移除培养基，用含0.5 mM IBMX（磷酸二酯酶抑制剂）的PBS洗涤细胞。在含0.5 mM IBMX的DMEM培养基中加入鸟苷素（小鼠、大鼠）TFA（0.01-1000 nM），并在37℃孵育15分钟。刺激后，吸出培养基，用0.1 M HCl裂解细胞。将细胞裂解液离心（1000 g，10分钟，4℃），收集上清液。采用竞争性ELISA（或RIA）测定cGMP水平。鸟苷素通常能刺激 cGMP 的产生，EC₅0 约为 3.4 ng/ml。对照实验采用耐热肠毒素（STa，10-100 nM）。
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| 细胞实验 |
在Ussing室实验中，将T84细胞单层培养于Snapwell插入板中，并安装于Ussing室。向顶端加入鸟苷素（小鼠、大鼠）三氟乙酸（TFA）（0.1-100 nM），并测量短路电流（Isc）。Isc的增加表明CFTR介导的Cl-分泌被激活。CFTR抑制剂CFTRinh-172可抑制此效应。在GC-C结合实验中，将重组人GC-C（10-100 nM）与递增浓度（0.01-1000 nM）的生物素化或荧光标记的鸟苷素在结合缓冲液（50 mM HEPES，pH 7.4，100 mM NaCl，5 mM MgCl2，0.5% BSA）中于4℃孵育2小时。通过过滤去除未结合的配体。结合配体可通过铕标记的链霉亲和素或荧光偏振法进行检测。计算解离常数（Kd）（通常在低纳摩尔范围内）。对于受体结合，进行与未标记肽的竞争性研究。IC₅0 值用于计算结合亲和力。对于肠毒素 STa 的测定，STa 用作阳性对照（EC₅0 ~1-10 nM）。鸟苷素刺激 GC-C 的活性比 STa 弱约 100 倍。
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| 动物实验 |
对于氯离子分泌和cGMP测定，使用如上所述的T84细胞。对于Western blotting，在鸟苷酸环化酶处理后裂解细胞，并评估CFTR或其他信号分子（例如PKG、VASP）的表达。为了评估鸟苷酸环化酶是否诱导结肠癌细胞凋亡，将细胞用1-1000 nM的鸟苷酸环化酶处理24-72小时。通过Annexin V/PI染色、caspase-3/7活性检测和PARP裂解的Western blot来评估细胞凋亡。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
体内研究：为测定肾功能，将雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g，n=6）麻醉后插入导尿管。通过静脉推注给予鸟苷素（小鼠、大鼠）三氟乙酸（0.5-5 mg/kg）。分别于0.5、1、2和4小时收集尿液；采用火焰光度法测定尿量和钠钾浓度。采集血样，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定血浆cGMP浓度。肠道研究：将鸟苷素（0.1-10 mg/kg）腹腔注射或灌胃给予小鼠（C57BL/6，n=8）。2小时后，通过小肠重量/长度比值测量肠道积液，并采用ELISA测定肠道组织匀浆中cGMP的浓度。所有动物实验均须经IACUC批准。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
鸟苷素作为一种肽，在血浆中的半衰期很短（t½ < 15 分钟）。它易被肾脏快速清除，并被蛋白酶降解。口服生物利用度很低。鸟苷素类似物利那洛肽（已获批用于治疗便秘型肠易激综合征）是一种更稳定、口服生物利用度更高的肽模拟物。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
体外实验表明，鸟苷酸在纳摩尔浓度下通常无毒。高剂量（>10 mg/kg，腹腔注射）时，可能引起短暂性低血压和电解质紊乱。它不具有遗传毒性。
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| 分子式 |
C60H90N16O22S4.XC2HF3O2
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| 分子量 |
1515.71 (free base)
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： (1). 请将本产品存放在密封保护的环境中，避免受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~4.95 mg/mL (~adjust pH to 9 with 1 M NaOH)
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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