| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Myc-Max (IC50 = 8.9 μM)
Fat mass and obesity-associated protein (FTO) demethylase. FB23 inhibits FTO-mediated m⁶A demethylation with an IC₅₀ of 0.06 μM. FB23-2 maintains inhibitory activity on FTO demethylation in vitro. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
VPC-70063（25 μM；96 h）显示 Myc-Max 转录活性抑制 106%，Myc-Max/UBE2C 下游通路抑制 94%[1]。 VPC-70063 (6.25-25 μM, 48 h) 诱导 LNCaP 细胞凋亡，如 PARP 裂解所示[1]。 VPC-70063（0-500 μM；0-600 s）以剂量依赖性方式破坏 Myc-Max 与 DNA 的相互作用[1]。
FB23-2 处理导致 NB4 和 MONOMAC6 AML 细胞转录组中 m⁶A 丰度显著增加，这通过 m⁶A 斑点印迹实验检测证实。 LC-MS/MS 定量分析进一步确认了 AML 细胞暴露于 FB23-2 后 mRNA 中细胞 m⁶A 的增加。 FB23-2 显著抑制一组 AML 细胞系（NB4, MONOMAC6, MA9.3ITD, MA9.3RAS, U937, ML-2, MV4-11）的增殖，IC₅₀ 值范围在 0.8 μM 至 5.2 μM 之间。 FB23-2 对正常人骨髓细胞的增殖影响很小。 FB23 和 FB23-2 处理显著增加了 NB4 和 MONOMAC6 细胞中 ASB2 和 RARA 的 mRNA 和蛋白水平，并抑制了 MYC 和 CEBPA 的表达。 FB23-2 显著加速了全反式维甲酸（ATRA）诱导的 AML 细胞髓系分化，诱导了细胞凋亡，并导致细胞周期阻滞在 G1 期。 FB23-2 抑制了来自四位患者的原代 AML 细胞的增殖，诱导了凋亡，降低了集落形成能力，并加速了 ATRA 介导的髓系分化。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在使用移植了 MONOMAC6 AML 细胞的 NSGS 小鼠的异种移植白血病模型中，每日腹腔注射 FB23-2（2 mg/kg）连续 10 天，显著延迟了白血病症状的出现，显著延长了中位生存期，抑制了白血病恶性程度（减轻脾肿大和肝肿大），并在体内促进了 AML 细胞的分化。
在患者来源异种移植（PDX）AML 小鼠模型中，使用 FB23-2（6 mg/kg/天，腹腔注射，持续 17 天）治疗显著延长了疾病潜伏期，降低了外周血和骨髓中 AML 原始细胞的比例，诱导了 AML 细胞分化，削弱了白血病恶性程度（集落更少更小），并显著消除了白血病干细胞（LSC）。二次移植实验证实了 FB23-2 治疗后功能性 LSC 的减少。[1] |
| 酶活实验 |
使用基于 HPLC 的测定法来测量对 RNA 中 m⁶A 去甲基化的抑制。反应体系包含 FTO 蛋白、含有 m⁶A 的单链 RNA 底物、辅助因子（2-氧戊二酸、硫酸亚铁铵、L-抗坏血酸）以及所需浓度的抑制剂，置于 Tris-HCl 缓冲液中。混合物孵育后，通过加热终止反应。产物经核酸酶 P1 和碱性磷酸酶消化后进行 HPLC 分析。IC₅₀ 值根据 m⁶A 去甲基化的抑制百分比进行定量。[1]
进行细胞热位移测定（CETSA）以验证细胞条件下化合物与蛋白质的相互作用。细胞裂解物与化合物或 DMSO 孵育，然后在不同温度下加热以使蛋白质变性。离心后，通过蛋白质印迹分析上清液以检测目标蛋白的热稳定性。[1] 进行药物亲和反应靶点稳定性（DARTS）测定。细胞裂解物与化合物或 DMSO 孵育，然后用 Pronase 消化。反应被淬灭后，对裂解物进行蛋白质印迹以确定目标蛋白的丰度，该蛋白在配体结合后对蛋白酶具有抗性。[1] 使用荧光、AlphaLISA 或基于放射性的方法，按照标准方案对各种表观遗传酶（HDAC、LSD1、Jumonji 去甲基酶、BRD4、DOT1L）进行体外抑制实验。[1] 使用荧光抑制剂筛选试剂盒评估对环氧化酶 COX-1 和 COX-2 的抑制效果。酶与测试化合物孵育后，加入花生四烯酸和检测试剂，测量荧光。[1] 使用基于放射性的滤膜结合法对 405 种人类激酶进行了广泛的酶学特异性测试。计算并绘制了抑制百分比。[1] |
| 细胞实验 |
细胞增殖使用比色法细胞增殖测定试剂盒进行测定。细胞接种后用化合物或 DMSO 处理指定时间（72 或 96 小时）。加入测定试剂，孵育后测量吸光度。[1]
对于 m⁶A 斑点印迹实验，从处理过的细胞中分离总 RNA，并富集 poly(A)+ mRNA。RNA 样品变性后点样到膜上并进行交联。膜封闭后，与 m⁶A 抗体孵育，然后与 HRP 标记的二抗孵育并进行显色。[1] AML 细胞中 m⁶A 和 m⁶Aₘ 的 LC-MS/MS 定量分析涉及 mRNA 分离、去帽、核酸酶 P1 和碱性磷酸酶消化，以及使用液相色谱-串联质谱联用进行分析。[1] 对于细胞凋亡分析，细胞经化合物处理后收集、洗涤，并用 Annexin V 和 7-AAD 或 PI 染色。染色后的细胞通过流式细胞术进行分析。[1] 通过流式细胞术分析髓系分化。细胞在化合物存在下用 ATRA 诱导，然后用针对分化标记物（如 CD11b, CD14, CD15）的荧光标记抗体染色并分析。[1] 通过流式细胞术进行细胞周期分析。处理后的细胞固定/透化后，用碘化丙啶（PI）或 Hoechst 33342 与 Pyronin Y 的组合染色，然后进行分析。[1] 原代 AML 细胞的集落形成实验通过将细胞悬浮在含有或不含化合物的甲基纤维素培养基中，接种于培养皿，孵育 12 天后计数集落来进行。[1] |
| 动物实验 |
For the toxicity study in BALB/c mice, FB23-2 was formulated in a vehicle (composition not specified) and administered intraperitoneally daily at doses of 10, 20, 40, and 80 mg/kg for 14 days. Body weight and organ conditions were monitored. [1]
For pharmacokinetic profiling in Sprague Dawley rats, a single dose of 3 mg/kg FB23-2 (formulated in DMSO) was administered intraperitoneally. Blood samples were collected at multiple time points via retro-orbital bleeding for LC-MS/MS analysis. [1] For the MONOMAC6 xeno-transplantation efficacy study, NSGS mice were transplanted with AML cells via tail vein. After 10 days, mice received daily intraperitoneal injections of FB23-2 (2 mg/kg) or vehicle control for 10 days. Mice were monitored for survival and symptoms. [1] For the PDX model efficacy study, NSGS mice were sublethally irradiated and transplanted with primary human AML cells via tail vein. When engraftment reached 3–5% in peripheral blood, mice received daily intraperitoneal injections of FB23-2 (6 mg/kg) or vehicle control (DMSO) for 17 days. Mice were monitored for survival and engraftment levels. [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
Following a single 3 mg/kg intraperitoneal dose in rats, FB23-2 had a Cₘₐₓ of 2421.3 ± 90.9 ng/ml, Tₘₐₓ of 0.08 hr, elimination half-life (T₁/₂) of 6.7 ± 1.3 hr, and AUC₀–₂₄ of 2184 ± 152 hr × ng/ml.
FB23 (a hydrolysis metabolite of FB23-2) was also detected, with a Cₘₐₓ of 142.5 ± 26.1 ng/ml and Tₘₐₓ of 0.4 ± 0.1 hr. The metabolic stability of FB23-2 in rat liver microsomes showed an estimated T₁/₂ of 128 min and an intrinsic clearance of 19.7 ml/min/kg. Plasma protein binding for FB23-2 was nearly 100%. [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
In a 14-day repeat-dose toxicity study in BALB/c mice, intraperitoneal administration of FB23-2 at 20 mg/kg daily showed no evidence of body weight loss or physical damage to vital organs (heart, kidney, lung, liver, spleen).
Hematology and plasma biochemistry analysis revealed no significant differences between the vehicle control and the 20 mg/kg FB23-2-treated group. [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
FB23 and FB23-2 are small-molecule inhibitors developed through structure-based rational design targeting the oncogenic mRNA m⁶A demethylase FTO, which is overexpressed in a subset of acute myeloid leukemias (AML).
FB23-2 is a benzohydroxamic acid derivative of FB23, designed to improve cellular permeability. The inhibitors display high selectivity for FTO over the related demethylase ALKBH5 and a panel of other epigenetic targets and kinases. The anti-leukemic effects are mediated through FTO inhibition, leading to increased m⁶A RNA methylation, which in turn regulates critical genes and signaling pathways (e.g., downregulating MYC, CEBPA and upregulating RARA, ASB2), resulting in suppressed proliferation, induced differentiation, and apoptosis in AML cells and LSCs. [1] |
| 分子式 |
C16H12N2F6S
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|---|---|
| 分子量 |
378.335
|
| 精确质量 |
378.06
|
| 元素分析 |
C, 50.80; H, 3.20; F, 30.13; N, 7.40; S, 8.47
|
| CAS号 |
13571-44-3
|
| 相关CAS号 |
13571-44-3
|
| PubChem CID |
4142933
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
|
| LogP |
4.8
|
| tPSA |
56.2
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
423
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
PIQMVCPITQIXGJ-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C16H12F6N2S/c17-15(18,19)11-6-12(16(20,21)22)8-13(7-11)24-14(25)23-9-10-4-2-1-3-5-10/h1-8H,9H2,(H2,23,24,25)
|
| 化学名 |
1-benzyl-3-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]thiourea
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| 别名 |
VPC70063; VPC-70063; VPC 70063
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6431 mL | 13.2156 mL | 26.4313 mL | |
| 5 mM | 0.5286 mL | 2.6431 mL | 5.2863 mL | |
| 10 mM | 0.2643 mL | 1.3216 mL | 2.6431 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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c-Myc inhibitor 11
MYC-RIBOTAC
c-Myc inhibitor 12
MDEG-541
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