| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MNK2 (IC50 = 5.4 nM); MNK1 (IC50 = 10.8 nM)
The targets of SLV-2436 are Mitogen-Activated Protein Kinase-Interacting Kinase 1 (MNK1) and Mitogen-Activated Protein Kinase-Interacting Kinase 2 (MNK2). Key activity data include: - MNK1: IC₅₀ = 1 nM [1] - MNK2: IC₅₀ = 3 nM [1] - Selectivity: No significant inhibition (IC₅₀ > 10 μM) against 30 other kinases (e.g., ERK1, ERK2, JNK1, p38α, AKT1) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
广泛的 KINOMEscan 竞争性结合测定（包括 450 种不同的激酶）在 1 M 下进行，以验证 SLV-2436 (SEL201) 的激酶组选择性。 MNK1 和 MNK2 是 CAMK 激酶家族的一部分，在观察到的 SLV-2436 结合谱中占很大一部分。在用 SLV-2436 处理的 KIT 突变黑色素瘤细胞中观察到致癌性降低和转移能力降低[1]。
1. MNK1/2酶抑制活性: SLV-2436对MNK1和MNK2具有强效且选择性的抑制作用，IC₅₀值分别为1 nM和3 nM。对30种其他激酶的交叉反应极小，证实其高靶点特异性 [1] 2. MNK下游eIF4E磷酸化抑制: - KIT突变黑色素瘤细胞系（M230、M249、M257、M362）：用SLV-2436（0.1–10 μM）处理24小时，Western blot分析显示，Ser209位点的磷酸化eIF4E（p-eIF4E）水平呈剂量依赖性降低，总eIF4E水平无变化 [1] - 正常人黑色素细胞（NHM）：10 μM SLV-2436对p-eIF4E和总eIF4E水平无显著影响 [1] 3. KIT突变黑色素瘤细胞抗增殖活性: - M230、M249、M257、M362细胞：用系列浓度的SLV-2436处理72小时，MTS法检测细胞活力，IC₅₀值范围为0.3 μM（M230）至0.8 μM（M362）[1] - BRAF突变（A375）和NRAS突变（SK-MEL-2）黑色素瘤细胞：IC₅₀ > 10 μM，表明对KIT突变细胞的选择性 [1] - NHM：IC₅₀ > 20 μM，对正常黑色素细胞毒性低 [1] 4. 克隆形成能力及转移相关表型抑制: - 克隆形成实验：M230和M249细胞用SLV-2436（0.1–1 μM）处理14天，集落数量和大小呈剂量依赖性减少，1 μM时集落形成抑制率>70% [1] - 迁移实验：Transwell实验显示，0.5 μM SLV-2436处理24小时后，M230和M249细胞迁移能力分别降低55%和62% [1] - 侵袭实验：基质胶包被的Transwell实验显示，0.5 μM SLV-2436处理48小时后，M230和M249细胞侵袭能力分别降低48%和57% [1] 5. 诱导细胞周期阻滞和凋亡: - 细胞周期分析（流式细胞术）：1 μM SLV-2436处理M230细胞24小时，G₀/G₁期细胞比例增加（68% vs 溶媒对照组52%）[1] - 凋亡实验（Annexin V/PI染色）：1 μM SLV-2436处理M230细胞48小时，凋亡率从对照组的4%升至18%，caspase-3/7活性（荧光素酶法）同步激活 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
每 12 小时给小鼠连续 5 次口服剂量 10、25 和 50 mg/kg（每日两次），以测试 SLV-2436 (SEL201) 的药效作用。第五次给药后 4 小时，每日两次 10 mg/kg 剂量的 SLV-2436 血浆浓度较低，为 125 ng/mL。然而，SLV-2436 剂量为 50 和 100 mg/kg/天，或 25 和 50 mg/kg 每天两次，会导致剂量依赖性血浆暴露显着增加，平均水平为 1,299 ng/mL 和 2,075 ng/mL ， 分别。 24 小时后，血浆中仍可检测到 SLV-2436，每日两次 10、25 和 50 mg/kg 治疗组的剂量依赖性浓度分别为 9、73 和 124 ng/mL。小鼠对口服 (po) SLV-2436 的反应良好，剂量为 50 mg/kg，每天两次，或 100 mg/kg/d，持续 37 天[1]。
1. KIT突变黑色素瘤异种移植模型抗肿瘤疗效: - M230异种移植模型（nu/nu小鼠）：SLV-2436以30 mg/kg或60 mg/kg剂量每日两次口服给药，连续21天，肿瘤生长抑制率（TGI）分别为65%（30 mg/kg）和82%（60 mg/kg），无显著体重下降（<4%）[1] - M249异种移植模型（nu/nu小鼠）：60 mg/kg每日两次口服给药21天，TGI为78%，体重稳定 [1] 2. 体内转移抑制: - 尾静脉转移模型（nu/nu小鼠）：静脉注射M230细胞后，以60 mg/kg每日两次口服给予SLV-2436，连续28天。计数肺转移结节，较溶媒对照组减少75% [1] 3. 体内靶点结合验证: 60 mg/kg SLV-2436处理M230异种移植瘤24小时后，肿瘤组织中p-eIF4E水平降低>80%（Western blot检测），证实体内MNK抑制活性 [1] |
| 酶活实验 |
1. MNK1/2激酶活性测定（基于HTRF技术）:
将重组MNK1或MNK2与生物素化eIF4E衍生多肽底物、ATP（Km浓度）及系列稀释的SLV-2436在 assay缓冲液中混合，30°C孵育90分钟以允许底物磷酸化。加入链霉亲和素偶联的铕穴状化合物和抗磷酸丝氨酸抗体偶联的XL665，检测HTRF信号。以溶媒对照组为基准计算抑制率，通过非线性回归拟合量效曲线，得出IC₅₀值（MNK1为1 nM，MNK2为3 nM）[1] 2. 激酶选择性面板测定: 采用相同的HTRF法，将10 μM SLV-2436对30种重组激酶（包括ERK1、ERK2、JNK1、p38α、AKT1）进行筛选。抑制率<10%被视为无显著抑制，证实其对MNK1/2的高选择性 [1] |
| 细胞实验 |
在 6 孔板中，每孔接种 1,000 个 HBL、MM61、MM111 和 M230 细胞系，并使其粘附过夜。过夜孵育后，对细胞进行 DMSO（对照）或 SLV-2436 (5 μM) 处理。 14天后将培养基从孔中取出，并用0.5%（重量/体积）结晶紫的70%乙醇溶液对细胞进行染色。在室温下一小时后洗掉染色染料后，使用 GelCount 计算菌落计数。测试一式三份进行[1]。
1. 细胞增殖（MTS）实验: 将KIT突变黑色素瘤细胞（M230、M249等）、BRAF/NRAS突变黑色素瘤细胞及正常NHM以3×10³个细胞/孔接种于96孔板，过夜培养。加入系列浓度的SLV-2436，在37°C、5% CO₂条件下孵育72小时。加入MTS试剂，4小时后在490 nm波长下测定吸光度，通过吸光度与化合物浓度的关系曲线计算IC₅₀值 [1] 2. p-eIF4E Western blot检测: 黑色素瘤细胞或NHM接种于6孔板，培养至80%汇合度。用SLV-2436（0.1–10 μM）处理24小时后，用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞。将25 μg等量蛋白经SDS-PAGE电泳分离，转移至PVDF膜，用5%脱脂牛奶封闭。膜与抗p-eIF4E（Ser209）、总eIF4E及β-肌动蛋白（内参）一抗在4°C孵育过夜，随后与辣根过氧化物酶偶联的二抗孵育。用化学发光试剂显影蛋白条带，定量p-eIF4E相对于总eIF4E的强度 [1] 3. 克隆形成、迁移及侵袭实验: - 克隆形成：细胞以500个细胞/孔接种于6孔板，用SLV-2436（0.1–1 μM）处理14天。集落经固定、染色后计数，通过成像软件测量集落大小 [1] - 迁移：细胞接种于Transwell小室上室，上下室均加入含0.5 μM SLV-2436的培养基。24小时后，固定并染色下室迁移细胞，进行计数 [1] - 侵袭：使用基质胶包被的Transwell小室，上下室均加入含0.5 μM SLV-2436的培养基。48小时后，固定并染色下室侵袭细胞，进行计数 [1] 4. 细胞周期和凋亡实验: - 细胞周期：1 μM SLV-2436处理M230细胞24小时后，固定、通透细胞，PI染色，通过流式细胞术分析细胞周期分布 [1] - 凋亡：1 μM SLV-2436处理M230细胞48小时后，用Annexin V-FITC和PI染色，流式细胞术分析。采用荧光素酶 assay试剂盒检测caspase-3/7活性，信号按细胞数量归一化 [1] |
| 动物实验 |
小鼠：在6周龄雌性CD-1小鼠中评估SLV-2436的药代动力学特征。将新鲜溶解的SLV-2436溶于DMSO和Captisol中，按每克体重10 μL的剂量进行口服（5 mg/kg）或静脉注射（2 mg/kg）。在8个时间点（5、15和30分钟；1、2、4、6和24小时）处死动物并采集血液。收集血浆样本并保存于-80°C，用于后续分析。将10至16周龄雄性C57BL/6小鼠分为对照组和3个给药组，以评估SLV-2436的药效学特性。动物分别接受新鲜溶解的10、25和50 mg/kg剂量的溶剂（DMSO+N,N-二甲基乙酰胺+Captisol）或SLV-2436。每1 g体重静脉注射10 μL药物。每日两次（即每12小时一次），每只动物共接受5次给药。每日测量体重。在最后一次（第五次）给药后，每个实验组有六只动物，分别在两个时间点（即4小时和24小时）采集样本。为进行后续分析，采集血浆样本并保存在-80°C[1]。
1. 异种移植瘤模型： - 将5×10⁶个M230或M249细胞皮下注射到6-8周龄雌性nu/nu小鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到 100–150 mm³ 时，将小鼠随机分为 3 组（每组 n=8）：载体对照组（0.5% 羧甲基纤维素 + 0.1% Tween 80）、SLV-2436 30 mg/kg 组和 SLV-2436 60 mg/kg 组 [1] - 药物制剂：将 SLV-2436 溶解于 0.5% 羧甲基纤维素 + 0.1% Tween 80 中，制备均匀混悬液 [1] - 给药途径：每日两次灌胃给药，持续 21 天。监测肿瘤体积（每 3 天用游标卡尺测量）和体重（每日记录）。研究结束时，切除肿瘤，称重，并储存于-80°C，用于Western blot分析[1] 2. 尾静脉转移模型： - 将2×10⁶个M230细胞经尾静脉注射到6-8周龄的雌性nu/nu小鼠体内。注射后1天，将小鼠随机分为2组（每组n=10）：载体对照组和SLV-2436 60 mg/kg组[1] - 给药方式：每日两次灌胃，持续28天。处死小鼠，取出肺脏，固定并染色。在解剖显微镜下计数转移结节[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 体外代谢稳定性：将SLV-2436与人肝微粒体和鼠肝微粒体在NADPH再生系统存在下孵育。分别在0、15、30、60和120分钟时，通过LC-MS/MS测定剩余化合物浓度。半衰期 (t₁/₂) 分别为 5.3 小时（人）和 6.1 小时（小鼠）[1]
2. 体内药代动力学（小鼠）： - 口服给药 (60 mg/kg)：Cmax = 3.2 μM，AUC₀–12h = 18.7 μM·h，t₁/₂ = 7.2 小时，口服生物利用度 (F) = 83% [1] 3. 血浆蛋白结合： 将 SLV-2436 (1 μM) 加入人血浆和小鼠血浆中，并在 37°C 下孵育 1 小时。超滤结果显示结合分数分别为 91%（人）和 89%（小鼠）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外毒性：
用SLV-2436处理正常人黑素细胞 (NHM) 72 小时后，IC₅₀ > 20 μM，比 KIT 突变型黑色素瘤细胞的 IC₅₀ 值高 25–67 倍，表明其对正常细胞的毒性较低 [1] 2. 体内毒性： - 在异种移植和转移模型中（21–28 天，口服剂量高达 60 mg/kg，每日两次），小鼠未出现明显的体重减轻（<4%）、行为异常，且尸检时主要器官（肝脏、肾脏、心脏、脾脏）未见明显的病理变化 [1] - 小鼠血浆的血液学和生化分析显示，与载体对照组相比，肝功能（ALT、AST）、肾功能（BUN、肌酐）或血细胞计数均无显著变化 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. 作用机制：SLV-2436以竞争性方式与MNK1/2的ATP结合口袋结合，抑制其激酶活性。这阻断了mRNA翻译的关键调节因子eIF4E（Ser209）的磷酸化，导致致癌蛋白（例如c-Myc、cyclin D1）的表达下调，并抑制肿瘤细胞的增殖、克隆形成和转移[1]
2. 治疗潜力：SLV-2436是一种高效、选择性强且口服生物利用度高的MNK1/2抑制剂，对KIT突变型黑色素瘤具有特异性疗效。它既能抑制原发肿瘤生长，又能抑制肺转移，因此有望成为治疗KIT突变型黑色素瘤患者（尤其是转移性疾病患者）的候选药物[1]。 3. 临床意义：KIT突变存在于约3%的皮肤黑色素瘤和约20%的黏膜/肢端黑色素瘤中。这些肿瘤通常对BRAF/MEK抑制剂耐药，而SLV-2436通过靶向MNK-eIF4E通路提供了一种新的治疗策略，该通路在KIT突变型黑色素瘤中异常激活[1]。 |
| 分子式 |
C19H15CLN4O
|
|---|---|
| 分子量 |
350.801602602005
|
| 精确质量 |
350.09
|
| 元素分析 |
C, 65.05; H, 4.31; Cl, 10.11; N, 15.97; O, 4.56
|
| CAS号 |
2095704-43-9
|
| 相关CAS号 |
2095704-43-9
|
| PubChem CID |
129052025
|
| 外观&性状 |
Light brown to brown solid powder
|
| LogP |
3
|
| tPSA |
75
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
578
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
YQVUADHJKWJHAF-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H15ClN4O/c20-15-3-1-2-12(8-15)10-24-11-14(5-7-18(24)25)13-4-6-16-17(9-13)22-23-19(16)21/h1-9,11H,10H2,(H3,21,22,23)
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| 化学名 |
5-(3-amino-1H-indazol-6-yl)-1-[(3-chlorophenyl)methyl]pyridin-2-one
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| 别名 |
SLV-2436; SLV2436; SLV 2436; SEL-201-88; SEL201-88; SEL 201-88; SEL 201; SEL-201; SEL201
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~70 mg/mL (~199.5 mM)
Ethanol: ~5 mg/mL (~14.3 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8506 mL | 14.2531 mL | 28.5063 mL | |
| 5 mM | 0.5701 mL | 2.8506 mL | 5.7013 mL | |
| 10 mM | 0.2851 mL | 1.4253 mL | 2.8506 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
ETP-45835
MNK1/2-IN-8
MNK-IN-4
ETC-168
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