Resazurin sodium salt

别名: Resazurin sodium salt; 62758-13-8; Resazurin sodium; 3H-Phenoxazin-3-one, 7-hydroxy-, 10-oxide, sodium salt; sodium;10-oxido-7-oxophenoxazin-10-ium-3-olate; Diazoresorcinol (sodium); Resazurin (sodium); MFCD00005036; 刃天青;刃天青钠;树脂天青;天兰化钠;刃天青钠盐;树脂天青钠盐; 刃石青;偶氮间苯四酚;刃天青钠盐,高纯生化染料;7-羟基-10-氧化物-3H-吩恶嗪-3-酮;Resazurin Sodium Salt 刃天青钠盐;Resazurin 刃天青;树脂天青,BR;7-羟基-3-羰基-10-氧化-三氢吩恶嗪钠盐;刃天青,刃天青钠, 天兰化钠;7-羟基-3H-酚恶嗪-3-酮N-氧化物钠盐
目录号: V29853 纯度: ≥98%
刃天青钠盐,指示剂是一种生化化合物,可用作生物医学研究的生物材料或有机/化学试剂。
Resazurin sodium salt CAS号: 62758-13-8
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
1g
5g
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  • 刃天青
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产品描述
刃天青钠盐是一种生化化合物,可用作生物材料或有机/化学试剂,用于生物医学研究。
刃天青钠盐(CAS号:62758-13-8),又称阿拉玛蓝或重氮间苯二酚钠,是一种蓝色非荧光染料,广泛用作活细胞代谢指示剂。在活细胞中,它被还原为粉红色、高荧光性的间苯二酚(激发波长530-560 nm,发射波长590 nm)。该化合物可用作氧化还原指示剂,并用于检测细菌和真核细胞的活力。它能抑制多种淋病奈瑟菌分离株的生长。其分子式为C12H6NO4Na,分子量为251.2 g/mol。
生物活性&实验参考方法
靶点
non-fluorescent dye; redox indicator
Resazurin sodium salt targets cellular metabolic activity as a redox indicator. It is reduced by metabolically active cells to the fluorescent product resorufin. The compound also has antibacterial activity, inhibiting the growth of N. gonorrhoeae isolates. It is used as an oxidation-reduction indicator in the resazurin test for bacteria. Resazurin is potentially useful for characterizing mitochondrial metabolic activity.
体外研究 (In Vitro)
推荐实验方案(这是我们推荐的实验方案,您可以根据自身需求进行调整,因为它仅供参考)。
细胞活力测定:
1. 将刃天青溶液在 37°C 水浴中解冻。
2. 将细胞加入 96 孔板后,用 PBS 洗涤(避光)。
3. 去除 PBS 洗涤液后,加入 500 μL 刃天青溶液(1 μg/mL)。
4. 将孔板孵育 30 分钟(孵育时间长短取决于细胞类型和数量)。 5. 可使用微孔板读数仪测量试卤灵的荧光强度(激发波长530-560 nm,发射波长590 nm)。体外实验中,刃天青钠盐可通过还原为荧光产物试卤灵来检测细菌和真核细胞的活力。它被广泛用作活细胞的代谢指示剂。该化合物可抑制多种淋病奈瑟菌分离株的生长,包括对多种抗生素耐药的菌株。它可用作氧化还原指示剂。刃天青钠盐还可用于表征线粒体代谢活性。
体内研究 (In Vivo)
在体内,刃天青钠盐主要用作细胞活力评估的实验室试剂,而非治疗药物。其在细胞活力和代谢活性测定方面的应用已得到证实。该化合物对淋病奈瑟菌的抗菌活性表明其在抗菌研究方面具有潜在的应用价值。由于该化合物主要用作试剂,因此其在体内的进一步研究受到限制。
酶活实验
检测化学和氧化还原原理 [2]
Alamar Blue 用于监测活细胞的还原环境。其活性成分为刃天青(IUPAC 名称:7-羟基-10-氧化吩恶嗪-10-鎓-3-酮),又称重氮间苯二酚、偶氮间苯二酚、雷沙唑啉、刃天青,它水溶性好,在培养基中稳定,无毒且能透过细胞膜。因此,可以对培养细胞进行连续监测。刃天青最早由 Pesch 和 Simmert 于 1929 年用于评估牛奶中的细菌或酵母污染。它是一种蓝色非荧光染料,可被还原为粉红色、高荧光性的试卤灵。根据克雷夫特二色性指数 (DI),刃天青溶液具有很强的二色性。该染料在电子传递链中作为中间电子受体,不干扰正常的电子传递。Alamar Blue 在 pH 7.0、25 °C 下的氧化还原电位为 +380 mV。因此,Alamar Blue 可被 NADPH (Eo = 320 mV)、FADH (Eo = 220 mV)、FMNH (Eo = 210 mV)、NADH (Eo = 320 mV) 以及细胞色素 (Eo = 290 mV 至 +80 mV) 还原。当指示染料接受电子时,它会从氧化态(无荧光,蓝色)转变为还原态(有荧光,粉红色)。除了线粒体还原酶外,位于细胞质和线粒体中的其他酶(例如二氢硫胺素脱氢酶(EC 1.8.1.4)、NAD(P)H:醌氧化还原酶(EC 1.6.99.2)和黄素还原酶(EC 1.6.99.1))也可能还原阿拉玛蓝。因此,阿拉玛蓝的还原可能表明细胞代谢受损,而不一定特指电子传递中断和线粒体功能障碍。这种从氧化态到还原态的转变使得检测方法具有灵活性,测量结果既可以定量(如比色法和/或荧光法读数,后者更为灵敏),也可以定性(如颜色变化,指示是否存在活细胞)。分光光度法吸光度通常在两个波长下测定(570 和 600 nm 或 540 和 630 nm,当然也可以使用其他滤光片)。 (需使用校正因子进行计算)。吸光度值会因微孔板(平底或圆底,以及生产商)而异。荧光信号的测量激发波长为 530–560 nm,发射波长为 590 nm。
雷沙唑林钠盐的体外活力测定包括将细胞与染料孵育,并在 530–560 nm 激发波长和 590 nm 发射波长下测量荧光强度。雷沙唑林还原为试卤灵的量与代谢活性成正比。抗菌测定中,将细菌培养在合适的培养基中,并用不同浓度的化合物处理。通过测量荧光或吸光度来评估生长抑制情况。测定在合适的缓冲体系中进行,并设置阳性对照。
细胞实验
开发快速、可靠且高度可重复的生物学检测方法,并将其标准化后常规应用于临床前试验,是降低药物研发成本和时间的有效途径。本单元详细介绍了一种用于化合物初步筛选的串联式、快速且可靠的细胞活力检测方法。该方法采用双重刃天青/磺基罗丹明B检测,在同一细胞样本中同时测量代谢活性和细胞量,从而避免了因细胞接种和在不同培养板上检测不同细胞样本而导致的过度操作等问题。此外,该方法还减少了所需的细胞、测试化合物和试剂用量,并缩短了传统检测所需的时间,从而能够更准确地预测受试化合物的毒性阈值。[1] 任何稳健的筛选方案都需要准确预测测试化合物对生物系统的不良反应、检测毒性阈值,并扩展实验数据集以包含多个毒性终点分析。Alamar Blue是一种重要的氧化还原指示剂,用于评估代谢功能和细胞健康状况。过去50年来,Alamar Blue生物测定法已被用于评估多种生物和环境系统以及多种细胞类型(包括细菌、酵母、真菌、原生动物以及培养的哺乳动物和鱼类细胞)中的细胞活力和细胞毒性。与其他代谢指标和其他细胞毒性测定方法相比,它具有诸多优势。然而,与任何生物测定法一样,其适用性必须针对每种应用和细胞模型进行评估。本综述旨在重点介绍测定法使用和设计中涉及的许多重要考虑因素以及潜在的缺陷[2]。
针对刃天青钠盐的体外细胞测定在多种细胞类型中进行。细胞在含有5% CO2的37°C适宜培养基中培养,并用该化合物处理。通过测量530-560 nm激发波长和590 nm发射波长的荧光强度来评估细胞活力。对于细胞毒性研究,先用测试化合物处理细胞,然后与刃天青孵育以评估细胞活力。实验过程中会设置适当的阳性对照和阴性对照。
动物实验
由于刃天青钠盐主要用作实验室试剂,因此其体内研究受到限制。该化合物在细胞活力评估和抗菌研究中的应用已得到证实。刃天青钠盐还用于代谢活性表征的研究应用。所有研究均按照机构试剂使用指南进行。
药代性质 (ADME/PK)
刃天青钠盐(分子量 251.2 g/mol,C12H6NO4Na)是一种蓝色非荧光染料。它也被称为阿拉玛蓝和重氮间苯二酚钠。该化合物可溶于水和二甲基亚砜(DMSO)。在推荐的储存条件下,它性质稳定。刃天青钠盐可用作氧化还原指示剂和细胞活力探针。由于它是一种实验室试剂,因此通常不对其药代动力学性质进行表征。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
对大鼠口服 LDLo 500 mg/kg(美国国家科学院、国家研究委员会、化学与生物学协调中心,《评论》,5(24),1953);对小鼠静脉注射 LDLo 179 mg/kg(《毒理学与应用药理学》,44(225),1978 [PMID:79242])。
刃天青钠盐通常被认为是安全的实验室试剂。该化合物广泛用于细胞活力和代谢活性测定。现有文献中未报道在研究用浓度下存在显著不良反应。该化合物仅供研究使用。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全操作规程。治疗开发需要进行全面的毒理学评估。
参考文献

[1]. The use of resazurin as a novel antimicrobial agent against Francisella tularensis. Front Cell Infect Microbiol. 2013 Dec 6;3:93.

其他信息
刃天青是一种吩恶嗪类化合物。它可用作pH指示剂、次亚硫酸盐检测剂以及食品研究(还原酶测定)。
指示剂和试剂
指示剂和试剂是指用于检测、识别、分析等化学、生物或病理过程或状况的物质。指示剂是指在化学滴定终点附近(例如,酸碱转变过程中)物理外观(例如颜色)发生变化的物质。试剂是指用于通过化学或显微镜手段(尤其是分析方法)检测或测定其他物质的物质。试剂的类型包括沉淀剂、溶剂、氧化剂、还原剂、助熔剂和比色试剂。
刃天青可诱导氧化应激,导致HL-60和Jurkat白血病细胞中活性氧(ROS)的产生和线粒体损伤,从而诱导自噬和细胞死亡。该染料本身可以抑制白血病细胞增殖,这对于毒性和化疗耐药性筛选至关重要。这凸显了检测方法中阳性和阴性对照实验的重要性,以确保不存在非特异性相互作用效应。
刃天青钠盐(阿拉玛蓝)是一种蓝色非荧光染料,在活细胞中被还原为粉红色荧光染料试卤灵(激发波长530-560 nm,发射波长590 nm)。它被广泛用作细胞活力的代谢指示剂。该化合物可抑制淋病奈瑟菌的生长,并可用作氧化还原指示剂。其分子式为C12H6NO4Na,分子量为251.2 g/mol。所有应用均仅限于非人体研究用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C12H6NNAO4
分子量
251.1701
精确质量
251.019
元素分析
C, 57.38; H, 2.41; N, 5.58; Na, 9.15; O, 25.48
CAS号
62758-13-8
相关CAS号
550-82-3 (free acid)
PubChem CID
112939
外观&性状
Light brown to black solid powder
沸点
477.2ºC at 760 mmHg
熔点
>200ºC
闪点
242.4ºC
LogP
2.47
tPSA
78.73
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
0
重原子数目
18
分子复杂度/Complexity
427
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
IVGPGQSSDLDOLH-UHFFFAOYSA-M
InChi Code
InChI=1S/C12H7NO4.Na/c14-7-1-3-9-11(5-7)17-12-6-8(15)2-4-10(12)13(9)16;/h1-6,14H;/q;+1/p-1
化学名
sodium;10-oxido-7-oxophenoxazin-10-ium-3-olate
别名
Resazurin sodium salt; 62758-13-8; Resazurin sodium; 3H-Phenoxazin-3-one, 7-hydroxy-, 10-oxide, sodium salt; sodium;10-oxido-7-oxophenoxazin-10-ium-3-olate; Diazoresorcinol (sodium); Resazurin (sodium); MFCD00005036;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~5 mg/mL (~19.91 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 3.9814 mL 19.9068 mL 39.8137 mL
5 mM 0.7963 mL 3.9814 mL 7.9627 mL
10 mM 0.3981 mL 1.9907 mL 3.9814 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们