| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
TPT-260 targets the retromer core complex, specifically binding at the interface between Vps35 and Vps29 proteins (site 2). [1]
Binding affinity: Kd for the retromer core complex is approximately 5 μM as determined by microscale thermophoresis. [1] Thermal stabilization: increases the melting temperature (Tm) of the reconstituted Vps26-Vps35-Vps29 heterotrimer from 49 °C to 59.5 °C (ΔTm = +10.5 °C) at the highest concentration tested. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外实验表明，TPT-260 (R55) 能稳定纯化的重组逆转录酶核心复合物 (Vps26-Vps35-Vps29)，使其免受热变性的影响（通过差示扫描荧光法 (DSF) 测定），并使熔解温度升高约 10 °C。该化合物对单个 Vps35 或 Vps29 蛋白的热展开没有影响，表明其特异性结合于界面。Vps35 上的 Q538W 突变阻断了结合位点，从而消除了这种稳定作用。[1]
|
| 体内研究 (In Vivo) |
TPT-260（5 μM，48 小时）可使原代皮层神经元中逆转录酶蛋白水平升高：Vps35 升高约 80% (p < 0.001)，Vps26 升高约 50% (p < 0.001)（与载体组相比），而 mRNA 水平无变化。[1]
在海马神经元中，TPT-260 可降低内源性小鼠 Aβ40（约 24%，p < 0.001）和 Aβ42（约 28%，p < 0.001）的水平。在 J20 转基因小鼠神经元（人 APP 突变体）中，它可降低人 Aβ40（约 44%，p < 0.01）和 Aβ42（约 39%，p < 0.01）的水平。降低 Aβ 水平的 IC50 值约为 12 μM。 [1] TPT-260 可降低 BACE1 依赖性 APP 片段：β-CTF 降低约 70% (p < 0.001)，sAPPβ 降低约 25% (p < 0.001)，并增加 α-分泌酶片段 sAPPα 增加约 90% (p < 0.05)。[1] 在海马神经元中，TPT-260 可降低 APP 与早期内体标记物 EEA1 的共定位 (p < 0.05) 以及 SorL1 与 EEA1 的共定位 (p < 0.01)，表明逆转录酶介导的内体转运增强。 [1]在Vps26敲低神经元（Vps26flox/flox，使用Cre慢病毒，敲低率约为50%）中，TPT-260无法降低Aβ42水平，证实了降低Aβ的作用依赖于逆转录酶。[1] |
| 酶活实验 |
采用纯化的重组逆转录酶复合物（Vps26-Vps35-Vps29），浓度为2 μM，溶于含有50 mM NaH₂PO₄、300 mM NaCl、pH 8.0的缓冲液中，并加入20× Sypro Orange染料，进行热稳定性测定（差示扫描荧光法，DSF）。加入不同浓度的化合物。通过在25 °C至95 °C范围内以0.3 °C的间隔读取荧光值来确定熔解曲线。熔解温度（Tm）取为熔解曲线的拐点。[1]
采用微尺度热泳法测定TPT-260与逆转录酶核心复合物的结合亲和力（Kd）。结果表明，Kd约为5 μM，且热泳曲线呈负值。 [1] 计算机模拟对接：将 Vps29-Vps35 晶体结构（PDB 2R17）提交至 Q-site Finder 以识别结合口袋。使用 Glide（Schrödinger）对包含 46,000 个先导化合物的化合物库进行虚拟筛选。共鉴定出 10 个对接位点，其中 6 个位于界面处。预测化合物 R55 结合于位点 2，即 Vps35-Vps29 界面处最大的口袋。[1] |
| 细胞实验 |
从野生型小鼠或J20转基因小鼠（携带瑞典和印第安纳突变的人类APP基因）中分离培养原代海马和皮层神经元。细胞在体外培养14天。在体外培养11天（11 DIV）时，加入TPT-260（或溶剂，50% DMSO水溶液），浓度为指定值（通常为5 μM），孵育48小时后进行分析。采用XTT比色法评估细胞活力；0.5 μM至50 μM的浓度均无毒性。 [1]
对于免疫细胞化学，将盖玻片上的原代海马神经元用 2% PFA/0.5% 蔗糖固定，用 0.1% Triton X-100（用于 APP 检测）或 0.05% 皂苷（用于 Vps35 和 SorL1 检测）进行透化处理，然后用抗 APP（C 端）、抗 EEA1、抗 MAP2 或抗 SorL1 抗体进行染色。使用蔡司 LSM 700 META 显微镜采集共聚焦图像，并使用 ImageJ 插件（Colocalization Finder 或 JACoB）分析共定位。[1] 对于 Vps26 敲低实验，将 Vps26flox/flox 小鼠的原代神经元在体外培养第 5 天（DIV5）用表达活性 Cre 重组酶 (CRE) 或催化失活 Cre (dead-Cre) 的慢病毒感染 10 天。通过蛋白质印迹法证实了基因敲除效率（~50%）。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
使用比色法 XTT 检测原代皮层神经元的细胞活力研究表明，浓度范围为 0.5 μM 至 50 μM 的 TPT-260 在 48 小时内对神经元无毒性（数据未显示）。[1]
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
TPT-260 (R55) 是一种噻吩硫脲衍生物。它通过与逆转录酶核心复合物的 Vps35-Vps29 界面结合，发挥药理学伴侣的作用，从而稳定整个三聚体复合物并保护其免受降解。这增强了逆转录酶介导的 APP 和 SorL1 从内体转运，减少了 BACE1 依赖的 APP 加工。该化合物提高了逆转录酶蛋白水平，并将 APP 加工转向具有神经保护作用的 α-分泌酶途径，产生与保护性 APP 突变体 (A673T) 相似的片段谱。Vps26 敲低实验表明，这种作用依赖于逆转录酶。本研究首次证明小分子可以作为多蛋白复合物的药理学伴侣。 TPT-260可能具有治疗阿尔茨海默病和其他逆转录酶相关神经退行性疾病（例如帕金森病）的潜力。[1]
|
| 参考文献 |
Nat Chem Biol.2014Jun;10(6):443-9.
|
| 其他信息 |
[5-(氨基甲酰硫代甲基)噻吩-2-基]甲基氨基甲酰硫代酸酯是一种有机分子实体。
|
| 分子式 |
C8H12N4S3
|
|---|---|
| 分子量 |
260.4027
|
| 精确质量 |
260.022
|
| CAS号 |
769856-81-7
|
| 相关CAS号 |
TPT-260 Dihydrochloride;2076-91-7
|
| PubChem CID |
414147
|
| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
|
| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
436.9±55.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
218.0±31.5 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.0 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.770
|
| LogP |
0.48
|
| tPSA |
179
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
15
|
| 分子复杂度/Complexity |
222
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
S1C(C([H])([H])S/C(=N/[H])/N([H])[H])=C([H])C([H])=C1C([H])([H])S/C(=N/[H])/N([H])[H]
|
| InChi Key |
DSODRWWHAUGSGD-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C8H12N4S3.2ClH/c9-7(10)13-3-5-1-2-6(15-5)4-14-8(11)12;;/h1-2H,3-4H2,(H3,9,10)(H3,11,12);2*1H
|
| 化学名 |
thiophene-2,5-diylbis(methylene) dicarbamimidothioate dihydrochloride
|
| 别名 |
NSC-55712; NSC55712; NSC 55712; TPT260; TPT-260; TPT 260; TPT-260 HCl; TPT-260 2HCl; TPT-260 dihydrchloride; R55.
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.8402 mL | 19.2012 mL | 38.4025 mL | |
| 5 mM | 0.7680 mL | 3.8402 mL | 7.6805 mL | |
| 10 mM | 0.3840 mL | 1.9201 mL | 3.8402 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Identification of a retromer stabilizing pharmacological chaperone.Nat Chem Biol.2014Jun;10(6):443-9. |
|---|
 The pharmacological chaperone increases retromer levels in neurons.Nat Chem Biol.2014Jun;10(6):443-9. |
 The pharmacological chaperone decreases Aβ peptide accumulation and reduces the pathogenic pathway of APP.Nat Chem Biol.2014Jun;10(6):443-9. |
 The pharmacological chaperone shifts the endosomal localization of APP and SorL1.Nat Chem Biol.2014Jun;10(6):443-9. |
|---|
 The pharmacological chaperone specifically modulates Aβ production through the retromer pathway.
Characterization of the weak link in retromer complex stability.Nat Chem Biol.2014Jun;10(6):443-9. |
GSK 525768A
kb-NB77-78
GSK2807
Eleclazine
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
