| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1g |
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| 5g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
non-fluorescent dye; redox indicator
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| 体外研究 (In Vitro) |
实验方案(这是我们建议的方案,可根据您的具体实验要求进行调整)
细胞活力: 1.Resazurin/刃天青溶液应在37°C水浴中解冻。 2.将细胞加入96孔板后,用PBS洗涤(避光)。 3.去除PBS洗涤液后,加入500μL刃天青溶液(1μg/mL)。 4.将培养板孵育30分钟(孵育期的长度取决于细胞的类型和数量)。 5.Resorufan荧光可以使用微孔板读数器测量(Ex=530-560nm,Em=590nm)。 |
| 酶活实验 |
化验化学与氧化还原原理[2]
Alamar Blue监测活细胞的还原环境。活性成分是resazurin/刃天青(IUPAC名称:7-羟基-10-氧化吩恶嗪-10-碘-3-酮),也称为重氮间苯二酚、偶氮间苯二酚、刃天青,resazurin,它是水溶性的,在培养基中稳定,无毒且可透过细胞膜。因此,允许对培养中的细胞进行连续监测<1929年,Pesch和Simmert首次使用刃天青来评估牛奶中的细菌或酵母污染。它是一种蓝色非荧光染料,被还原为粉红色、高荧光的间苯二酚Resazurin溶液根据Kreft的二色性指数(DI)具有高度二色性。染料在电子传输链中充当中间电子受体,不受电子正常转移的干扰。在pH 7.0、25°C的条件下,Alamar Blue的氧化还原电位为+380 mV。因此,Alamar Blue可以被NADPH(Eo=320 mV)、FADH(Eo=220 mV),FMNH(Eo=210 mV)、NADH(Eo=32 0 mV)以及细胞色素(Eo=290 mV至+80 mV)还原。当指示染料接受电子时,它会从氧化的非荧光蓝色状态变为还原的荧光粉红色状态。除了线粒体还原酶外,位于细胞质和线粒体中的其他酶(如黄递酶(EC 1.8.1.4,二氢脂肪胺脱氢酶)、NAD(P)H:醌氧化还原酶(EC 1.6.99.2)和黄素还原酶(EC 1.6.99.1)可能能够还原阿拉玛蓝。因此,Alamar Blue减少可能意味着细胞代谢受损,不一定是电子传递中断和线粒体功能障碍的特异性表现。从氧化状态到还原状态的这种变化允许检测的灵活性,其中测量可以是定量的,如比色和/或荧光读数(后者更敏感),也可以是定性的,如颜色的可见变化,指示活细胞的存在或不存在。分光光度吸光度在两个波长(570和600 nm或540和630 nm,但也可以使用其他滤光片,并在计算中加入校正因子)。吸光度值将根据微量滴定板(平底或圆形和制造商)而变化。荧光信号在530-560 nm的激发波长和590 nm的发射波长下测量。 |
| 细胞实验 |
鉴定快速、可靠和高度可重复的生物测定方法,这些方法可以标准化并常规用于临床前试验,是降低药物发现成本和时间的有前景的方法。本单元详细介绍了一种串联、快速、可靠的细胞存活率方法,用于化合物的初步筛选。该测定使用双Resazurin/刃天青/磺基罗丹明B测定法测量同一细胞样本中的代谢活性和细胞质量,消除了在跨板测试不同细胞样本的测定中与细胞接种和过度操作相关的变化。该程序还减少了所需的细胞、测试化合物和试剂的量,以及传统测试中花费的时间,从而更可靠地预测了测试化合物的毒性阈值。[1]
任何稳健的筛查制度都需要准确预测测试化合物对生命系统的不利影响,检测毒性阈值,并扩展实验数据集以包括多重毒性终点分析。Alamar Blue是一种重要的氧化还原指示剂,用于评估代谢功能和细胞健康。在过去的50年里,Alamar Blue生物测定已被用于评估一系列生物和环境系统以及多种细胞类型(包括细菌、酵母、真菌、原生动物和培养的哺乳动物和鱼类细胞)中的细胞活力和细胞毒性。与其他代谢指标和其他细胞毒性测定相比,它具有几个优势。然而,与任何生物测定一样,必须确定每种应用和细胞模型的适用性。本综述旨在强调除潜在陷阱外,分析使用和设计中涉及的许多重要考虑因素[2]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
大鼠口服LDLo 500 mg/kg 美国国家科学院、国家研究委员会、化学-生物协调中心,《评论》,5(24),1953
小鼠静脉注射LDLo 179 mg/kg 《毒理学与应用药理学》,44(225),1978 [PMID:79242] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
刃天青是一种吩恶嗪类化合物。它可用作pH指示剂、检测次亚硫酸盐以及用于食品研究(还原酶试验)。
指示剂和试剂 用于检测、鉴定、分析等化学、生物或病理过程或状况的物质。指示剂是指在化学滴定终点或接近终点时(例如,在酸碱转换过程中)物理外观(例如颜色)发生变化的物质。试剂是指用于通过化学或显微镜手段(尤其是分析)检测或测定另一种物质的物质。试剂的类型包括沉淀剂、溶剂、氧化剂、还原剂、助熔剂和比色试剂。 刃天青可引起氧化应激,导致HL-60和Jurkat白血病细胞产生活性氧(ROS)并损伤线粒体,从而诱导自噬和细胞死亡。该染料本身可抑制白血病细胞增殖,这对于毒性和化疗耐药性筛选具有重要意义。这强调了对检测方法进行阳性和阴性对照实验的重要性,以确保不存在非特异性相互作用效应。 |
| 分子式 |
C12H6NNAO4
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|---|---|
| 分子量 |
251.1701
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| 精确质量 |
251.019
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| 元素分析 |
C, 57.38; H, 2.41; N, 5.58; Na, 9.15; O, 25.48
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| CAS号 |
62758-13-8
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| 相关CAS号 |
550-82-3 (free acid)
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| PubChem CID |
112939
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| 外观&性状 |
Light brown to black solid powder
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| 沸点 |
477.2ºC at 760 mmHg
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| 熔点 |
>200ºC
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| 闪点 |
242.4ºC
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| LogP |
2.47
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| tPSA |
78.73
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
0
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| 重原子数目 |
18
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| 分子复杂度/Complexity |
427
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
IVGPGQSSDLDOLH-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C12H7NO4.Na/c14-7-1-3-9-11(5-7)17-12-6-8(15)2-4-10(12)13(9)16;/h1-6,14H;/q;+1/p-1
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| 化学名 |
sodium;10-oxido-7-oxophenoxazin-10-ium-3-olate
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| 别名 |
Resazurin sodium salt; 62758-13-8; Resazurin sodium; 3H-Phenoxazin-3-one, 7-hydroxy-, 10-oxide, sodium salt; sodium;10-oxido-7-oxophenoxazin-10-ium-3-olate; Diazoresorcinol (sodium); Resazurin (sodium); MFCD00005036;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~5 mg/mL (~19.91 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.9814 mL | 19.9068 mL | 39.8137 mL | |
| 5 mM | 0.7963 mL | 3.9814 mL | 7.9627 mL | |
| 10 mM | 0.3981 mL | 1.9907 mL | 3.9814 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。