| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Target: AMPA-type glutamate receptors [2]
Subunit-specific affinity: High affinity for GluR1 (Kd ~3-4 nM) and GluR2 (Kd ~7-12 nM) subunits; Lower affinity for GluR3 (Kd ~150-800 nM) and GluR4 (Kd ~150-800 nM) subunits. [2] AMPA (α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid) receptor, a subtype of ionotropic glutamate receptor. (S)-5-Fluorowillardiine acts as an agonist. [1][2][3] Binding Affinity (KD) for Recombinant Homomeric Receptors (at 0°C): GluR1 flop: 2.9 ± 0.17 nM; GluR1 flip: 4.6 ± 0.54 nM; GluR2 flop: 8.4 ± 0.77 nM; GluR2 flip: 19 ± 2 nM (with a low-affinity component of 242 nM, 73%); GluR3 flop: 200 ± 31 nM; GluR3 flip: 178 ± 16 nM; GluR4 flop: 164 ± 29 nM; GluR4 flip: 245 ± 96 nM (with a low-affinity component of 99 nM, 88%). [2] Binding Affinity (KD) for Native Rat Brain Receptors (at 25°C): High-affinity component: 22 ± 8% of sites, KD approx. 22 nM; Low-affinity component (dominant, ~92% of sites): KD approx. 964 nM. [2] Binding Affinity (KD) for Solubilized Rat Brain Receptors: Complex, with multiple components showing affinities between 2 and 650 nM, reflecting the mixture of GluR1-4 subunits. [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
- 结合特征： 在大鼠脑膜中，[³H](S)-5-氟代哇巴因 的结合显示出两个不同的亲和力组分（高亲和力：~20 nM，~8% 的位点；低亲和力：~1 µM，~92% 的位点）。截短 C 末端或使受体溶解会改变结合特征，表明膜环境的影响。[2]
- 变构调节剂对结合的影响： 在 KSCN（50 mM）存在下，[³H]FW 结合的低亲和力组分增加了 4 倍以上，但两个结合组分仍然存在。AMPA 受体正变构调节剂（例如 CX614， D1， LY392098）增加 [³H]FW 结合（例如，D1 在无 KSCN 时使结合增加 234±13%，EC50 为 17 µM）。负变构调节剂环噻嗪减少结合（最大减少约 60%）。非竞争性拮抗剂 GYKI 53655 引起小的结合增加（约 10%）。[1][2] - 亚基选择性： [³H]FW 对 GluR1 和 GluR2 亚基表现出高亲和力（KD 3-19 nM），但对 GluR3 和 GluR4 亚基的亲和力低 20-100 倍（KD 160-600 nM），表明其对含有 GluR1 和 GluR2 亚基的受体有强烈偏好。[2] - NSC-34 细胞中的兴奋性毒性： 在小鼠神经母细胞瘤×脊髓杂交细胞中，(S)-5-氟代哇巴因 诱导剂量依赖性的细胞活力下降，500 µM 处理 72 小时导致约 50% 的细胞死亡。兴奋性毒素的效力顺序为 (S)-AMPA > (S)-5-FW > L-谷氨酸。这种兴奋性毒性可被 AMPA 受体拮抗剂 CNQX 阻断（10 µM 使细胞活力恢复至对照的约 85%）。[3] - 作用机制： FW 作为一种相对特异性的 AMPA 受体激动剂，诱导 Ca²⁺ 内流，从而在运动神经元样的 NSC-34 细胞中引发兴奋性毒性细胞死亡。[3] [³H]Fluorowillardine 与大鼠脑膜的结合表现出高亲和力和低亲和力两种成分，Kd 值分别约为 20 nM 和 1 μM，其中低亲和力位点约占所有结合位点的 90%。 [2] 当用未标记的 Fluorowillardine 置换拮抗剂 [³H]CNQX 与大鼠脑膜的结合时，显示出两种亲和力成分，Kd 值分别为 32 nM 和 1.5 μM。 [2] 对大鼠脑膜可溶性受体的结合研究表明，[³H]Fluorowillardine 存在多种亲和力成分，Kd 值在 2 到 650 nM 之间。 [2] 由于其亚基偏好性，[³H]Fluorowillardine 与脑膜的结合极大地偏向于 GluR1 和 GluR2 亚基。 [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
(S)-(-)-5-氟代尿嘧啶丙氨酸在体内使用时被确定为一种兴奋性神经毒素，这限制了其在完整动物研究中的应用 。由于这种毒性，它很少在活体动物模型中用于治疗或功能研究。其主要价值在于作为精确的药理学探针，在离体组织制备物或体外系统中选择性刺激AMPA受体 。作为一种发现性试剂，它仍然是一种研究工具，而非治疗候选药物 。
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| 酶活实验 |
为表征[³H]氟代威拉啶与AMPA受体的相互作用，进行了结合实验。在饱和结合实验中，将大鼠脑膜与不同浓度的[³H]氟代威拉啶（例如3–2000 nM）在25°C（或0°C）下孵育60分钟。通过离心终止孵育。冲洗并溶解膜沉淀，然后通过闪烁计数测量放射性。非特异性结合在5 mM L-谷氨酸存在下测定。使用非线性回归分析数据以确定Kd和Bmax值。[2]
在竞争结合实验中，于25°C下在大鼠脑膜中测量了未标记氟代威拉啶对[³H]CNQX（40 nM）的置换。将膜与[³H]CNQX和不同浓度的氟代威拉啶一起孵育。通过离心终止结合，并如上处理样品。拟合置换曲线以确定IC50值，并使用Cheng-Prusoff方程进行校正以估算Kd值。[2] 此外，还对在HEK293细胞中表达的重组同源AMPA受体（GluR1-4）进行了研究。将透化细胞与[³H]氟代威拉啶在0°C下孵育。通过玻璃纤维滤器过滤终止结合，然后用含硫氰酸盐的冷冻缓冲液快速洗涤以最大程度减少解离。使用5 mM谷氨酸定义非特异性结合。[2] 通常使用大鼠脑膜制备物或在HEK293细胞中表达的重组同源AMPA受体来进行(S)-(-)-5-氟代威拉啶的结合实验。标准的饱和结合实验方案包括将膜与不同浓度的[³H]氟代威拉啶（例如3–2000 nM）在25°C（或0°C）下孵育60分钟。通过离心终止孵育，然后冲洗膜沉淀。随后将沉淀溶解，并通过闪烁计数测量放射性。在5 mM L-谷氨酸存在下测定非特异性结合。使用非线性回归进行数据分析以确定Kd和Bmax值。在竞争结合实验中，在相似条件下测量未标记的氟代威拉啶对[³H]CNQX（40 nM）的置换。 |
| 细胞实验 |
- NSC-34 细胞兴奋性毒性实验： 将 NSC-34 细胞接种于 96 孔板（1x10⁴ 细胞/孔），分化 24 小时。实验时，将培养基更换为不含 FCS 的 DMEM 以消除 Ca²⁺ 的缓冲作用。用此培养基对 (S)-5-氟代哇巴因 进行系列稀释并加入孔中。孵育 72 小时后，使用 MTT 还原法评估细胞活力。通过剂量反应研究确定 500 µM FW 可导致约 50% 的细胞死亡，该浓度被用作后续实验的“设定点”。[3]
- 拮抗剂解救实验： NSC-34 细胞用 (S)-5-氟代哇巴因（500 µM）和系列稀释的 AMPA 受体拮抗剂 CNQX（2.5, 5, 10 µM）共同处理。72 小时后，通过 MTT 实验测量细胞活力。10 µM 的 CNQX 显著保护了细胞，将细胞活力恢复至对照水平的约 85%。[3] - NSC-34 细胞系表征： Western blot 分析证实 NSC-34 细胞表达神经元标志物（β-tubulin III， NeuN， NF150）和运动神经元标志物（ChAT， p75， nAChR），以及全部四种 AMPA 受体亚基（GluR1-4）。与其他亚基相比，GluR2 的水平较低。[3] 使用(S)-(-)-5-氟代尿嘧啶丙氨酸的细胞实验主要是针对细胞膜制备物的结合研究，而非功能性细胞活力或信号传导实验 。针对在HEK293细胞中表达的重组同源AMPA受体（GluR1-4）的代表性实验方案如下：将透化细胞与[³H]标记的化合物在0°C下孵育 。通过玻璃纤维滤器过滤终止结合，然后用含硫氰酸盐的冷冻缓冲液快速洗涤以最小化配体解离。使用5 mM谷氨酸定义非特异性结合 。该化合物通常不用于标准的细胞毒性或增殖实验，而是作为放射性配体用于受体占用研究。 |
| 动物实验 |
由于其已确定的兴奋性神经毒性，该化合物很少（如果有的话）用于完整动物模型的治疗或药效学评估 。其用途几乎完全局限于离体制备物（如脑片或原代神经元培养物）中研究AMPA受体功能的体外实验。因此，没有来自动物模型的镇痛、抗癌或其他治疗功效数据可供参考。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
作为一种研究用工具化合物而非治疗候选物，尚未进行详细的ADME特性分析。其理化性质为计算预测值：LogP值为-1.54，LogD（pH 7.4）为-4.26，表明其具有高亲水性 。极性表面积为113 Ų 。该化合物的分子量为217.15 g/mol，遵循Lipinski规则，有一个违规项 。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在所述研究的背景下，(S)-5-氟代哇巴因 被用作工具药在体外诱导兴奋性毒性细胞死亡。在 NSC-34 细胞中，500 µM FW 处理 72 小时导致约 50% 的细胞死亡，这证明了其通过 AMPA 受体过度刺激产生神经毒性潜力。未提供体内毒性数据（如 LD50）。[3]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
3-(5-氟尿嘧啶-1-基)-L-丙氨酸是一种丙氨酸衍生物，即在3位带有5-氟尿嘧啶-1-基取代基的L-丙氨酸。它是一种比AMPA本身更有效、选择性更高的AMPA受体激动剂（对hGluR1和hGluR2受体的激动作用更强，其Ki值分别为14.7 nM、25.1 nM和1820 nM）。它是一种有机氟化合物，属于非蛋白源性L-α-氨基酸，也是L-丙氨酸的衍生物。其功能与尿嘧啶相关。
(S)-(-)-5-氟威拉定是一种放射性标记的激动剂，用作研究AMPA受体药理学和变构调节剂作用的工具化合物。 [2] 与[³H]AMPA相比，它具有更高的亲和力，且受离液阴离子硫氰酸根的影响较小，因此是一种适用于各种条件下结合实验的实用配体。[2] 其显著的亚基选择性（对GluR1/2高，对GluR3/4低）意味着从天然脑膜获得的结合数据主要反映了药物在含有GluR1和GluR2的受体上的作用。[2] 该研究强调了优化过滤实验条件（例如，在洗涤缓冲液中加入硫氰酸根、冷却缓冲液、尽量缩短洗涤时间）以减少放射性配体解离损失的重要性，尤其是在低亲和力受体位点。[2] - 药理学工具： (S)-5-氟代哇巴因 是研究 AMPA 受体药理学（包括变构调节和亚基特异性功能）的重要研究工具。其结合特征与 AMPA 不同，对 GluR1/2 和 GluR3/4 之间的亲和力差异更大。[2] - 在 ALS 研究中的应用： FW 对 NSC-34 细胞的兴奋性毒性效应被用于验证靶向 AMPA 受体亚基 GluR3 的反义 PNA 的效力。用反义 PNA 预处理可保护 NSC-34 细胞免受 FW 诱导的细胞死亡，证实下调 GluR3 可以减轻兴奋性毒性。这作为潜在 ALS 疗法的概念验证。[3] - 结合实验的实验注意事项： 对于 [³H]FW 结合实验，推荐使用离心法而非过滤法以避免低亲和力结合位点的丢失。如果必须使用过滤法，洗脱缓冲液必须含有 KSCN（50 mM）并保持在 0°C 以尽量减少配体解离。[2] - 无活性对映体： 对映体 (R)-5-fluorowillardiine 被认为基本无活性，在一些药理学研究中用作阴性对照。[2] |
| 分子式 |
C7H8N3O4F
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|---|---|
| 分子量 |
217.15452
|
| 精确质量 |
217.05
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| CAS号 |
140187-23-1
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| 相关CAS号 |
(S)-(-)-5-Fluorowillardiine hydrochloride;1321546-70-6
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| PubChem CID |
126569
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.64 g/cm3
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| 熔点 |
235ºC
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| 折射率 |
1.601
|
| LogP |
-4.4
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| tPSA |
118.18
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
15
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| 分子复杂度/Complexity |
354
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
OC([C@@H](N)CN1C=C(F)C(NC1=O)=O)=O
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| InChi Key |
DBWPFHJYSTVBCZ-BYPYZUCNSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C7H8FN3O4/c8-3-1-11(2-4(9)6(13)14)7(15)10-5(3)12/h1,4H,2,9H2,(H,13,14)(H,10,12,15)/t4-/m0/s1
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| 化学名 |
(2S)-2-amino-3-(5-fluoro-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)propanoic acid
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| 别名 |
5-Fluorowillardiine; (S)-5-FLUOROWILLARDIINE; (alphaS)-alpha-Amino-5-fluoro-3,4-dihydro-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinepropanoic acid; (S)-alpha-Amino-5-fluoro-3,4-dihydro-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimmidinepropanoic acid;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.6051 mL | 23.0256 mL | 46.0511 mL | |
| 5 mM | 0.9210 mL | 4.6051 mL | 9.2102 mL | |
| 10 mM | 0.4605 mL | 2.3026 mL | 4.6051 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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463611831
