| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 50mg |
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| 靶点 |
PPP1R15A (stress-induced regulatory subunit of protein phosphatase 1)
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| 体外研究 (In Vitro) |
Sephin1 (50 μM) 选择性地破坏了经 2.5 μg/ml 衣霉素处理的 HeLa 细胞中的 PPP1R15A-PP1c 复合物，而对 PPP1R15B-PP1c 复合物无影响，这已通过免疫沉淀和免疫印迹实验证实。[1] Sephin1 (50 μM) 延长了衣霉素应激后 eIF2α 在 Ser51 位点的磷酸化，延迟了翻译恢复（通过 35S 甲硫氨酸掺入测定），并降低了促凋亡蛋白 CHOP 的表达，同时延长了 ATF4 的表达。[1] 在没有应激的情况下，Sephin1 (50 μM) 不影响 eIF2α 信号通路。[1] Sephin1 不抑制催化亚基 PP1c（图 S3）。 [1] Sephin1 以剂量依赖的方式保护野生型细胞免受衣霉素诱导的细胞毒性内质网应激（在 Ppp1r15a 突变细胞中保护作用消失，图 1F）。[1] 与胍那苄 (GBZ) 不同，Sephin1 在表达重组人 α2A 肾上腺素能受体的细胞中未表现出可测量的 α2-肾上腺素能激动剂活性。[1]
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| 体内研究 (In Vivo) |
在MPZ突变小鼠（Charcot-Marie-Tooth 1B模型）中，口服Sephin1（1 mg/kg，每日两次）3个月可完全预防4月龄时通过转棒试验检测到的运动缺陷。[1]
Sephin1（1 mg/kg，每日两次，持续5个月）可恢复MPZ突变小鼠坐骨神经轴突周围的髓鞘厚度（通过g比值测量），并降低内质网应激标志物（例如CHOP、BiP）的水平。[1] 在SOD1G93A（SOD1突变）ALS小鼠模型中，口服Sephin1（5 mg/kg，每日一次，从4周龄到11周龄）几乎完全预防了进行性体重下降和运动功能障碍（110日龄时的转棒试验分析）。[1] Sephin1（5 mg/kg，每日一次）可预防SOD1突变小鼠腰椎脊髓中的运动神经元丢失（NeuN染色）。 [1] Sephin1 可阻止不溶性 SOD1 突变体的积累，并降低转基因小鼠脊髓中的内质网应激标志物（CHOP、BiP）。[1] |
| 酶活实验 |
生物素标记的Sephin1选择性地捕获了中性链霉亲和素磁珠上的重组PPP1R15A片段（氨基酸325-636），但未捕获相关的PPP1R15B片段（氨基酸340-698），这通过考马斯亮蓝染色凝胶分析输入和结合组分得到证实。[1]
用载体、50 μM GBZ或50 μM Sephin1处理细胞6小时后，对细胞裂解液中的PPP1R15复合物进行免疫沉淀，并通过免疫印迹分析评估PPP1R15A-PP1c相互作用的破坏情况。Sephin1选择性地破坏了应激诱导的PPP1R15A-PP1c复合物，而保留了组成型PPP1R15B-PP1c复合物。[1] |
| 细胞实验 |
将 HeLa 细胞在有或无 50 μM Sephin1 的情况下，用 2.5 μg/ml 衣霉素处理指定时间，然后裂解细胞，并通过免疫印迹分析磷酸化 eIF2α (Ser51)、CHOP 和 ATF4 的表达。[1]
在用衣霉素处理 HeLa 细胞（有或无 50 μM GBZ 或 Sephin1）后，用 35S 甲硫氨酸标记新合成的蛋白质；通过放射自显影和考马斯亮蓝染色凝胶监测翻译恢复情况。[1] 细胞活力保护实验：将野生型或 Ppp1r15a 突变体 (mut/mut) 细胞在 2.5 μg/ml 衣霉素存在下，用递增剂量的 Sephin1 处理；测量细胞存活率以确定剂量依赖性保护作用。Sephin1 可保护野生型细胞，但不能保护 Ppp1r15a 突变体细胞。 [1] α2-肾上腺素能活性测定：用GBZ或Sephin1处理表达重组人α2A肾上腺素能受体的细胞，以测定激动剂活性；Sephin1未显示可测量的活性。[1] |
| 动物实验 |
小鼠：MPZ突变小鼠（CMT1B模型）和SOD1G93A（SOD1突变）ALS模型小鼠，以及野生型对照小鼠。[1]
对于MPZ突变小鼠：从出生后第28天至第61天，每日两次口服Sephin1，剂量为1 mg/kg，用于监测体重；或持续给药3个月（转棒试验）或5个月（组织学检查）。[1] 对于SOD1突变小鼠：从4周龄至11周龄，每日一次口服Sephin1，剂量为5 mg/kg，用于监测体重；或持续给药至110日龄（转棒试验、组织学检查）。[1] 转棒试验：将小鼠置于加速旋转的转棒上；在给药前后（1-5 mg/kg Sephin1）测量其表现。Sephin1并未降低小鼠的转棒表现。 [1] 莫里斯水迷宫：小鼠每天两次接受1 mg/kg Sephin1治疗，持续4周，并接受训练以寻找隐藏平台，训练持续5天（每天5次试验）；移除平台后测量象限占据率。[1] 恐惧条件反射：小鼠每天两次接受1 mg/kg Sephin1治疗，持续4周，接受光/音（条件刺激）和足底电击（非条件刺激）的条件反射训练；在环境和听觉线索测试期间测量僵直反应。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服1或10 mg/kg Sephin1后，该分子迅速从血浆中消失。[1] Sephin1在神经系统中浓集，在脑和坐骨神经中的浓度比血浆高7至44倍（最高达~1 μM），与胍那苄类似。[1] 药代动力学数据见图S5（血浆清除率和组织分布）。[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
与胍那苄相比，Sephin1（1～5 mg/kg）不会导致小鼠转棒测试表现下降，而胍那苄则会产生剂量依赖性的下降。[1]
长期使用Sephin1（1 mg/kg，每日两次，持续1个月）对小鼠体重增加没有可测量的不良影响。[1] Sephin1不损害小鼠在莫里斯水迷宫中的空间学习或记忆能力；Sephin1治疗的小鼠表现出正常的学习和记忆能力。[1] Sephin1不影响恐惧条件反射（情境和听觉线索测试）。[1] Sephin1缺乏α2-肾上腺素能激动剂活性，因此避免了胍那苄的中枢性降压和镇静副作用。[1] 在多种实验范式中均未观察到对一般健康或记忆的不良影响。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Sephin1（一种选择性全磷酸酶抑制剂）是一种源自胍那苄（GBZ）的小分子，它能安全且选择性地抑制体内应激诱导的蛋白磷酸酶1的调节亚基PPP1R15A，而不影响组成型PPP1R15B。[1] Sephin1通过延长eIF2α的磷酸化，增强了适应性整合应激反应，增加了分子伴侣的可用性，并保护细胞免受致命的蛋白质错误折叠应激。[1] Sephin1预防了小鼠中两种不相关的蛋白质错误折叠疾病：夏科-马里-图斯病1B型（CMT1B）和肌萎缩侧索硬化症（ALS）。[1] 这表明磷酸酶的调节亚基可以作为药物靶点，安全地调控细胞蛋白质稳态，从而达到治疗目的。[1]
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| 分子式 |
C8H9N4CL
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|---|---|
| 分子量 |
196.63
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| 精确质量 |
196.052
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| CAS号 |
13098-73-2
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| 相关CAS号 |
Icerguastat;951441-04-6
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| PubChem CID |
9561611
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.35g/cm3
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| 沸点 |
374.2ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
180.1ºC
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| 蒸汽压 |
8.5E-06mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.626
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| LogP |
2.347
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| tPSA |
74.26
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
2
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
13
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| 分子复杂度/Complexity |
210
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| 化学名 |
(2E)-2-[(2-Chlorophenyl)methylene]-hydrazinecarboximidamide
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| 别名 |
Sephin-1 Sephin 1 Sephin1
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 5.0857 mL | 25.4285 mL | 50.8569 mL | |
| 5 mM | 1.0171 mL | 5.0857 mL | 10.1714 mL | |
| 10 mM | 0.5086 mL | 2.5428 mL | 5.0857 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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