| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
W146 is a selective antagonist of the Sphingosine 1-Phosphate Receptor Subtype 1 (S1P1). It is the (R)-enantiomer of 3-amino-4-(3-hexylphenylamino)-4-oxobutyl phosphonic acid, while its inactive enantiomer is W140 [2,3].
W146 targets the sphingosine-1-phosphate receptor 1 (S1P1), a G protein-coupled receptor (GPCR). It is a selective antagonist with a Ki of 18 nM and an EC50 of 398 nM. It displays no effect at S1P2, S1P3, or S1P5. By blocking S1P1, it modulates immune cell trafficking and vascular permeability. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在大鼠骨髓来源的内皮祖细胞 (EPC) 中，用 W146 (10 μM) 预处理 30 分钟可显著抑制 S1P 诱导的细胞增殖（MTS 法检测）。W146 还阻断了 S1P 诱导的 Akt 磷酸化（Western blot 检测）以及 S1P 诱导的 VEGF 分泌和表达。此外，W146 (10 μM) 预处理显著逆转了 S1P 对 H₂O₂ 诱导的细胞凋亡的保护作用，表现为 TUNEL 标记指数和 cleaved caspase-3 水平升高 [3]。W146 是 S1PR1 的拮抗剂，其 Ki 值约为 70–80 nM [1]。W146 预处理显著提高了活化的 cleaved caspase-3 的含量。接受 W146 治疗后，S1P 诱导的 EPC 细胞凋亡减少现象完全消失 [2]。体外实验表明，W146 具有强效且选择性的 S1P1 拮抗活性。它能显著提高内皮祖细胞 (EPC) 中活化的裂解型 caspase-3 水平。与其他 S1P 受体亚型相比，W146 对 S1P1 具有选择性，这使其成为解析 S1P1 在不同细胞环境中具体作用的宝贵工具。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在C57BL/6小鼠中，预先腹腔注射W146（5 mg/kg体重），1小时后皮下注射AMD3100（5 mg/kg体重），可显著增强AMD3100刺激的Kit+/Sca-1+/Lin- (KSL)造血干细胞（HSPC）向外周血的动员。通过CFU-G/M集落形成实验测得，W146介导的增强作用约为8倍。单独使用W146处理对KSL-HSPC的动员没有影响[2]。W146介导的KSL-HSPC动员增强作用具有特异性，因为预先用W140处理小鼠对AMD3100刺激的KSL-HSPC动员没有影响。在给予 AMD3100 之前预先腹腔注射 W146（5 mg/kg），与单独使用 AMD3100 治疗的小鼠相比，通过 CFU-G/M 集落形成实验测得的 KSL-HSPC 动员量增加了约 8 倍 [3]。注射 W146、W140、JTE013 或 Cay10444 后，小鼠的基础白细胞计数保持不变 [3]。
在体内，W146 用于研究 S1P1 在免疫细胞迁移和血管功能中的作用。它能增强毛细血管渗漏并恢复淋巴细胞的迁移。它与小鼠的血液淋巴细胞减少症和肺水肿有关。其潜在的临床应用包括多发性硬化症、冠状动脉疾病、糖尿病和癌症。 |
| 酶活实验 |
W146 的体外受体结合试验包括使用表达 S1P1 受体的细胞膜进行竞争性结合研究。将该化合物与放射性标记的配体（例如 [3H]-S1P）在不同浓度下孵育。通过测量放射性配体的置换量来确定结合亲和力 (Ki)。EC50 值通过测量其对 S1P1 介导的信号通路（例如 GTPγS 结合或 β-arrestin 募集）的影响来确定。
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| 细胞实验 |
内皮祖细胞 (EPC) 增殖检测 (MTS)：将大鼠骨髓来源的 EPC 以 1×10⁴ 个细胞/孔的密度接种于 96 孔板中，并在无血清培养基中培养 12 小时。细胞用 W146 (10 μM) 预处理 30 分钟，随后用 S1P (800 nM) 刺激。8 小时后，加入 MTS 试剂 (20 μL/孔) 并继续孵育 8 小时。使用酶标仪在 490 nm 波长处测量光密度值 [3]。EPC 凋亡检测 (TUNEL)：EPC 用 W146 (10 μM) 预处理 30 分钟，随后用 S1P (800 nM) 处理 30 分钟，最后用 H₂O₂ (600 μM) 处理 6 小时。根据制造商说明，使用 TUNEL 检测试剂盒固定和染色细胞。使用 DAPI 进行核染色。在共聚焦显微镜下计数 TUNEL 阳性细胞，并将标记指数计算为阳性细胞与总细胞数的比值 [3]。
Western Blot 分析：将 EPC 培养于 6 孔板中至 80% 汇合度，然后用 W146 (10 μM) 预处理 30 分钟，再用 S1P (800 nM) 刺激 30 分钟（用于检测 Akt 磷酸化）或 24 小时（用于检测 VEGF 表达）。将细胞裂解液进行 SDS-PAGE 电泳，转移至 PVDF 膜，并用针对磷酸化 Akt、总 Akt、cleaved caspase-3、VEGF 和 GAPDH 的抗体进行检测。蛋白质条带通过增强化学发光法显色[3]。 细胞凋亡分析[2] 细胞类型：内皮祖细胞 (EPC)。 测试浓度：10μM。 孵育时间：加入S1P前30分钟。 实验结果：活化的裂解型caspase-3水平升高。 W146的体外细胞功能分析采用表达S1P1受体的细胞。用该化合物处理细胞，并测量S1P诱导的信号传导的抑制情况。这包括测量cAMP积累的抑制（针对Gi偶联受体）或钙动员的抑制。EC50值由浓度-反应曲线计算得出。 |
| 动物实验 |
造血干细胞动员研究（小鼠）：C57BL/6小鼠（6-8周龄，每组5只）腹腔注射W146（5 mg/kg体重）或载体。1小时后，小鼠皮下注射AMD3100（5 mg/kg）。AMD3100给药2小时后，从下腔静脉采集约500 μL外周血至EDTA抗凝管中。进行全血细胞计数，红细胞裂解后，用谱系标记物Sca-1和c-Kit抗体对KSL-HSPC进行染色，然后通过流式细胞术进行分析。采用甲基纤维素培养基进行CFU-G/M集落形成实验[2]。内皮祖细胞研究（大鼠）：体外实验采用从Sprague-Dawley大鼠分离的骨髓来源内皮祖细胞（EPC）。在S1P刺激前30分钟，用浓度为10 μM的W146处理细胞[3]。
动物/疾病模型：小鼠（4-6周龄）[3]。 剂量：5 mg/kg。给药方式：腹腔注射，AMD3100（ADM）于给药前1小时给药。 实验结果：与预先用葡聚糖处理后再给予AMD3100的小鼠相比，KSL-HSPC动员显著增加。 W146的体内动物实验在小鼠模型中进行。该化合物通过口服或腹腔注射给药。通过测量血液淋巴细胞计数来评估其对淋巴细胞迁移的影响。通过使用伊文思蓝染料测量毛细血管渗漏来评估其对血管通透性的影响。还可以评估其在疾病模型（例如用于治疗多发性硬化症的实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE)）中的潜在疗效。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
W146 是一种固体化合物，分子量为 410.55 g/mol，可溶于 DMSO。通常以粉末形式储存于 -20°C 以确保长期稳定性。在推荐的储存条件下，其稳定性得以维持。对于体内研究，可将其配制成合适的溶剂，例如 DMSO、PEG300 和生理盐水。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠造血干细胞动员研究中，腹腔注射给予小鼠 5 mg/kg 的 W146，未观察到明显的毒性反应。使用非活性对映体 W140 作为对照，也未观察到任何作用 [2]。在大鼠内皮祖细胞 (EPC) 研究中，体外使用浓度为 10 μM 的 W146，未观察到细胞毒性 [3]。由于 W146 是一种研究用化合物，其毒理学数据有限，不适用于人体。目前尚未有全面的毒性研究报告。应遵循化学试剂操作的标准安全预防措施。其对淋巴细胞迁移和血管通透性的影响提示其可能具有显著的免疫调节作用。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
[(3R)-3-氨基-4-[(3-己基苯基)氨基]-4-氧代丁基]-膦酸是一种氨基酸酰胺。
W146 是一种尚未获得临床批准的研究化合物。它是研究 S1P1 生物学以及 S1P 信号在免疫功能、血管生物学和疾病中的作用的重要工具。它被用于药物研发项目中，以探索 S1P1 拮抗剂在治疗多发性硬化症、癌症和其他疾病方面的治疗潜力。 |
| 分子式 |
C16H27N2O4P
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|---|---|
| 分子量 |
342.37038
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| 精确质量 |
342.171
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| 元素分析 |
C, 56.13; H, 7.95; N, 8.18; O, 18.69; P, 9.05
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| CAS号 |
909725-61-7
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| 相关CAS号 |
W146 TFA;909725-62-8
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| PubChem CID |
6857802
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.992
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| tPSA |
125.95
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
23
|
| 分子复杂度/Complexity |
400
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
CCCCCCC1=CC(=CC=C1)NC(=O)[C@@H](CCP(=O)(O)O)N
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| InChi Key |
FWJRVGZWNDOOFH-OAHLLOKOSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H27N2O4P/c1-2-3-4-5-7-13-8-6-9-14(12-13)18-16(19)15(17)10-11-23(20,21)22/h6,8-9,12,15H,2-5,7,10-11,17H2,1H3,(H,18,19)(H2,20,21,22)/t15-/m1/s1
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| 化学名 |
[(3R)-3-amino-4-(3-hexylanilino)-4-oxobutyl]phosphonic acid
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| 别名 |
909725-61-7; W-146; W 146; P-((3R)-3-Amino-4-((3-hexylphenyl)amino)-4-oxobutyl)phosphonic acid; P-[(3R)-3-Amino-4-[(3-hexylphenyl)amino]-4-oxobutyl]phosphonic acid; RefChem:367534; W146;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9208 mL | 14.6041 mL | 29.2082 mL | |
| 5 mM | 0.5842 mL | 2.9208 mL | 5.8416 mL | |
| 10 mM | 0.2921 mL | 1.4604 mL | 2.9208 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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