1. 首页
  2. 产品
  3. Signaling Pathways 信号通路
  4. New Products | 新产品
  5. NEW2
  6. New2

TMRM

别名: TMRM; 115532-49-5; [6-(dimethylamino)-9-(2-methoxycarbonylphenyl)xanthen-3-ylidene]-dimethylazanium; 3,6-Bis(dimethylamino)-9-[2-(methoxycarbonyl)phenyl]xanthylium; 3,6-Bis(dimethylamino)-9-(2-(methoxycarbonyl)phenyl)xanthylium; 四甲基罗丹明甲酯
目录号: V33756 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
罗丹明染料是膜渗透/穿透的阳离子荧光探针，可以特异性识别线粒体膜电位，从而附着在线粒体上并产生明亮的荧光。
TMRM CAS号: 115532-49-5
产品类别: New2
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格
500mg
1g
Other Sizes
大包装询价
020-31522723 sales@invivochem.cn

Other Forms of TMRM:

  • 四甲基若丹明甲酯酸铵
点击了解更多
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
产品描述
罗丹明染料是膜渗透/穿透的阳离子荧光探针，可以特异性识别线粒体膜电位，从而附着在线粒体上并产生明亮的荧光。在一定浓度下，罗丹明染料对细胞的毒性较低。毒性，因此广泛用于检测动物细胞、植物细胞、微生物中的线粒体。
TMRM (四甲基罗丹明甲酯，T668) 是一种细胞膜通透性阳离子亲脂性荧光染料。作为一种经典的线粒体膜电位（ΔΨm）探针，它通过能斯特（Nernst）分布选择性聚集在具有活性的线粒体中，发出橙色至红色荧光（激发/发射波长约为 530 nm/592 nm）。在合适的浓度下，TMRM 表现出低细胞毒性，被广泛用于检测动物、植物及微生物细胞的线粒体功能，以及标记和分离特定细胞（如干细胞来源的心肌细胞）。然而，需要注意的是，该染料仅适用于活细胞染色，其荧光信号强度与膜电位变化成正比，并可能受到如 FCCP 等离子载体的影响。
生物活性&实验参考方法
靶点
Mitochondrial membrane potential (mtMP); TMRM is a fluorescent probe that accumulates in mitochondria in response to negative membrane potential. [2][3]
体外研究 (In Vitro)
1. TMRM 工作液的配制
1.1 储备液的配制
将 1 mg TMRM 溶解于 339 µL DMSO 中，配制成 5 mM 储备液。
1.2 工作液的配制
使用无血清细胞培养基或 PBS 稀释上述储备液，获得浓度为 1–20 µM 的 TMRM 工作液。
注意：工作液的具体浓度可根据实验需要进行调整。

2. 细胞染色流程
2.1 悬浮细胞染色（以 6 孔板为例）
a. 收集细胞悬液，于 4℃ 条件下以 1000g 离心 3–5 分钟，弃上清；
b. 使用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟，最终调整细胞密度至 1×10⁶/mL；
c. 加入 1 mL TMRM 工作液，室温避光孵育 5–30 分钟；
d. 4℃ 下以 400g 离心 3–4 分钟，弃上清；
e. 再次使用 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟；
f. 使用无血清培养基或 PBS 重悬细胞，随后进行荧光显微镜或流式细胞仪检测。
2.2 贴壁细胞染色
a. 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上；
b. 取出盖玻片，吸除多余培养基；
c. 加入 100 µL TMRM 工作液，轻摇使其均匀覆盖细胞，室温避光孵育 30–60 分钟；
d. 使用培养基洗涤两次，每次 5 分钟；
e. 直接置于荧光显微镜下观察，或消化重悬后进行流式细胞术分析。
注：如采用流式细胞仪检测，需先将细胞消化并重悬为单细胞悬液，再进行染色。
- 在分离的大鼠皮质线粒体中，TMRM（2 μM）可使用Oroboros Oxygraph-2K同时测量耗氧率和线粒体膜电位。与无染料对照相比，TMRM使偶联呼吸降低约27%。最大非偶联呼吸（使用FCCP）不受TMRM影响。 [2]
- 在培养的大鼠海马神经元中，TMRM（50–500 nM）选择性染色线粒体，并显示出自发的线粒体荧光波动。FCCP（1 μM）诱导线粒体荧光丧失和相应的胞质荧光增加。 [3]
- 较高浓度的TMRM（1–25 μM）可更快地染色线粒体（5–10分钟内达到平台）。暴露45–60分钟后，部分神经元出现自发的细胞荧光大幅增加，随后出现缓慢的振荡（周期5–20分钟）和传播的荧光波。胶质细胞未显示这些反应。 [3]
- 单光子比例成像（546和573 nm激发）显示，FCCP诱导573/546比值增加，表明TMRM从淬灭（疏水）区室向非淬灭（亲水）区室移动。在自发性荧光振荡期间观察到类似的比例变化。 [3]
- TMRM振荡在预先用FCCP（1–100 μM）或毒胡萝卜素（10 μM）处理的神经元中持续存在，表明功能性线粒体不是这些反应所必需的。 [3]
- TMRM振荡与细胞内Ca²⁺变化（用Fluo-3测量）不相关。降低细胞外Ca²⁺或细胞内EGTA透析可抑制振荡，但Ca²⁺峰独立于TMRM振荡发生。 [3]
- 荧光寿命成像显示，在高荧光和低荧光状态之间TMRM荧光存在显著的相位偏移，与染料在疏水和亲水区室之间的移动一致。 [3]
酶活实验
- 耗氧率测量：将分离的线粒体或组织匀浆重悬于富KCl缓冲液（80 mM KCl，10 mM Tris/HCl，3 mM MgCl₂，1 mM EDTA，5 mM磷酸钾，pH 7.4）中。依次加入底物（谷氨酸、丙酮酸、苹果酸、琥珀酸）、ADP、寡霉素、FCCP、鱼藤酮和抗霉素A。使用配备荧光LED2模块的Oroboros Oxygraph-2K在37°C测量耗氧率。 [2]
- 线粒体膜电位测量：使用番红O（2.5 μM）或TMRM（2 μM）作为荧光探针。Oroboros系统同时记录荧光信号（激发/发射：番红O 495/587 nm；TMRM 530/592 nm）和耗氧率。 [2]
- 单光子比例成像：使用单色仪以546和573 nm（带宽5 nm）顺序激发细胞。在620/60 nm处检测发射光。每200毫秒形成一次比例图像（573/546）。 [3]
- 荧光寿命成像：使用810 nm双光子激发。使用FastFLIM模块收集相位和调制图像。使用相量图法分析荧光寿命。 [3]
细胞实验
- 分离的大鼠皮质线粒体：通过差速离心从大鼠脑皮质分离线粒体。使用Bradford法测定蛋白含量。对于耗氧率/线粒体膜电位测量，使用200–300 μg线粒体蛋白。 [2]
- 原代大鼠海马神经元培养：从胚胎第18天大鼠海马制备培养物，在胶质饲养层上生长12–30天。将TMRM以50 nM至25 μM的浓度加入浴液中。在室温下进行成像。 [3]
- 凋亡实验：将培养物在37°C下暴露于TMRM 1小时，然后后孵育18小时。用Hoechst 33258（2 μg/mL）染色细胞20分钟。凋亡细胞在紫外激发下鉴定为明亮的荧光核。细胞存活率计算为活细胞的百分比。 [3]
- 钙成像：用Fluo-3 AM（5 μM）在37°C下加载细胞1小时，然后后孵育1小时。使用双光子显微镜进行Fluo-3和TMRM的双探针成像。 [3]
参考文献

[1]. Measuring Mitochondrial Transmembrane Potential by TMRE Staining. Cold Spring Harb Protoc. 2016 Dec 1;2016(12):pdb.prot087361.

[2]. Simultaneous evaluation of substrate-dependent oxygen consumption rates and mitochondrial membrane potential by TMRM and safranin in cortical mitochondria. Biosci Rep. 2015 Dec 8;36(1):e00286.

[3]. Imaging of mitochondrial and non-mitochondrial responses in cultured rat hippocampal neurons exposed to micromolar concentrations of TMRM. PLoS One. 2013;8(3):e58059.
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C25H25N2O3
分子量
401.48
精确质量
401.186
CAS号
115532-49-5
相关CAS号
TMRM Perchlorate;115532-50-8
PubChem CID
5009757
外观&性状
Typically exists as solid at room temperature
LogP
3.3
tPSA
41.8
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
4
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
30
分子复杂度/Complexity
772
定义原子立体中心数目
0
SMILES
CN(C)C1=CC2=C(C=C1)C(=C3C=CC(=[N+](C)C)C=C3O2)C4=CC=CC=C4C(=O)OC
InChi Key
WAWRKBQQBUDAMY-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C25H25N2O3/c1-26(2)16-10-12-20-22(14-16)30-23-15-17(27(3)4)11-13-21(23)24(20)18-8-6-7-9-19(18)25(28)29-5/h6-15H,1-5H3/q+1
化学名
[6-(dimethylamino)-9-(2-methoxycarbonylphenyl)xanthen-3-ylidene]-dimethylazanium
别名
TMRM; 115532-49-5; [6-(dimethylamino)-9-(2-methoxycarbonylphenyl)xanthen-3-ylidene]-dimethylazanium; 3,6-Bis(dimethylamino)-9-[2-(methoxycarbonyl)phenyl]xanthylium; 3,6-Bis(dimethylamino)-9-(2-(methoxycarbonyl)phenyl)xanthylium;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
溶解度 (体内实验)
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
(IP/IV/IM/SC等)
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)
*生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。
注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)
注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil)
示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。
View More

注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)]
*20% SBE-β-CD in Saline的制备（4°C，储存1周）：将2g SBE-β-CD (磺丁基-β-环糊精) 溶解于10mL生理盐水中，得到澄清溶液。
注射用配方 5: 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin : Saline = 50 : 50 (如： 500 μL 2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (羟丙基环胡精)→ 500 μL Saline)
注射用配方 6: DMSO : PEG300 : Castor oil : Saline = 5 : 10 : 20 : 65 (如： 50 μL DMSO → 100 μL PEG300 → 200 μL Castor oil → 650 μL Saline)
注射用配方 7: Ethanol : Cremophor : Saline = 10： 10 : 80 (如： 100 μL Ethanol → 100 μL Cremophor → 800 μL Saline)
注射用配方 8: 溶解于Cremophor/Ethanol (50 : 50), 然后用生理盐水稀释。
注射用配方 9: EtOH : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL EtOH → 900 μL Corn oil)
注射用配方 10: EtOH : PEG300：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL EtOH → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline)

口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠)
口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。
View More

口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400)
口服配方 4: 悬浮于0.2% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 5: 溶解于0.25% Tween 80 and 0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素)
口服配方 6: 做成粉末与食物混合

注意: 以上为较为常见方法，仅供参考， InvivoChem并未独立验证这些配方的准确性。具体溶剂的选择首先应参照文献已报道溶解方法、配方或剂型，对于某些尚未有文献报道溶解方法的化合物，需通过前期实验来确定（建议先取少量样品进行尝试），包括产品的溶解情况、梯度设置、动物的耐受性等。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.4908 mL 12.4539 mL 24.9078 mL
5 mM 0.4982 mL 2.4908 mL 4.9816 mL
10 mM 0.2491 mL 1.2454 mL 2.4908 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

相关产品
  • 匹伐加宾
    V40111 69542-93-4 100mg
    Pivagabine (CXB 722) is a hydrophobic 4-aminobutyric acid analogue with neuromodulatory activity.
    ¥3200.00
  • 磷酸氢化可的松
    V30658 3863-59-0 500mg
    Hydrocortisone phosphate (Hydrocortisone 21-phosphate), a glucocorticoid, is an orally bioactive steroidal anti~inflammatory agent (SAID).
    Get Quote
  • BAY-784
    V40399 1631164-24-3 5mg
    BAY-784 is a novel, potent, orally bioavailable,and selective gonadotropin releasing hormone receptor (GnRH-R) antagonist with IC50s of 21 and 24 nM for human and rat GnRH-R, respectively.
    ¥3000.00
  • Gly-PEG3-endo-BCN
    V38431 2354291-37-3 500mg
    Gly-PEG3-endo-BCN is a PROTAC (PROteolysis TArgeting Chimera) linker of the Polyethylene glycol (PEG) category, may be utilized to prepare PROTAC protein degraders.
    Get Quote
联系我们
电话: 020-31522723 传真: 463611831 邮箱: sales@invivochem.cn
获得最新产品资讯、折扣和优惠
姓名
邮箱

InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售

Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1

 粤公网安备 44011102003439号

联系我们
Home Classify Cart Member