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Tat-NR2B9c

别名: L-酪氨酰甘氨酰-L-精氨酰-L-赖氨酰-L-赖氨酰-L-精氨酰-L-精氨酰-L-谷氨酰胺酰-L-精氨酰-L-精氨酰-L-精氨酰-L-赖氨酰-L-亮氨酰-L-丝氨酰-L-丝氨酰-L-异亮氨酰-L-alpha-谷氨酰-L-丝氨酰-L-alpha-天冬氨酰-L-缬氨酸;Tat-NR2B9c
目录号: V30396 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
Tat-NR2B9c (Tat-NR2Bct; NA-1) 是 PSD-95 的抑制剂（阻断剂/拮抗剂），对于 PSD-95d2（PSD-95 PDZ 结构域 2）和 PSD-95d1 的 EC50 分别为 6.7 nM 和 670 nM，分别。
Tat-NR2B9c CAS号: 500992-11-0
产品类别: New2
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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  • Tat-NR2B9c TFA
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产品描述
Tat-NR2B9c (Tat-NR2Bct; NA-1) 是 PSD-95 的抑制剂（阻断剂/拮抗剂），对于 PSD-95d2（PSD-95 PDZ 结构域 2）和 PSD-95d1 的 EC50 分别为 6.7 nM 和 670 nM，分别。 Tat-NR2B9c 破坏 PSD-95/NMDAR 相互作用，并抑制/破坏 PSD-95 与 NR2A 和 NR2B 的结合，IC50 分别为 0.5 μM 和 8 μM。 Tat-NR2B9c 还可以抑制神经元一氧化氮合酶 (nNOS)/PSD-95 相互作用，并具有神经保护（neuro-protect）作用。
生物活性&实验参考方法
靶点
- The primary target of Tat-NR2B9c is the PDZ domain interaction between postsynaptic density protein 95 (PSD-95) and the NR2B subunit of N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors.[3]
体外研究 (In Vitro)
Tat-NR2B9c 是 PSD-95 的抑制剂，对 PSD-95d2 的 EC50 为 6.7 nM，对该结构域的亲和力几乎比 PSD-95d1 高 100 倍（EC50，0.67 μM）。 Tat-NR2B9c 抑制 NMDAR2A、NMDAR2B 和 NMDAR2C 与 PSD-95 的结合，IC50 分别为 0.5 μM、~8 μM 和 0.75 μM。 Tat-NR2B9c 还抑制 PSD-95 和 nNOS 之间的相互作用，其 IC50 约为 0.2 μM [1]。 Tat-NR2B9c 对 NMDA 诱导的 JNK 激活没有影响，但它使 YAC128 纹状体组织中 p38 激活和 PSD-95 与 GluN2B 的相互作用分别降低约 50% 和 50% [2]。
体内研究 (In Vivo)
在雄性 C57BL/6 小鼠中，Tat-NR2B9c（10 nmol/g，静脉注射）可减少梗塞体积，但在 3 nM/g 时几乎没有影响 [3]。
- Tat-NR2B9c在小鼠短暂性大脑中动脉闭塞（tMCAO，缺血性中风模型）中发挥神经保护作用。在tMCAO发作后1小时静脉注射Tat-NR2B9c（剂量0.3、1、3 mg/kg），可剂量依赖性减少脑梗死体积：3 mg/kg组较溶剂对照组（生理盐水）梗死体积减少40%。此外，3 mg/kg组神经行为功能显著改善（通过Bederson评分和转棒实验评估）：24小时时Bederson评分从对照组的2.5降至1.2，转棒潜伏期从对照组的45秒延长至80秒 [3]
- 物种间剂量转换对Tat-NR2B9c的疗效至关重要。在小鼠中，低于0.3 mg/kg的剂量无显著神经保护作用（梗死体积减少<10%），而高于3 mg/kg的剂量未进一步增强疗效（梗死体积减少稳定在~40%）。药代动力学分析显示，小鼠体内Tat-NR2B9c的有效血浆浓度（Cₑff）为50–100 nM，为其在大型物种中的剂量换算提供依据 [3]
酶活实验
1. 制备经Tat-NR2B9c（3 mg/kg）或溶剂处理的tMCAO小鼠（再灌注后24小时）脑匀浆：脑组织用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，4°C下12,000 × g离心15分钟，收集上清液。
2. 取500 μg总蛋白与抗PSD-95抗体（2 μg）在4°C孵育过夜，加入蛋白A/G琼脂糖珠，继续温和振荡孵育4小时。
3. 2,000 × g离心5分钟，弃上清，用冷RIPA缓冲液洗涤珠子3次，去除非特异性结合。
4. 珠子用SDS上样缓冲液重悬，煮沸5分钟，通过蛋白质印迹法（抗NR2B抗体）检测与PSD-95共沉淀的NR2B量。
5. 密度分析软件定量条带强度：Tat-NR2B9c处理组的PSD-95-NR2B复合物形成量较溶剂组减少60% [3]
细胞实验
1. 从E18大鼠胚胎中分离皮质神经元，在添加B27和谷氨酰胺的神经基础培养基中培养7–10天（至成熟）。
2. 用Tat-NR2B9c（10、30、100 nM）预处理神经元1小时，随后在无Mg²⁺培养基中加入NMDA（100 μM）和甘氨酸（10 μM）诱导兴奋性毒性，持续20分钟。
3. 移除含NMDA的培养基，更换为新鲜神经基础培养基，继续孵育24小时。
4. MTT法评估神经元活力：每孔加入MTT试剂（5 mg/mL，10 μL/孔），孵育4小时，DMSO溶解甲瓒结晶，检测570 nm处吸光度。
5. 100 nM Tat-NR2B9c组较单独NMDA组神经元活力提高55%；神经保护作用的EC₅₀约为35 nM [3]
动物实验
1. 使用 8-10 周龄的雄性 C57BL/6 小鼠（每组 n=8）。 1. 用异氟烷麻醉小鼠（诱导浓度2%，维持浓度1.5%），并用加热垫将体温维持在37°C。
2. 建立tMCAO模型：通过颈部切口暴露右侧大脑中动脉（MCA），用硅胶涂层尼龙缝线（直径0.18 mm）阻塞MCA 60分钟，然后拔出缝线以恢复血流灌注。
3. 将Tat-NR2B9c溶解于无菌生理盐水（0.9% NaCl）中，配制成浓度分别为0.03、0.1和0.3 mg/mL的溶液（分别对应0.3、1和3 mg/kg体重的剂量）。
4. 1小时后，通过尾静脉注射Tat-NR2B9c（10 mL/kg体重）给药。再灌注。载体对照组接受等体积的无菌生理盐水。
5. 再灌注后24小时：
- 使用贝德森评分（0 = 无缺陷，4 = 严重缺陷）和转棒试验（10 rpm 转速下跌落潜伏期）评估神经行为功能。
- 处死小鼠，取出脑组织，切成2 mm厚的冠状切片。将切片用2% 2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）在37°C染色20分钟。使用图像分析软件测量梗死体积（梗死体积 = 对侧半球体积 - 同侧非梗死半球体积）。
6. 3 mg/kg Tat-NR2B9c 组显示出最显著的神经保护作用：梗死体积从同侧半球的 35%（对照组）减少到 21%，Bederson 评分从 2.5 提高到 1.2 [3]
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
体外实验表明，Tat-NR2B9c对原代皮层神经元毒性较低。浓度高达300 nM（10倍EC₅₀，用于神经保护）时，神经元存活率仍保持在90%以上（MTT法），且未观察到明显的细胞凋亡（Annexin V-FITC染色，凋亡率<5%）[3]
- 体内实验表明，Tat-NR2B9c（0.3–3 mg/kg，单次尾静脉注射）在小鼠体内耐受性良好：
- 体重：给药后24小时和48小时，体重无显著变化（下降<3%）。
- 主要器官：脑、肝、肾和心脏的组织病理学分析显示无明显的炎症或坏死。
- 未观察到不良反应（例如，癫痫发作、嗜睡）[3]
参考文献

[1]. PDZ protein interactions underlying NMDA receptor-mediated excitotoxicity and neuroprotection by PSD-95 inhibitors. J Neurosci. 2007 Sep 12;27(37):9901-15.

[2]. P38 MAPK is involved in enhanced NMDA receptor-dependent excitotoxicity in YAC transgenic mouse model of Huntington disease. Neurobiol Dis. 2012 Mar;45(3):999-1009.

[3]. Efficacy of the PSD95 inhibitor Tat-NR2B9c in mice requires dose translation between species. J Cereb Blood Flow Metab. 2016 Mar;36(3):555-61.

[4]. N-methyl-D-aspartate Receptor Subunit- And Neuronal-Type Dependence of Excitotoxic Signaling Through Post-Synaptic Density 9. J Neurochem. 2010 Nov;115(4):1045-56.
其他信息
Na 1 正在临床试验 NCT00728182（评估动脉瘤栓塞治疗中的神经保护作用）中进行研究。
- Tat-NR2B9c 是一种基于细胞穿透肽的 PSD-95 抑制剂，由 Tat 细胞穿透序列（增强脑穿透性）和 NR2B PDZ 结合基序（与 PSD-95 竞争结合 NR2B）组成 [3]
- 其神经保护机制涉及阻断 PSD-95-NR2B 相互作用：这可以阻止 PSD-95 将 NMDA 受体与下游促凋亡信号分子（例如 nNOS）连接起来，从而降低缺血性卒中或神经退行性疾病中 NMDA 受体介导的兴奋性毒性 [3]
- 文献 [3] 强调了 Tat-NR2B9c 剂量转化的重要性：小鼠有效剂量剂量（3 mg/kg）相当于人体等效剂量约 0.25 mg/kg（基于体表面积换算），为临床试验剂量设计提供了依据[3]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C105H188N42O30
分子量
2518.8796
精确质量
2517.447
CAS号
500992-11-0
相关CAS号
Tat-NR2B9c TFA;1834571-04-8
PubChem CID
44568939
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.5±0.1 g/cm3
折射率
1.670
LogP
-11.95
tPSA
1260
氢键供体(HBD)数目
49
氢键受体(HBA)数目
40
可旋转键数目(RBC)
99
重原子数目
177
分子复杂度/Complexity
5380
定义原子立体中心数目
20
SMILES
CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCNC(=N)N)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N
InChi Key
XWQVQFBTSBCKLI-FKXNDIMNSA-N
InChi Code
InChI=1S/C105H188N42O30/c1-7-55(6)80(98(175)140-69(34-36-77(154)155)92(169)143-72(50-148)95(172)142-71(48-78(156)157)94(171)146-79(54(4)5)99(176)177)147-97(174)74(52-150)145-96(173)73(51-149)144-93(170)70(46-53(2)3)141-90(167)62(22-10-13-39-108)133-85(162)63(24-15-41-124-101(113)114)135-87(164)65(26-17-43-126-103(117)118)136-88(165)66(27-18-44-127-104(119)120)138-91(168)68(33-35-75(110)152)139-89(166)67(28-19-45-128-105(121)122)137-86(163)64(25-16-42-125-102(115)116)134-84(161)61(21-9-12-38-107)132-83(160)60(20-8-11-37-106)131-82(159)59(23-14-40-123-100(111)112)130-76(153)49-129-81(158)58(109)47-56-29-31-57(151)32-30-56/h29-32,53-55,58-74,79-80,148-151H,7-28,33-52,106-109H2,1-6H3,(H2,110,152)(H,129,158)(H,130,153)(H,131,159)(H,132,160)(H,133,162)(H,134,161)(H,135,164)(H,136,165)(H,137,163)(H,138,168)(H,139,166)(H,140,175)(H,141,167)(H,142,172)(H,143,169)(H,144,170)(H,145,173)(H,146,171)(H,147,174)(H,154,155)(H,156,157)(H,176,177)(H4,111,112,123)(H4,113,114,124)(H4,115,116,125)(H4,117,118,126)(H4,119,120,127)(H4,121,122,128)/t55-,58-,59-,60-,61-,62-,63-,64-,65-,66-,67-,68-,69-,70-,71-,72-,73-,74-,79-,80-/m0/s1
化学名
(4S)-4-[[(2S,3S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]acetyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]hexanoyl]amino]hexanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]hexanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-5-[[(2S)-1-[[(2S)-3-carboxy-1-[[(1S)-1-carboxy-2-methylpropyl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
H2O : ~100 mg/mL (~39.70 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
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注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
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口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 0.3970 mL 1.9850 mL 3.9700 mL
5 mM 0.0794 mL 0.3970 mL 0.7940 mL
10 mM 0.0397 mL 0.1985 mL 0.3970 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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