TMB

别名: 3,3',5,5'-四甲基联苯胺;-3,3’,5,5’-四甲基联苯-4,4’-二胺;3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB);3,3',5,5'-四甲基对二氨基联苯; 四甲基联苯胺,TMB;四甲基联苯二胺;新型酶免显色剂;3,3′,5,5′-四甲基联苯胺;3,3',5,5'-四甲基联苯胺[用于生化研究];(TMB)3,3'',5,5''-四甲基联苯胺;3, 3', 5, 5'-四甲基联苯胺;3,3 ,5,5 -四甲基联苯胺;3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine 3,3',5,5'-四甲基联苯胺;3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine [for Biochemical Research] 3,3',5,5'-四甲基联苯胺[用于生化研究];3,3',5,5'-四甲基对二胺基联苯;3,3',5,5'-四甲基联苯-4,4'-二胺;3,3'',5,5''-四甲基联苯胺;3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB);3,3,5,5-四甲基联苯胺(TMB);3,3',5,5'-四甲基联苯胺,Tetramethylbenzidine;3,3',5,5'-四甲基联苯胺TMB;3,3,5,5-四甲基联苯胺溶液;3,3\',5,5\'-四甲基联苯胺;3,3’,5,5’-四甲基联苯胺;3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB);3.3.5.5四甲基联苯胺;A B双液 TMB显色液;ELISA检测试剂TMB;Tetramethylbenzidine 3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB);TMB 3,3,5,5-四甲基联苯胺;TMB HCl 3,3,5,5,-四甲基联苯胺盐酸盐;TMB(游离酸);TMB四甲基联苯胺;四甲基联苯胺盐酸盐 二水;3,3',5,5'-四;3,3',5,5'-四甲基联苯;3,3‘,5,5‘-四甲基联苯胺 标准品;3,3′,5,5′-四甲基联苯;3.3’,5,5’-四甲基联苯胺;TMB显色液B液;四甲基联苯胺;3,3,5,5-四甲基联苯胺
目录号: V30196 纯度: =99.85%
TMB(BM blue)是一种用于免疫组织化学和 ELISA 的显色底物。
TMB CAS号: 54827-17-7
产品类别: New1
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
50mg
100mg
250mg
500mg
1g
5g
Other Sizes

Other Forms of TMB:

  • 四甲基联苯胺二盐酸
  • TMB monosulfate
  • TMB dihydrochloride hydrate (BM blue dihydrochloride hydrate; Sure Blue TMB dihydrochloride hydrate)
点击了解更多
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
纯度/质量控制文件

纯度: =99.85%

产品描述
TMB(BM蓝)是一种用于免疫组织化学和酶联免疫吸附试验(ELISA)的显色底物。
TMB(CAS号:54827-17-7),又称3,3',5,5'-四甲基联苯胺,是一种用于免疫组织化学染色和酶联免疫吸附试验(ELISA)显色的显色底物。它是检测辣根过氧化物酶(HRP)标记探针的优良比色底物,常与过氧化物酶和过氧化物酶偶联系统一起使用。TMB广泛应用于ELISA技术。其分子式为C16H20N2,分子量为240.34 g/mol。
生物活性&实验参考方法
靶点
TMB targets horseradish peroxidase (HRP) for chromogenic detection. As a substrate for HRP, it is oxidized in the presence of hydrogen peroxide to produce a blue-colored product. The compound is a colorimetric reagent used in laboratory-based substrate detection. TMB is widely used in ELISA and immunohistochemistry. It is also known as BM blue and Sure Blue TMB.
体外研究 (In Vitro)
在体外,TMB 是一种用于辣根过氧化物酶 (HRP) 检测系统的显色底物。它可用于免疫组织化学染色步骤,也可作为酶联免疫吸附试验 (ELISA) 中的显色试剂。该化合物是检测 HRP 标记探针的优良比色底物。其显色特性已在多种体外实验中得到表征。TMB 广泛应用于实验室底物检测。
体内研究 (In Vivo)
在体内,TMB 可用作显色底物进行研究应用。其在免疫组织化学和 ELISA 中的应用已得到证实。该化合物广泛应用于诊断和研究领域。由于 TMB 主要是一种实验室试剂,因此其在体内的进一步研究受到限制。
酶活实验
TMB显色法检测是在基于辣根过氧化物酶(HRP)的检测系统中测量显色反应。将化合物与HRP和过氧化氢孵育,并在适当的波长(通常为450 nm或650 nm)下测量吸光度。该反应产生蓝色,可通过分光光度法检测。检测在合适的缓冲体系中进行,并设置阳性对照,例如已知的HRP底物。
细胞实验
由于TMB主要是一种检测试剂而非治疗性化合物,因此体外细胞检测方法受到限制。该化合物可用于ELISA和免疫组织化学应用。在细胞ELISA中,细胞经培养并用抗体处理后,使用TMB进行检测。通过测量显色反应来评估细胞活力。实验中需设置适当的阳性对照和阴性对照。
动物实验
由于TMB主要是一种实验室试剂,因此其体内研究受到限制。其在科研应用中的实用性已得到证实。该化合物广泛用于诊断和科研领域。所有研究均按照机构试剂使用指南进行。
药代性质 (ADME/PK)
代谢/代谢物
肠道细菌和肝脏偶氮还原酶可以将偶氮染料还原为组成它们的芳香胺。基于联苯胺及其同系物的偶氮染料因其广泛应用以及联苯胺对人类已知的致癌性而备受关注。基于β-二酮偶联组分的偶氮染料主要以互变异构体腙的形式存在。我们制备了一系列基于联苯胺及其同系物的腙染料,并利用核磁共振和紫外-可见光谱对其进行了表征。采用改良的Ames试验检测了这些染料的致突变性,结果表明,与真正的偶氮染料不同,这些染料没有表现出显著的致突变活性。这些腙染料在添加了FMN的仓鼠肝脏线粒体后上清液(S-9)中能够抵抗酶促还原;在相同条件下,偶氮染料(例如台盼蓝)被迅速还原。在H₂O₂依赖的Ames试验系统中,联苯胺及其几种衍生物被活化为诱变剂。利用光学和电子顺磁共振(EPR)光谱研究了完整细菌催化的H₂O₂依赖的联苯胺和3,5,3',5'-四甲基联苯胺(TMB)的氧化反应,为鼠伤寒沙门氏菌中过氧化物酶活性提供了直接证据。具有乙酰转移酶活性的Ames试验菌株TA98及其乙酰转移酶缺陷型衍生物TA98/1,8-DNP6表现出相同的H₂O₂依赖性诱变反应;在该系统中,酶促乙酰化似乎不参与联苯胺的活化。在乙酸缓冲液(pH 5.5)中进行测定时,观察到了联苯胺的H₂O₂依赖性诱变性和TMB的氧化作用,但在相同pH值的2-[N-吗啉代]乙磺酸(MES)缓冲液中则未观察到。这种差异可归因于这些缓冲液对细菌胞内pH值的影响。本文还描述了几种联苯胺同系物的H₂O₂依赖性诱变性。
二氯联苯胺可在鼠伤寒沙门氏菌Ames测试菌株中被过氧化激活。当对移码突变剂敏感的鼠伤寒沙门氏菌菌株与二氯联苯胺和过氧化氢孵育时,观察到了诱变性。本研究表明,细菌酶氢过氧化物酶I是这种激活的主要责任酶。我们构建了由于插入编码这些蛋白的Tn10基因而缺乏氢过氧化物酶I或II的同源测试菌株。在每株菌株中测定了二氯联苯胺的过氧化氢依赖性诱变性。缺乏氢过氧化物酶I活性的测试菌株的敏感性显著低于亲本菌株。当通过质粒携带的大肠杆菌蛋白编码基因拷贝恢复这些菌株的氢过氧化物酶I活性时,它们对二氯联苯胺的过氧化氢依赖性诱变性的敏感性增强。
利用特殊的“干式断裂”技术和扫描电子显微镜,在非洲爪蟾卵的色素表面下方观察到不溶性细颗粒物质的积累。这些技术能够识别皮质颗粒和色素颗粒,并观察到它们嵌入在该物质中。超薄切片显示,该区域还含有线粒体和膜状囊泡或网状结构。卵黄血小板并未显著包含在该物质的最大积累中。这种物质在皮层下方密度最高,并逐渐过渡到更为弥散的、含有卵黄的内质网。在卵母细胞的动物半球,这种物质比植物半球厚得多,其中嵌入的色素界定了动物半球的色素区。在色素区,这种物质将卵黄包裹在内,其厚度可达距表面3-7微米或更厚。在植物半球,这种物质的积累并不存在,卵黄碎片几乎与质膜接触。实验诱导卵母细胞发生皮层收缩。收缩的相对强度与皮层下细颗粒物质的相对厚度相关。收缩过程中,这种物质积累到更厚的程度,将卵黄包裹在距表面15-30微米或更厚的范围内。发生收缩的实体要么是这种细颗粒物质本身,要么存在于其内部。向卵母细胞注射细胞松弛素可抑制卵裂形成,但不会抑制诱导的皮层收缩。因此,皮层收缩似乎并不像卵裂收缩环那样依赖于肌动蛋白微丝的形成。收缩环和诱导皮层收缩的系统对细胞松弛素敏感性的差异表明,卵母细胞皮层收缩是一个双组分系统。本文提出了一个可以解释现有数据的模型。有关3,3',5,5'-四甲基联苯胺(共6种代谢物)的更完整代谢物数据,请访问HSDB记录页面。
TMB(分子量240.34 g/mol,C16H20N2)是一种显色底物。它也被称为3,3',5,5'-四甲基联苯胺、BM蓝和Sure Blue TMB。该化合物为白色至浅黄色粉末,熔点为166-170℃。它可溶于DMSO和其他有机溶剂,在推荐的储存条件下稳定。TMB广泛用于ELISA和免疫组织化学。
毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK)
非人类毒性值
小鼠腹腔注射LD50:135 mg/kg
TMB通常被认为是安全的实验室试剂。该化合物广泛用于诊断和研究应用。现有文献中未报道在研究用浓度下存在显著不良反应。该化合物仅供研究使用。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全操作规程。治疗性药物的开发需要进行全面的毒理学评估。
其他信息
3,3',5,5'-四甲基联苯胺是一种淡黄色晶体或灰白色粉末。(NTP, 1992)
作用机制
手术切除的肾上腺肿块的组织学分析通常难以区分良性和恶性肿瘤。在正常细胞中,染色体末端的端粒会随着每次细胞分裂而缩短,导致染色体不稳定,并在一定数量的细胞周期后发生细胞衰老。在肿瘤细胞中,一种称为端粒酶的特异性DNA聚合酶可以阻止端粒缩短。为了阐明端粒酶在肾上腺肿瘤发病机制中的作用,并检验其活性是否可以作为恶性肿瘤的标志物,我们检测了41例人肾上腺组织样本中的端粒酶活性,这些样本根据临床病程和组织学结果进行分类。采用TRAP ELISA法测定端粒酶活性,并将其分为高(>50%)、中(31-50%)、低(11-30%)、极低(≤10%)或无(0%)五个等级,其中高(>50%)代表阳性对照端粒酶活性的50%或以上。所有8例正常肾上腺组织样本的端粒酶活性均极低。3例肾上腺偶发肿瘤、6例库欣氏腺瘤、6例康恩氏腺瘤、7例肾上腺皮质癌、8例良性嗜铬细胞瘤和2例恶性嗜铬细胞瘤的平均端粒酶活性也极低。相反,1例恶性嗜铬细胞瘤显示出相对较高的端粒酶活性。这些数据表明,端粒酶活性可能不适合作为肾上腺恶性肿瘤的生物标志物。我们的研究结果也挑战了目前关于细胞去分化与端粒酶活性密切关系的传统观点。先前利用辣根过氧化物酶和前列腺素H合酶对3,5,3',5'-四甲基联苯胺(TMB)进行氧化的研究表明,TMB会形成阳离子自由基,并与电荷转移复合物达到平衡,这与初始氧化过程的双电子或单电子转移相符。在本研究中,我们利用髓过氧化物酶及其氧化中间体化合物I和II的独特光谱性质,证实了TMB的氧化过程是一个两阶段的连续单电子氧化过程。此外,我们还利用停流技术,在瞬态和稳态条件下测定了pH 5.4和20 °C下髓过氧化物酶催化TMB氧化的基本步骤的速率常数。天然酶与H₂O₂反应生成化合物I的二级反应速率常数为2.6 × 10⁷ M⁻¹ s⁻¹。化合物I在TMB存在下发生单电子还原反应生成化合物II,反应速率常数为(3.6 ± 0.1) × 10⁶ M⁻¹ s⁻¹。光谱扫描表明,化合物II在稳态条件下会积累。在稳态条件下,TMB将化合物II还原为天然酶的反应速率常数为(9.4 ± 0.6) × 10⁵ M⁻¹ s⁻¹。这些发现被应用于一种基于TMB与其二亚胺最终产物之间电荷转移复合物形成的新型、更精确的髓过氧化物酶测定方法。
TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)是一种用于免疫组织化学和ELISA的显色底物。它是基于HRP的检测系统的优良比色底物。TMB广泛应用于实验室底物检测。其分子式为C16H20N2,分子量为240.34 g/mol。所有应用均仅限于非人体研究用途。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C16H20N2
分子量
240.3434
精确质量
240.162
CAS号
54827-17-7
相关CAS号
TMB dihydrochloride;64285-73-0;TMB monosulfate;54827-18-8;TMB dihydrochloride hydrate;312693-82-6
PubChem CID
41206
外观&性状
White to light yellow solid powder
密度
1.1±0.1 g/cm3
沸点
368.6±37.0 °C at 760 mmHg
熔点
168-171 °C(lit.)
闪点
210.8±26.0 °C
蒸汽压
0.0±0.8 mmHg at 25°C
折射率
1.618
LogP
3.4
tPSA
52.04
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
2
可旋转键数目(RBC)
1
重原子数目
18
分子复杂度/Complexity
226
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C16H20N2/c1-9-5-13(6-10(2)15(9)17)14-7-11(3)16(18)12(4)8-14/h5-8H,17-18H2,1-4H3
化学名
4-(4-amino-3,5-dimethylphenyl)-2,6-dimethylaniline
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~25 mg/mL (~104.02 mM)
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。

注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO 50 μL Tween 80 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO 900 μL Corn oil)
示例: 注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备(4°C,储存1周):将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中,得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如: 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精) 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如: 50 μL DMSO 100 μL PEG300 200 μL Castor oil 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10: 10 : 80 (如: 100 μL Ethanol 100 μL Cremophor 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL EtOH 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL EtOH 400 μL PEG300 50 μL Tween 80 450 μL Saline)


口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。
View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合


注意: 以上为较为常见方法,仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型,对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物,需通过前期实验来确定(建议先取少量样品进行尝试),包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 4.1608 mL 20.8039 mL 41.6077 mL
5 mM 0.8322 mL 4.1608 mL 8.3215 mL
10 mM 0.4161 mL 2.0804 mL 4.1608 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
+
+

计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

联系我们