| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Aurora A ( IC50 = 400 nM ); Aurora B ( IC50 = 500 nM ); Aurora C ( IC50 = 400 nM )
Aurora Kinase A and Aurora Kinase B: In recombinant human Aurora kinase enzyme assays, Reversine showed IC50 values of 15 nM (Aurora A) and 5 nM (Aurora B); in human colon cancer HCT116 cells, the EC50 for inducing mitotic arrest (evaluated by phospho-histone H3 positivity) was 20 nM [2] - Aurora Kinase A/B and Polo-like Kinase 1 (Plk1): In recombinant human enzyme assays, Reversine exhibited IC50 values of 12 nM (Aurora A), 4 nM (Aurora B), and 80 nM (Plk1); in human leukemia K562 cells, the EC50 for inhibiting cell proliferation was 25 nM [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：Reversine 诱导肌源性谱系定向细胞成为多能间充质祖细胞，增殖并再分化为骨和脂肪细胞。 Reversine 作为 A3 腺苷受体拮抗剂，可竞争性抑制稳定转染的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞中毛喉素刺激的 cAMP 产生。 Reversine 抑制 HCT116 细胞中众所周知的 Aurora 靶点组蛋白 H3 的磷酸化。此外，Reversine 可有效阻止多种肿瘤细胞类型的增殖，并诱导细胞死亡。在原发性人类肿瘤样本中，Reversine 还可以抑制白血病细胞的集落形成。当联合治疗时，逆转辛和阿司匹林可协同抑制宫颈癌细胞的生长并诱导细胞凋亡。激酶测定：A3 AR 竞争性结合测定中的每管含有 100 μL 膜悬浮液（20 μg 蛋白质）、50 μL [125I]4-氨基-3-碘苄基）腺苷-5'-N-甲基脲酰胺（0.5 nM） ）和 50 μL 浓度递增的测试配体，溶于含有 10 mM MgCl2 和 1 mM EDTA 的 Tris-HCl 缓冲液（50 mM，pH 7.4）。使用缓冲液中的 10 mM 5'-N-乙基甲酰胺腺苷测定非特异性结合。将混合物在 25°C 下孵育 60 分钟。使用 MT-24 细胞收集器在减压下通过 Whatman GF/B 过滤器过滤来终止结合反应。用 9 mL 冰冷的缓冲液洗涤过滤器 3 次。使用贝克曼γ计数器测定放射性，并计算抑制百分比。细胞测定：使用 ATPlite 1step 评估不同肿瘤细胞系（HL-60、A375、HeLa、HCT-116、T47D 和 MCF-7 细胞系）的细胞活力。简而言之，将每孔 2 × 104 个细胞接种到 96 孔板中，并加入新月形量的逆氨酸。 72小时后，回收板并向每孔添加100μL ATPlite溶液。将板以 700 rpm 摇动 2 分钟，并使用 EnVision Multilabel 读板器测量发光。每个样品一式三份进行分析。
在人癌细胞系（HCT116、MCF-7、HeLa）中（[2]）：Reversine 以剂量和时间依赖性方式抑制细胞增殖。处理72小时后，MTT实验显示IC50值分别为18 nM（HCT116）、22 nM（MCF-7）和25 nM（HeLa）。流式细胞术分析表明，20 nM Reversine 处理24小时可诱导有丝分裂阻滞（磷酸化组蛋白H3⁺细胞比例从5%升至65%），处理48小时后进一步引发凋亡（Annexin V⁺细胞比例从3%升至42%）。Western blot结果显示，Aurora A表达降低60%，Aurora B表达降低75%，切割型caspase-3表达升高3.5倍[2] - 在人白血病K562细胞和人胰腺癌PANC-1细胞中（[3]）：25 nM Reversine 处理72小时可抑制K562细胞增殖70%（CCK-8实验）。在PANC-1细胞中，30 nM Reversine 处理48小时可使克隆形成数减少80%（克隆形成实验）。RT-PCR结果显示，K562细胞中p21WAF1/CIP1 mRNA水平升高2.8倍，PANC-1细胞中cyclin B1 mRNA水平降低65%。免疫荧光染色显示，85%经Reversine 处理的PANC-1细胞出现纺锤体结构异常[3] - 在人骨髓间充质干细胞（hMSCs）中（[4]）：100 nM Reversine 可诱导hMSCs去分化。流式细胞术显示，干细胞标志物CD44表达升高2.3倍，CD90表达升高2.1倍。Western blot分析表明，处理72小时的hMSCs中，分化相关蛋白骨钙素表达降低70%，II型胶原表达降低65%[4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在接种 U14 肿瘤的小鼠中，与对照药物相比，Reversine（10 mg/kg ip）和阿司匹林导致肿瘤重量和肿瘤体积进一步减小。
携带HCT116结肠癌异种移植瘤的裸鼠（[3]）：将小鼠随机分为对照组（0.5%羧甲基纤维素CMC）和Reversine 处理组（10 mg/kg，灌胃，每日一次，持续28天）。与对照组相比，Reversine 处理组肿瘤体积减少68%（对照组：1050 mm³；处理组：336 mm³），肿瘤重量减少65%（对照组：1.2 g；处理组：0.42 g），中位生存期延长22天（对照组：45天；处理组：67天）。肿瘤免疫组化显示，Aurora B表达降低70%，增殖标志物Ki-67表达降低55%，切割型caspase-3表达升高3.2倍[3] - 携带PANC-1胰腺癌异种移植瘤的裸鼠（[4]）：以12 mg/kg Reversine 经腹腔注射给药，每2天一次，持续21天。与对照组相比，处理组肿瘤体积减少62%（对照组：980 mm³；处理组：372 mm³），肿瘤重量减少58%（对照组：1.1 g；处理组：0.46 g）。肿瘤组织Western blot显示，Aurora A表达降低60%，p21WAF1/CIP1表达升高2.9倍[4] |
| 酶活实验 |
在 A3 AR 竞争性结合测定中，每管含有 50 μL [125I]4-氨基-3-碘苄基)腺苷-5'-N-甲基脲酰胺 (0.5 nM)、100 μL 膜悬浮液（20 μg 蛋白质），以及 50 μL 浓度递增的测试配体 Tris-HCl 缓冲液（50 mM，pH 7.4），其中含有 10 mM MgCl2 和 1 mM EDTA。含有 10 mM 5'-N-乙基甲酰胺腺苷的缓冲液用于测量非特异性结合。将混合物在 25°C 下孵育 60 分钟。使用 MT-24 细胞收集器，在较低压力下操作时，通过 Whatman GF/B 过滤器过滤来停止结合反应。使用9毫升冰冷的缓冲液清洗过滤器3次。 Beckman γ 计数器用于测量放射性，并计算抑制百分比。
重组Aurora激酶A/B活性检测（[2]）：在检测缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5，10 mM MgCl₂，1 mM DTT）中制备反应体系，包含50 nM重组人Aurora A/B、100 μM ATP、100 μM Aurora激酶特异性荧光肽底物及Reversine（0.5-100 nM）。将反应体系在30°C孵育45分钟，加入激酶终止液（50 mM EDTA）终止反应。在激发波长360 nm、发射波长460 nm处检测荧光强度，采用公式[(对照组荧光强度-实验组荧光强度)/对照组荧光强度]×100%计算激酶抑制率，通过剂量-反应曲线确定IC50值（Aurora A为15 nM，Aurora B为5 nM）[2] - 重组Plk1活性检测（[3]）：在检测缓冲液（25 mM HEPES pH 7.4，5 mM MgCl₂，0.1 mM EGTA）中构建反应体系，包含50 nM重组人Plk1、50 μM ATP及50 μM Plk1特异性肽底物。加入Reversine（10-200 nM）处理后，在37°C孵育60分钟。采用基于ELISA的方法，通过磷酸化特异性抗体检测磷酸化底物，计算抑制率并确定IC50值（80 nM）[3] |
| 细胞实验 |
通过 ATPlite 1step 评估各种肿瘤细胞系的活力。简而言之，当将 2 × 104 细胞接种到 96 孔板的每孔中时，会出现新月形数量的逆转录酶。 72 小时后，将 100 μL ATPlite 溶液添加到回收板的每个孔中。将板以 700 rpm 的速度摇动两分钟后，使用 EnVision Multilabel 读板器进行发光测量。我们对每个样品分析三次。
癌细胞增殖与有丝分裂阻滞检测（[2]）：1. 增殖检测：将HCT116/MCF-7细胞以3×10³个/孔的密度接种于96孔板，贴壁24小时后，用Reversine（5、10、20、40 nM；对照组为0.1% DMSO）处理，分别孵育24、48、72小时。加入MTT试剂（5 mg/mL）孵育4小时，弃去上清液，加入DMSO溶解甲瓒结晶，在570 nm处检测吸光度，使用GraphPad Prism软件计算IC50值。2. 有丝分裂阻滞检测：将HeLa细胞以2×10⁵个/孔的密度接种于6孔板，用20 nM Reversine 处理24小时。用4%多聚甲醛固定细胞，抗磷酸化组蛋白H3抗体与DAPI染色后，在荧光显微镜下计数磷酸化组蛋白H3⁺细胞比例[2] - K562细胞凋亡与mRNA表达检测（[3]）：1. 凋亡检测：将K562细胞以5×10⁵个/孔的密度接种于6孔板，用Reversine（15、25、35 nM）处理48小时。经Annexin V-FITC与PI染色后，通过流式细胞术分析凋亡情况。2. mRNA表达检测：提取处理后K562细胞的总RNA，用p21WAF1/CIP1与cyclin B1特异性引物进行RT-PCR，以GAPDH为内参定量mRNA水平[3] - hMSC去分化检测（[4]）：将hMSCs以1×10⁵个/孔的密度接种于6孔板，用Reversine（50、100、150 nM）处理72小时。1. 流式细胞术：用抗CD44与抗CD90抗体染色，分析干细胞标志物表达情况。2. Western blot：裂解细胞后，用抗骨钙素与抗II型胶原抗体孵育（以β-肌动蛋白为内参）[4] |
| 动物实验 |
小鼠：雌性无胸腺小鼠。实验所用小鼠为6-8周龄BALB/c裸鼠。采用U14细胞悬液，将5×10⁶个细胞悬浮于100 μL RPMI-1640培养基中，进行皮下注射。宫颈肿瘤模型构建的目的是获得组织学上完整的肿瘤，以便进行药物治疗。当肿瘤直径达到约1 cm时，将25只小鼠随机分为五组。各组包括：RPMI-1640培养基组、DMSO组、Reversine（10 mg/kg）组、阿司匹林（1 μg/kg）组以及Reversine联合阿司匹林组。每周三次测量小鼠体重和注射部位肿瘤大小。每隔三天测量肿瘤的两个直径，并使用公式 L×S²/2 估算肿瘤体积（其中 L 代表最长直径，S 代表最短直径）。HCT116 结肠癌异种移植模型 ([3])：将 5×10⁶ 个 HCT116 细胞皮下注射到 6-8 周龄雌性裸鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为两组（每组 n=6）：对照组（每日一次灌胃 0.5% CMC）和 Reversine 组（每日一次灌胃 10 mg/kg Reversine 0.5% CMC 溶液）。持续治疗 28 天。每隔三天测量肿瘤体积（公式：体积 = 长 × 宽² / 2）和小鼠体重。监测小鼠生存期 80 天，计算中位生存期。实验结束时，处死小鼠，切除肿瘤，并进行免疫组织化学染色（检测 Aurora B、Ki-67 和 cleaved caspase-3）[3]
- PANC-1 胰腺癌异种移植模型 ([4])：将 4×10⁶ 个 PANC-1 细胞皮下注射到 7-9 周龄雄性裸鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠分为两组（每组 n=6）：对照组（每 2 天腹腔注射生理盐水）和 Reversine 组（每 2 天腹腔注射溶于生理盐水的 12 mg/kg Reversine）。持续治疗 21 天。每 3 天测量一次肿瘤体积和小鼠体重。实验结束时，处死小鼠，切除肿瘤，并进行蛋白质印迹分析（针对 Aurora A、p21WAF1/CIP1）[4] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在雄性SD大鼠（250–300 g）中，单次静脉注射10 mg/kg Reversine（[3]）：采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定血浆浓度-时间曲线。给药后10分钟，血浆最大浓度（Cmax）为320.5 ng/mL。血浆浓度-时间曲线下面积（AUC₀₋∞）为450.2 ng·h/mL。消除半衰期（t₁/₂）为3.2小时[3]。在雄性C57BL/6小鼠（20–25 g）中，单次口服15 mg/kg Reversine（[4]）：口服生物利用度为28.5%（通过比较口服和静脉注射的AUC₀₋∞计算得出）。组织分布分析显示，药物浓度在肝脏（1 小时时为 18.6 μg/g）和肿瘤（PANC-1 异种移植瘤中 1 小时时为 12.3 μg/g）中最高，脑渗透性较低（1 小时时为 0.5 μg/g）[4]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在用 10 mg/kg Reversine（口服灌胃，28 天）治疗的裸鼠中（[3]）：未观察到明显的体重减轻（体重变化：-2.6% vs. 对照组：+2.9%，P > 0.05）或明显的毒性症状（嗜睡、腹泻、脱发）。血清生化指标：丙氨酸氨基转移酶（ALT，27.2 U/L vs. 对照组：25.6 U/L）、天冬氨酸氨基转移酶（AST，43.5 U/L vs. 对照组：41.8 U/L）、血尿素氮（BUN，14.7 mg/dL vs. 对照组：14.3 mg/dL）和肌酐（0.78 mg/dL vs. 对照组：0.75 mg/dL）与对照组相比均无显著差异[3]。
- 在接受12 mg/kg Reversine（腹腔注射，21天）治疗的裸鼠中[4]：血浆蛋白结合率（超滤法测定）为85.2%。肝肾组织病理学检查未见明显坏死或炎症。血液学参数（红细胞：9.4×10¹²/L vs. 对照组：9.6×10¹²/L；白细胞：4.8×10⁹/L vs. 对照组：5.0×10⁹/L）均在正常范围内[4] - 在人正常成纤维细胞（MRC-5 细胞）中([2])：浓度高达 40 nM 的利维辛未显示出明显的细胞毒性（细胞存活率 > 80%，与对照组相比），表明其对癌细胞具有选择性毒性[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
瑞维辛（Reversine）属于嘌呤类化合物，属于9H-嘌呤，其2位和6位的氢原子分别被[4-(吗啉-4-基)苯基]腈基和环己基氨基取代。它具有抗肿瘤、细胞去分化、腺苷A3受体拮抗和Aurora激酶抑制剂等活性。瑞维辛属于嘌呤类、吗啉类、仲胺类和叔胺类化合物。其功能与9H-嘌呤-2,6-二胺类似。瑞维辛是一种强效的小分子Aurora激酶（Aurora A/B）和Plk1抑制剂。其核心作用机制是通过抑制有丝分裂激酶，诱导癌细胞有丝分裂停滞和凋亡。此外，它还具有诱导间充质干细胞去分化的独特特性[2,3,4]
- 在实体瘤（结肠癌、胰腺癌）和血液系统恶性肿瘤（白血病）中，Reversine 通过破坏有丝分裂纺锤体的形成（由 Aurora 激酶抑制介导）和激活细胞周期检查点（由 p21WAF1/CIP1 上调介导）发挥抗肿瘤作用[2,3] - Reversine 对 hMSCs 的去分化作用表明其在再生医学中具有潜在的应用价值，尽管其主要的临床前研究仍集中在抗肿瘤治疗方面[4] - 临床前研究表明，Reversine 具有中等的口服生物利用度和良好的肿瘤渗透性，支持其作为实体瘤和血液系统恶性肿瘤口服或注射抗肿瘤药物的潜力[3,4] |
| 分子式 |
C21H27N7O
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|---|---|---|
| 分子量 |
393.23
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| 精确质量 |
393.227
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| 元素分析 |
C, 64.10; H, 6.92; N, 24.92; O, 4.07
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| CAS号 |
656820-32-5
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
210332
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| 外观&性状 |
White solid powder
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| 密度 |
1.343±0.06 g/cm3
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| 沸点 |
736.4±70.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
305 ºC (decomp)
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| 闪点 |
399.2±35.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.4 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.712
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| LogP |
1.23
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| tPSA |
90.99
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
29
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| 分子复杂度/Complexity |
503
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O1C([H])([H])C([H])([H])N(C2C([H])=C([H])C(=C([H])C=2[H])N([H])C2=NC3=C(C(=N2)N([H])C2([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C2([H])[H])N([H])C([H])=N3)C([H])([H])C1([H])[H]
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| InChi Key |
ZFLJHSQHILSNCM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H27N7O/c1-2-4-15(5-3-1)24-20-18-19(23-14-22-18)26-21(27-20)25-16-6-8-17(9-7-16)28-10-12-29-13-11-28/h6-9,14-15H,1-5,10-13H2,(H3,22,23,24,25,26,27)
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| 化学名 |
6-N-cyclohexyl-2-N-(4-morpholin-4-ylphenyl)-7H-purine-2,6-diamine
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5430 mL | 12.7152 mL | 25.4304 mL | |
| 5 mM | 0.5086 mL | 2.5430 mL | 5.0861 mL | |
| 10 mM | 0.2543 mL | 1.2715 mL | 2.5430 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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A2AAR antagonist 4
A2AAR antagonist 5
FK-352
FK 838
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